Ранее работами Ю.А.Витковского, А.В.Солпова и Б.И.Кузника (1999-2002) [1-3] обнаружен феномен лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии. Авторами установлено, что лимфоциты способны к спонтанному розеткообразованию с тромбоцитами. В общем пуле лимфоцитов обнаруживалось до 14 + 1% розеткообразующих клеток. Показано, что клетками, спонтанно взаимодействующими с кровяными пластинками, являются Т-лимфоциты, несущие маркеры CD3+ и CD4+. Количественно число розеток СБ4+-лимфоцитов соответствовало содержанию таковых среди CD3+-ioieTOK. Выявлено, что после 4-х часовой инкубации с ИЛ-1 бета, ИЛ-2 в общем пуле лимфоцитов количество розеткообразующих лимфоцитов повысилось более, чем в 4 раза. После разделения клеток на твердой поверхности, обнаружено, что способностью взаимодействовать с тромбоцитами обладают не только клетки, несущие детерминанты CD4+ (Т-хелперы), но и CD16+ (натуральные киллеры). Предварительная инкубация лимфоцитов с моноклональными антителами против ИЛ-2 полностью устраняла способность образовывать розетки с тромбоцитами для натуральных киллеров и значительно тормозила эту функцию уТ-хелперов. Полученные результаты свидетельствуют об участии тромбоцитов в регуляции функции иммунокомпетентных клеток.
Целью настоящей работы явилось изучение роли агонистов агрегации тромбоцитов в лимфоцитарно-тромбоцитарном взаимодействии.
Исследование проводилось на цельной цитратной крови здоровых доноров. Предварительно в образцы крови вносили ингибитор агрегации тромбоцитов - тирофибан. В контрольные образцы добавлялся физиологический раствор в том же объеме. После инкубации в течение 10 минут при 37оС в исследуемые образцы вносились различные индукторы агрегации тромбоцитов. В качестве индукторов использовались АДФ, коллаген, фактор активации тромбоцитов (ФАТ), адреналин, арахидоновая кислота. После повторной инкубации в течение 20 минут кровь наслаивали на градиет фикол-урографин и выделяли лимфоциты. Лимфоцитарно-тромбоцитарные агрегаты подсчитывались в камере Горяева и в мазках по оригинальной методике.
Установлено, что в контрольной серии количество лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов (ЛТА) составило 13%. Внесение тирофибана несущественно повышало число лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов на 2-3%. Добавление АДФ и коллагена увеличивало ЛТА до 23% и 26% соответственно. После внесения ФАТ процент ЛТА увеличился на 3% по сравнению с контролем.
При подсчете количества тромбоцитов, вступивших в контакт с отдельным лимфоцитом, обнаружено, что в контроле их число составляло в среднем 4,7 ± 0,8. Добавление тирофибана снижало количество кровяных пластинок в среднем до 2,0 ± 0,3 на одном лимфоците. Однако внесение коллагена на фоне тирофибана увеличивало их число до 7,1 ± 1,1 на единичной клетке. Добавление других индукторов активации на фоне тирофибана не изменяло характер лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что наиболее выражено повышают лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию коллаген и АДФ. Другие агонисты (ФАТ, адреналин, арахидоновая кислота) не оказывают существенного влияния на способность тромбоцитов прилипать к лимфоцитам.