|
Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра патофизиологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 67-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2008 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (1,2 мб)
Процессы реактивации туберкулёзной инфекции во
многом связывают с дисфункцией иммунной системы. При этом вирулентные штаммы М.
tuberculosis способны прямо или опосредовано, через стимуляцию продукции
иммуносупрессивных цитокинов, подавлять функции Т-лимфоцитов и
антигенпрезентирующих клеток, усугубляя иммунную недостаточность и детерминируя
неблагоприятный прогрессирующий характер течения туберкулёзной инфекции [3, 4].
Установлено, что анергия Т-клеток при туберкулезе проявляется снижением
пролиферации в ответ на стимуляцию туберкулином, блоком клеточного цикла в
субпопуляциях CD4+- и CD 8+- клеток, а также снижением продукции
макрофаг-активирующих цитокинов. Установлено, что состояние анергии Т-клеток
может преодолеваться in vitro в присутствии экзогенного ИЛ-2, что открывает
новые возможности для иммунотерапии больных туберкулёзом [1, 2]. Однако, широко
распространенное во фтизиатрии индивидуально необоснованное назначение
иммуномодулирующих препаратов на основе общих представлений о природе
иммунодефицита при туберкулезе легких лишь в половине случаев обусловливает
иммуностимулирующий эффект, в других случаях оказывает прямо противоположное
негативное действие.
В связи с этим, мы поставили цель выявить
особенности продукции ИЛ-2 у больных туберкулезом легких в зависимости от
варианта туберкулезного процесса (лекарственно-чувствительный и
лекарственно-устойчивый)
Материал и методы. Обследовано 40 впервые
выявленных больных (26 мужчин и 14 женщин) с инфильтративным туберкулёзом
лёгких. В зависимости от чувствительности возбудителя к основным
противотуберкулёзным препаратам были сформированы две основные группы
обследованных лиц: первую группу составили 20 пациентов, выделяющих
М.tuberculosis, чувствительные к основным противотуберкулёзным препаратам
(ЛЧТЛ), во вторую группу вошли 20 больных, выделяющих М.tuberculosis с
первичной множественной лекарственной устойчивостью (ЛУТЛ, устойчивость к
изониазиду, рифампицину и стрептомицину). Группу сравнения составили 10
здоровых доноров (7 мужчин и 3 женщины) в возрасте от 18 до 60 лет. Материалом
исследования служила венозная кровь. Выделенные на градиенте плотности
лимфоциты крови культивировали в полной питательной среде (90% RPMI-1640 с
добавлением 0,3 мг/мл L-глутамина («Вектор-Бэст», Новосибирск), 10%
эмбриональной телячьей сыворотки («Sigma», США), 100 мкг/мл гентамицина
(«Pharmacia»), 2 ммоль/мл HEPES («Flow», GB)) в течение 24 ч. Для стимуляции
секреторных способностей клеток в пробы вносили очищенный туберкулин (PPD) в
дозе 50 ТЕ. Концентрацию ИЛ-2 определяли в культуральных супернатантах
твёрдофазным иммуноферментным анализом с использованием диагностических наборов
(«Протеиновый контур», Санкт-Петербург). Статистический анализ проводили с
использованием непараметрического двустороннего U-критерия Манна-Уитни.
Различия считались значимыми при р<0,05.
Результаты. Анализ полученных данных показал,
что у больных лекарственно-чувствительным и лекарственно-устойчивым
туберкулезом легких отмечались однонаправленные цитокинпродуцирующей активности
лимфоцитов, выражающиеся в снижении выработки ИЛ-2 по сравнению с
соответствующими параметрами у здоровых доноров (табл. 1). Стимуляция клеточных
культур специфическим антигеном (PPD) вызывала достоверное увеличение (по
сравнению с базальным уровнем) продукции исследуемого цитокина в обеих группах
обследуемых лиц, однако уровень туберкулин-индуцированной продукции ИЛ-2 в
группе пациентов с лекарственно-чувствительным ТЛ значительно превышал не
только контрольные значения, но соответствующие параметры у больных
лекарственно-устойчивым ТЛ. Можно предположить, при лекарственно-чувствительном
ТЛ резерв цитокинпродуцирующей активности лимфоцитов сохранен, несмотря на указанную
в литературе анергию Т-звена иммунитета.
Заключение. Таким образом, применение
иммуномодулирующих препаратов на основе рекомбинантного ИЛ-2 скорее всего будет
целесообразным у больных с лекарственно-устойчивыми формами туберкулезной
инфекции и к контексте полученных нами результатов может рассматриваться как
заместительная иммунотерапия, тогда как при лекарственно-чувствительном
варианте туберкулезной инфекции вполне можно использовать иммунокорректоры с
«широким» спектром действия.
Таблица 1
Уровень продукции ИЛ-2 в культуре лимфоцитов
периферической крови у больных туберкулёзом лёгких
|
Концентрация
ИЛ-2, пг/мл
|
Здоровые
доноры
|
Больные
с ЛЧТЛ
|
Больные
с ЛУТЛ
|
|
| |
|
Без стимуляторов (базальная)
|
49,47±9,03
|
4,82±0,26
р1<0,001
|
32,32±7,65
р1=0,013
р3=0,001
|
|
|
При стимуляции PPD
|
69,63±11,02
р2=0,001
|
150,31±34,21
р1=0,003
р2=0,001
р3=0,001
|
49,55±9,63
р1=0,011
р2=0,001
р3=0,007
|
|
Примечание: р1 – по сравнению со здоровыми
донорами; р2 – по сравнению с базальным уровнем продукции; р3 – по сравнению с
больными с лекарственно-чувствительным туберкулёзом лёгких.
Список литературы:
1. Вахидова,
Г. А. Иммунологические механизмы патогенеза / Г. А. Вахидова, В. В. Еремеев, А.
М. Убайдуллаев // Проблемы туберкулеза. – 1991. - № 5. – С. 69-71.
2. Еремеев,
В. В. Взаимодействие макрофаг-микобактерия в процессе реакции микроорганизма на
туберкулезную инфекцию / В. В. Еремеев, К. Б. Майоров // Проблемы туберкулеза.
– 2002. - № 3. – С. 54-57.
3. Патология
иммунитета: причина или следствие туберкулезной инфекции? / В. В. Новицкий, О.
И. Уразова, А. К. Стрелис и др. // Бюллетень сибирской медицины. – 2006. - № 2.
– С. 70-74.
4.
Flynn,
J. L. Immunology of tuberculosis and implication in vaccine development /
JoAnne L. Flynn // Tuberculosis. – 2004. - N 84. – P. 93-101.
|
