Эта статья опубликована сборнике научных трудов "Фундаментальные науки и практика" с материалами Третьей Международной Телеконференции "Проблемы и перспективы современной медицины, биологии и экологии" - Том 1 - №4. - Томск - 2010.

 
Проведен анализ частоты встречаемости простейших Blastocystis hominis в ассоциации с условно-патогенными микроорганизмами – золотистыми стафилококками и клебсиеллами при дисбиозе кишечника у пациентов разных возрастных групп (от 10 до 45 лет). Представлена сравнительная оценка результатов бактериологического обследования больных с дисбиозом кишечника (188 человек). Простейшие бластоцисты в монокультуре обнаруживались в 16-35% случаев. Выявлена более высокая частота встречаемости ассоциации простейших  Blastocystis hominis со стафилококками (от 45-65%). Ассоциации бластоцист со стафилококками и клебсиеллами наблюдались в 25-50%.

Введение.
Облигатную часть микрофлоры кишечника человека составляют микроорганизмы, постоянно населяющие кишечник, которые выполняют защитные функции и участвуют в обмене веществ [Б.В.Пинегин, В.Н. Мальцев и др., 2004].
Факультативная (резидентная) микрофлора кишечника представлена бактериями, редко заселяющими кишечник человека, которые не вызывают заболевания при нормальном состоянии иммунной системы, однако при снижении антимикробной резистентности могут обуславливать различные патологические состояния [В.М.Бондаренко, В.Ф. Учайкин и др., 2008]. 
Наиболее важными представителями факультативной микрофлоры являются стафилококки (золотистый, эпидермальный), некоторые виды грибов и условно-патогенные представители семейства энтеробактерий – клебсиеллы, энтеробактеры и протеи, реже обнаруживают клостридий, бациллы [А.А. Воробьев, Е.М. Липницкий, 2004]. 
В последние годы выявлены высокие показатели обсемененности B.hominis у лиц различных групп населения. На протяжении последних лет ведется изучение биологии паразита, патогенез этого заболевания. Установлено, что находясь в кишечнике, бластоцисты участвуют в формировании микробиоценоза данного биотопа [F.F. Reinthaler et al. 1988]. Показано, что у 67% обследуемых нами лиц выявлялись данные простейшие. Описаны случаи выявления бластоцист у людей со сниженным иммунитетом.
Показана встречаемость условно-патогенных микроорганизмов у больных кишечными инфекциями в условиях колонизации кишечника простейшими Blastocystis hominis.
Цель работы – выявление роли представителей условно-патогенной микрофлоры (Blastocystis hominis в монокультуре, а также в ассоциации с бактериями родов Staphylococcus и Klebsiella) в дисбиозе кишечника.

Материалы и методы.
При анализе кала пациентов с дисбиотическими нарушениями в составе облигатной (нормальной) и факультативной микрофлоры, использовали общепринятый бактериологический метод. Для получения культур простейших Blastocystis hominis использовали среду Suresh. Выявление бластоцист в препаратах проводили микроскопическими и культуральными методами. Далее учитывали общее количество анализов кала на дисбактериоз от взрослых и детей (число обратившихся пациентов, разбитых нами позднее на 3 возрастные группы) и подсчитывали количество выявленных при этом простейших бластоцист, а также культур золотистых стафилококков и клебсиелл. Учет полученных результатов и их сравнение проводили отдельно для исследуемых групп пациентов.

Результаты.
Изучена частота встречаемости ассоциаций указанных микроорганизмов при дисбиозе кишечника у людей в возрасте от 10 до 45 лет включительно. Все пациенты были разделены на 3 группы в соответствии с возрастом. Первую группу составили пациенты в возрасте – 10-18 лет, вторую – 19-30 лет и третью – 31-40 лет. Обследованные пациенты старше 40 лет в анализе не участвовали, поскольку в этой возрастной группе наблюдалась стабилизация исследуемых показателей.
Оценку достоверности различий абсолютных и относительных показателей между и внутри групп проводили по t критерию. Различия считали достоверными при  р<0,05. 
У детей, подростков в возрасте от 10 до 18 лет включительно отмечали низкий  процент выявления простейших бластоцист в монокультуре (около 10-12 % от числа всей группы). Увеличение встречаемости  Blastocystis hominis практически в 3 раза по сравнению с первой группой (10-18 лет) наблюдали у обследуемых второй возрастной категории. В третьей возрастной группе (31-40 лет) показатель обсеменности бластоцистами составил более 40-50%. Возможно, что увеличение числа лиц инвазированных бластоцистами связано с приобретенными пациентами различных заболеваний, которые снижают общий иммунный статус организма и делают его очень уязвимым к заселению биотопа кишечника  различными видами условно-патогенных микроорганизмов, в том числе простейших бластоцист.
Во всех возрастных группах выявлена ассоциация простейших Blastocystis hominis со стафилококками  в значительно более высоком проценте случаев. Так, например, в первой группе обследуемых обсемененность простейшими бластоцистами и стафилококками наблюдается у 53% пациентов, во второй и третьей возрастной группе этот показатель составил 60% и 70% соответственно. Сходный уровень  встречаемости штаммов бластоцист в ассоциации с клебсиеллами наблюдался в 1-ой и 2-ой возрастных группах. У пациентов 3 группы (31-40 лет) данный показатель увеличивался до 80% обследуемых лиц.
Важно отметить, что избыточный рост простейших бластоцист в ассоциациях со стафилококками и клебсиеллами наблюдался при дефиците бифидофлоры, так как при нормальном содержании бифидобактерий (109 КОЕ/г) бластоцисты обнаруживались только у 8,3% обследуемых в количестве не более 103 КОЕ/г. При избыточной колонизации кишечника простейшими бластоцистами  как было отмечено ранее достоверно чаще выделялись не только золотистые стафилококки и клебсиеллы, но и бактерии рода Proteus, Citrobacter.

Обсуждение.
Установлено, что у обследуемых нами лиц встречаемость простейших Blastocystis hominis в монокультуре обнаруживалась лишь в 16-35% случаях. И, напротив, выявлена более высокая частота встречаемости ассоциаций простейших  бластоцист со стафилококками и клебсиеллами. Более того, отмечено, что с увеличением возраста пациента увеличивается число лиц с обсемененностью кишечника бластоцистами в ассоциациях с условно-патогенными бактериями. 
Наши исследования подтвердили, что избыточная колонизация кишечника простейшими бластоцистами наблюдается обычно при снижении колонизационной резистентности микроорганизмов (прежде всего, при уменьшении количества бифидобактерий и лактобацилл).
Таким образом, результаты исследования подтверждают роль отдельных групп микроорганизмов в формировании и регуляции микробиоценоза кишечника  человека и диктуют необходимость изучения механизмов симбиотических взаимодействий.

Литература.
1. Пинегин Б.В., Мальцев В.Н., Коршунов В.М. Дисбиозы кишечника. М., 2004. – С. 56.
2. Бондаренко В.М., Учайкин В.Ф. и др. Дисбиозы. Современные возможности профилактика и лечения. М., 2008. – С.20.
3.Воробьев А.А., Несвижский Ю.В., Липницкий Е.М. и др. Исследование пристеночной микрофлоры кишечника человека. Журн.микробиол.2004, №1. – С.60-63.
4.Reinthaler F.F. et al. Вlastocystis.hominis – intestinal parasit or commensal // Wien.Мed.Wochenschr. – 1988. – V15. – P. 545-552.