|
Сибирский Государственный Медицинский Университет, г.Томск
Кафедра инфекционных болезней и эпидемиологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 71-й итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 14-16 мая 2012 г.), под ред. В. В. Новицкого, Н.В. Рязанцевой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2012. − 335 с.
Скачать сборник (MS Word, 1 мб)
Актуальность. Иксодовый клещевой боррелиоз – инфекционное трансмиссивное природно-очаговое заболевание, имеющее тенденцию к хроническому и рецидивирующему течению, поражающее различные органы и системы. Известно, что функциональное состояние лимфоцитов, отражающее особенности иммунного ответа на возбудитель инфекции, можно оценивать, изучая морфологические особенности этих клеток. Ядрышки являются местом синтеза рибосомной РНК - функции рибосомных генов, локализованных в ядрышкообразующих районах (ЯОР) акроцентрических хромосом групп D и G. Размеры ЯОР отражают транскрипцию рибосомных генов и пролиферативную активность клетки и могут изменяться под воздействием экзогенных факторов.
Цель. Установить особенности изменения размеров ЯОР в лимфоцитах периферической крови и условиях in vitro в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином (ФГА) в реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) периферической крови у больных острым иксодовым клещевым боррелиозом.
Материал и методы. В качестве материала использовалась капиллярная и венозная кровь 9 больных эритемным или безэритемным серопозитивным вариантом острого ИКБ, поступивших на 8-24 день от начала болезни. Контрольная группа состояла из 10 здоровых лиц, не подвергавшихся ранее укусам клещей и не имевших в крови специфических антител к антигенам боррелий. Взятие образцов крови осуществляли в динамике на 1-ый, 10-ый и 30-ый дни, то есть до и после окончания курса антибиотикотерапии. Из полученных образцов крови готовили мазки для анализа формулы крови, а также получали для постановки РБТЛ ФГА-стимулированные культуры лимфоцитов, которые инкубировали во флаконах в среде RPMI-1640 при температуре 37 оС в присутствии 5% СО2 в течение 72 ч. В полученных препаратах использовался метод выявления ЯОР в ядрах клеток с применением нитрата серебра. Определенная с помощью программы анализа изображений ImageJ суммарная площадь аргирофильных ЯОР в ядре находится в прямой зависимости от транскрипционной активности локализованных в акроцентрических хромосомах генов, кодирующих прерибосомную РНК, и отражает пролиферативную активность клетки.
Результаты. При анализе мазков крови и препаратов ФГА-стимулированной РБТЛ, полученных на 1-ый день госпитализации больных ИКБ, число клеток с крупными ЯОР (КЯОР) было существенно ниже, а число лимфоцитов с мелкими ЯОР (МЯОР) оказалось достоверно выше, чем в клетках, полученных от группы контроля. В препаратах, полученных от больных ИКБ на 10-ый день от начала терапии было отмечено значительное повышение числа клеток с КЯОР и уменьшение числа клеток с МЯОР, по сравнению, с соответствующими показателями, полученными в контроле и в этих же группах на 1-ый день госпитализации. При исследовании на 30-ый день от начала госпитализации число клеток с МЯОР и КЯОР в группе больных ИКБ достоверно не отличались от данных, полученных в контроле.
Выводы. Не исключено, что существенное снижение числа клеток с КЯОР в крови больных ИКБ отражает подавление пролиферации лимфоцитов на 2-3 неделе от начала заболевания, а увеличение этого показателя на 10-ый день в группах больных ИКБ может свидетельствовать о восстановлении функциональной активности иммунокомпетентных клеток после проведения курса антибиотикотерапии, что позволяет говорить о возможности применения изучения активности ЯОР для оценки эффективности проводимой терапии.
|
