Актуальность проблемы. Ключевыми клетками иммунной системы, формирующими специфический иммунный ответ против микобактерий, являются альвеолярные макрофаги и Т-лимфоциты, обладающие способностью синтезировать цитокины. Обладая колоссальным потенциалом формирования и регуляции защитных реакций, цитокины претендуют на роль главных медиаторов иммунной системы, действующих на все без исключения стороны развития неспецифической резистентности и специфического иммунитета [2, 3, 5].

Лечение туберкулеза легких, основанное на длительной комбинированной химиотерапии, может сопровождаться нарушениями структуры, метаболизма и функций клеток иммунной системы, связанными с цитотоксическими эффектами препаратов, что осложняет течение заболевания и снижает эффективность терапии [1, 4]. Однако, предполагая иммуносупрессивное действие химиопрепаратов в условиях характерного для туберкулезного процесса вторичного иммунодефицита, без наличия соответствующих экспериментальных исследований нельзя с уверенностью сказать об их вкладе в развитие данного состояния, так как практически нет работ, посвященных изучению иммунотропной активности препаратов химиотерапии туберкулеза легких. В связи с этим, особую актуальность приобретает исследование цитокинпродуцирующей способности лимфоцитов в условиях прямого действия противотуберкулезных препаратов.

Цель исследования: Оценить влияние противотуберкулезных препаратов основного ряда на продукцию IL-2 и IFN-γ лимфоцитами периферической крови при лекарственно-чувствительном инфильтративном туберкулезе легких.

Материалы и методы исследования. В основу работы положены данные обследования 30 впервые выявленных больных (мужчин и женщин) с инфильтративным лекарственно-чувствительным туберкулезом легких в возрасте 18-55 лет. Диагноз заболевания устанавливали на основании клинической картины заболевания, данных рентгенологического исследования легких, результатов микроскопического и бактериологического исследования мокроты. Материалом для исследования служила периферическая кровь, забранная из локтевой вены утром натощак в количестве 10 мл. Выделение лимфоцитов осуществляли методом центрифугирования на градиенте плотности фиколл-урографина 1,077 г/см3. Для стимуляции секреторных способностей лимфоцитов в пробы вносили 6 мкг/мл белкового микобактериального антигена (Институт им. Макса Планка, Берлин, Германия). Для оценки влияния противотуберкулезных препаратов на цитокинпродуцирующую активность лимфоциты периферической крови культивировали в присутствии изониазида (10 мкг/мл), рифампицина (25 мкг/мл) и этамбутола (30 мкг/мл). Определение уровня продукции IL-2 и IFN-γ осуществляли методом твердофазного иммуноферментного анализа согласно инструкциям, предлагаемым производителем тест-систем («Протеиновый контур», Санкт-Петербург, Россия). Статистическая обработка результатов проводилась с помощью пакета прикладных программ Statistica 6,0.

Результаты исследования. Культивирование лимфоцитов периферической крови с рифампицином сопровождалось увеличением продукции IL-2 как у здоровых доноров, так и у больных туберкулезом легких (в среднем в 1,7 и 1,4 раза соответственно) относительно уровней спонтанной, белок-стимулированной его секреции, а также при инкубации с изониазидом и этамбутолом (табл. 1). При этом в группе здоровых доноров в присутствии этамбутола отмечалось, напротив, угнетение уровня продукции IL-2 (табл. 1).

Исследование продукции IFN-γ у больных туберкулезом легких позволило установить увеличение уровня его секреции при стимуляции клеток белковым микобактериальным антигеном и при инкубации лимфоцитов с изониазидом по сравнению с уровнем спонтанной продукции IFN-γ (табл. 1). При инкубации лимфоцитов периферической крови с рифампицином как у здоровых доноров, так и у больных туберкулезом легких регистрировалось снижение продукции IFN-γ относительно таковой при белковой стимуляции и при культивировании клеток с изониазидом (табл. 1).

Таким образом, снижение секреции IFN-γ у больных туберкулезом легких в ответ на применение рифампицина может негативно влиять на эффективность Тh1-клеточного ответа и усугублять течение инфекционного процесса. Это обосновывает необходимость проведения иммунокоррекции.

Таблица 1

Уровень секреции IL-2 и IFN-γ лимфоцитами периферической крови у больных инфильтративным лекарственно-чувствительным туберкулезом легких, Х±m

Примечание: р1 – уровень статистической значимости различий по сравнению с базальным уровнем продукции цитокина; р2 – по сравнению с белок-стимулированным уровнем продукции цитокина; р3 – по сравнению с аналогичными показателями у здоровых доноров; р4 – по сравнению с продукцией цитокина при инкубации с изониазидом; р5 – по сравнению с продукцией цитокина при инкубации с этамбутолом.

 

Список литературы:

1.      Особенности функциональной активности лимфоцитов крови у больных туберкулезом / В. В. Новицкий, А. К Стрелис, О. И. Уразова и др. // Иммунология. – 2006. - № 2. – С.76-79.

2.      Cимбирцев, А. С. Роль цитокинов в регуляции физиологических функций иммунной системы / А. С. Cимбирцев // Физиология и патология иммунной системы. – 2004. – Т. 8, № 10. – С. 3-10.

3.      Черешнев, В. А. Иммунология воспаления: роль цитокинов / В. А. Черешнев, Е. Ю. Гусев // Мед. иммунология. – 2001. – Т. 3, № 3. – С. 361-368.

4.      IL-10 – producing T cells suppress immune response in anergic tuberculosis patients / V. A. Boussiotis, E. Y. Tsay, E. J. Yunis et al. // J.Clin. Invest. – 2000. – Vol. 105. – P. 1317-1325.

5.      Influence of disease severity on nitrite and cytokine production by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from patients with pulmonary tuberculosis / D. Dlugovitzky, M. L. Bay, L. Rateni et al. // Clinical & Experimental Immunology. – 2000. – Vol. 122, № 3. – P. 343-349.