|
Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 63-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2004 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (формат .PDF, 4,2 мб)
Системный клещевой боррелиоз (Лайм-боррелиоз) - зоонозная бактериальная инфекционная природно-очаговая болезнь с трансмиссивным механизмом передачи возбудителя. Основной переносчик возбудителя - иксодовые клещи [1]. Учитывая широкий ареал их обитания на территории России и высокую восприимчивость людей к заболеванию, актуальным является вопрос создания отечественных вакцин против клещевого боррелиоза. Производство подобных препаратов предполагает исследования in vivo и in vitro для оценки иммуногенности разных вариантов антигена.
Целью настоящей работы стала оценка влияния разных модификаций боррелиозного антигена на активность внутриклеточной миелопероксидазы.
В работе использовали 2 варианта боррелиозного антигена: нативный корпускулярный антиген изолята B.garinii, выделенный из клещей, собранных на территории Томской области, и обработанный ультразвуком. Для исследования были отобраны 20 здоровых добровольцев из числа жителей г. Томска в возрасте от 18 до 45 лет, ранее никогда не подвергавшихся укусам клещей. Факт отсутствия заражения боррелиями подтверждался на базе ФГУП НПО «Вирион» с помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции (нРИФ). Оценка активности миелопероскидазы проводилась по методу Грэхема - Кнолля с выявлением степени активности (ICT. - наличие в цитоплазме единичных окрашенных гранул; Ист. - половина цитоплазмы заполнена коричневыми гранулами; Шст. - цитоплазма равномерно заполнена гранулами, окрашенными в коричневый цвет) и вычислением среднего цитохимического коэффициента (СЦК) [2].
Результаты исследования представлены в таблице 1.
Таблица 1. Степень активности
миелопероксидазы (в %)
|
Степень активности
|
Без нагрузки боррелиозным антигеном
|
Нативный боррелиозный антиген
|
Озвученный боррелиозный антиген
|
|
I степень
|
2,03±0,75
|
4,63±0,93**
|
7,91±0,88*
|
|
II
степень
|
10,38±2,02
|
38,12±3,35*
|
41,73±2,91*
|
|
III
степень
|
87,59±2,11
|
57,27±3,24*
|
50,36±2,67*
|
Примечание: * - р<0.001 в
сравнении с активностью до нагрузки антигеном; ** - р<0.05 в сравнении с
активностью до нагрузки антигеном
Состояние системы миелопероксидазы у здоровых доноров до нагрузки боррелиозным антигеном: во всех нейтрофилах определялись гранулы миелопероксидазы, преобладали клетки с III степенью активности. В меньшей степени обнаруживались клетки со II-ой и минимальное количество с I степенью активности. Средний цитохимический коэффициент составил 2,861±0,02.
При нагрузке нативным боррелиозным антигеном распределение клеток по степеням активности соответствовало контрольным значениям, однако, возросла доля клеток с I и II степенями активности в 2 и 4 раза соответственно. Средний цитохимический коэффициент составил 2,527±0,03, что достоверно ниже СЦК до нагрузки боррелиозным антигеном (р<0,001).
При культивировании нейтрофилов в присутствии боррелиозного антигена, обработанного ультразвуком, получили аналогичную тенденцию распределения клеток по степеням активности и ещё большее увеличение доли клеток со II и I степенями активности. Средний цитохимический коэффициент составил 2,43±0,03, что достоверно ниже контрольного (р<0,001) и достоверно ниже СЦК при нагрузке нативным антигеном (р<0,05).
Выявленные изменения свидетельствуют о выраженной активации внутриклеточной миелопероскидазы боррелиозным антигеном. Уменьшение доли клеток с высокой (III) степенью активности связано с активацией нейтрофилов во время инкубации и расходованием внутриклеточного фермента.
При обработке боррелий ультразвуком происходит их разрушение и фрагментация, что повышает вероятность активации лизосомальных ферментов, возможно, это объясняет наиболее сильное влияние на активность внутриклеточной миелопероксидазы боррелиозного антигена, обработанного ультразвуком.
Список литературы:
1. Ананьева Л.П. Лайм-боррелиоз, или иксодовые клещевые боррелиозы. I часть: этиология, клиника, диагностика / Л.П. Ананьева // Consilium medicum. - 2002.- Т. 4. - № 2.
2. Хейхоу Ф.Г., Кваглино Д.Дж. Гематологическая цитохимия / Ф.Г. Хейхоу, Д.Дж. Кваглино. - М.: Медицина. - 1983. - 320 с.
|
