Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Лаборатория иммунофармакологии НИИ фармакологии СО РАМН
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 68-й научной итоговой студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 20-22 апреля, 2009 год); под реакцией академика РАМН В.В. Новицкого, член. корр. РАМН Л.М. Огородовой
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (1,5 мб)
В последнее время весьма важное значение приобретает вопрос создания фармакологических средств для профилактики и лечения ряда заболеваний и патологических состояний человека, связанных с нарушением работы иммунной системы. В изучении вопроса иммуномодуляции главенствующей задачей является выбор наиболее оптимальных лекарственных средств, отвечающих определенным требованиям. Количество иммунокоррегирующих препаратов весьма велико на данный момент, их можно разделить на препараты, полученные химическим синтезом, препараты биогенного и растительного происхождения [1, 3]. На фоне всех имеющихся противопоказаний к вышеперечисленным препаратам, более благоприятно складывается ситуация с растительными иммунокорректорами. Благодаря наличию в них комплекса биологически активных веществ, препараты природного происхождения имеют ряд преимуществ перед синтетическими и биогенными: обеспечивают мягкое действие, низкую токсичность, комплексное воздействие на организм, возможность применения у лиц с сочетанными патологиями [2].
Материал и методы. Эксперименты были проведены на 130 мышах линии СВА/СаLac массой 18-20 г в возрасте 2-2,5 месяцев. Животные первой категории получены из коллекционного фонда лаборатории экспериментального биомедицинского моделирования НИИ фармакологии СО РАМН (сертификат имеется). До и в период эксперимента мыши находились в пластиковых клетках (по 5 особей) с мелкой древесной стружкой на стандартном рационе. Все эксперименты проведены в осенне-зимний период. В опыте были использованы экстракты таких растений, как крапива двудомная, чеснок посевной, эхинацея пурпурная, рябина обыкновенная, алтей лекарственный, липа сердцевидная, солодка голая, лопух большой, череда трехраздельная, мать-и-мачеха обыкновенная, алоэ древовидное, которые вводились животным в течение пяти дней. Экстракты были получены методом реперколяции с использованием 40% этилового спирта в соотношении 1:1 и стандартизованы по сухому остатку. В качестве препарата сравнения использовалась фармакопейная настойка эхинацеи пурпурной фирмы «Галенофарм». Перед введением все препараты подвергались деалкоголизации. Введение исследуемых экстрактов осуществлялось в объеме 0,2 мл, в качестве растворителя использовалась дистиллированная вода. Животные контрольной группы получали соответствующий объем растворителя. После окончания введения препаратов животные контрольной и всех опытных групп иммунизировались корпускулярным тимусзависимым антигеном – эритроцитами барана однократно внутрибрюшинно по 0,2 мл 15% взвеси. Антигены перед употреблением были трехкратно отмыты стерильным физиологическим раствором. Забор материала осуществляли на 4-е и 7-е сутки после иммунизации из хвостовой вены, объемом 10 мкл. Для предотвращения свертывания исследуемые образцы смешивали с 3 мкл гепарина (концентрация 500 ед/мл). Далее к клеткам добавляли равный объем частиц меламиноформальдегидного латекса, размером частиц 1,5-2 мкм (концентрация 60 тыс./мкл) и инкубировали при 37 в течение 30 мин в термостатирующем шейкере. После инкубации пробирки центрифугировали при скорости 5 тыс.об./мин в течение 5-ти минут. Затем удаляли 10 мкл надосадочной жидкости, осадок ресуспендировали и делали мазок. Высушенные мазки фиксировали и окрашивали по Май–Грюнвальду. Подсчет фагоцитирующих нейтрофилов проводили под световым микроскопом с иммерсией, окуляр-10, объектив-90. Учитывали процент нейтрофилов, поглотивших частицы латекса (фагоцитарный индекс – ФИ) и среднее число частиц, поглощенное одной клеткой (фагоцитарное число – ФЧ). Статистическую обработку осуществляли с использованием пакета программ «Statistica»5.0.
Результаты. Курсовое введение животным экстрактов таких растений как крапива двудомная и лопух большой приводило к существенной стимуляции фагоцитарной активности нейтрофилов на 4 сут эксперимента (относительно группы контроля) как за счет повышения доли нейтрофилов, способных поглощать латекс (ФИ), так и за счет увеличения количества поглощенных каждой клеткой частиц (ФЧ). При этом стимулирующее действие этих препаратов оказалась выше, чем у фармакопейной настойки эхинацеи пурпурной. Интересен тот факт, что в эти сроки исследования ФЧ во всех опытных группах было достоверно выше, чем у животных, получавших только растворитель.
К 7 сут после иммунизации фагоцитарная активность нейтрофилов превышала уровень контроля в группах мышей, которым вводили экстракты эхинацеи, крапивы, солодки, лопуха за счет увеличения ФИ; череды, мать-и-мачехи за счет повышения ФЧ и рябины, алтея и липы за счет стимуляции обоих показателей. Настойка эхинацеи на данном этапе эксперимента не оказывала влияния на изучаемые показатели.
Таким образом, экстракты крапивы двудомной, лопуха большого, рябины обыкновенной, алтея лекарственного и липы сердцевидной можно рекомендовать в качестве стимуляторов одного из фактов неспецифической резистентности, что представляет собой интерес при лечении хронических, вялотекущих заболеваний.
Список литературы:
1. Бакуридзе, А. Д. Иммуномодуляторы растительного происхождения / А. Д. Бакуридзе, М. Ш. Курцикидзе, В. М. Писарев и др. // Химико-фармацевтический журнал. – 1993. – № 8. – С. 43-47.
2. Исайкина, Н. В. Исследование клинической эффективности растительного препарата «Эхиносол» при малых аномалиях иммунитета / Н. В. Исайкина, В. В. Климов, Г. И. Калинкина, В. Н. Буркова // Бюллетень СО РАМН. – 2001. – № 3. – С. 15-18.
3. Новиков, Д. К. Иммунотропные лекарства / Д. К. Новиков, Ю. Н. Деркач, П. Д. Новиков // В мире лекарств. – 1999. – № 2. – С. 48-57
