|
ГНЦ Вирусологии и Биотехнологии «Вектор» (п. Кольцово)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы VI конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2005. – 120 с.
Скачать сборник целиком
Разнообразие и непредсказуемость эпидемических штаммов вируса гриппа усложняют мероприятия по иммунопрофилактике и лечению гриппозной инфекции.
Целью данного исследования является изучение и разработка «батареи» тестов по определению противовирусной активности ингибиторов гемагглютинина вируса гриппа. В задачи исследования входит:
1. предварительный скрининг и характеризация ингибиторов гемагглютинина in vitro
1. 1. в тесте ингибирования связывания штаммов вируса гриппа с фетуином (FBI-тест); 1. 2. в тесте ингибирования инфекционности штаммов вируса гриппа на культуре клеток MDCK;
2. in vivo характеризация противовирусной активности ингибиторов на непатологической модели гриппозной инфекции на мышах
2. 1. выбор представительного набора штаммов вируса гриппа для определения широкой противовирусной специфичностиразрабатываемого ингибитора;
2. 2. изучение противовирусной активности ингибиторов при респираторном заражении мышей.
Для выбора непатологической модели гриппозной инфекции в работе использовали как адаптированные, так и неадаптированные к мышам штаммы вируса гриппа (штаммы А субтипов H3N2 и H1N1 и штаммы субтипа В). Для них определили значения респираторных 50%-ных инфицирующих доз (вызывающих заражение, но не гибель мышей) как при интраназальном, так и аэрогенном способах заражения. Для характеризации ингибиторов гемагглютинина выбрали тесты in vitro. При этом FBI-тест определяет взаимодействие вируса только с ингибитором, а тест ингибирования инфекционности на культуре клеток моделирует реальную ситуацию взаимодействия вируса с клеткой в присутствии ингибитора. Различие в значениях IC50 (почти на 2 порядка) может указывать на преобладающее значение диффузионных механизмов в процессе ингибирования вируса. Длительность совместного инкубирования ингибитора и вируса до нанесения их смеси на чувствительную систему (молекулы фетуина или монослой клеток MDCK) также является важным фактором, влияющим на сложный процесс вирус-клеточного взаимодействия в присутствии ингибитора адсорбции вируса на клеточных рецепторах, что следует предусмотреть при выборе схемы испытания препарата на животных.
Таким образом, показана принципиальная возможность характеризации противовирусных препаратов на непатологической модели (мыши) для представителей разных субтипов вируса гриппа без предварительной их адаптации к тест-системе.
|
