Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул

Периферическим органом иммунногенеза является селезенка, выполняющая в зрелом организме и при его развитии многообразные и важные функции. Строму органа составляет ретикулярная ткань. Не до конца изученным остается вопрос формирования стромальных элементов селезенки в ранние сроки эмбрионального развития как в норме, так и при воздействии на организм матери антропогенных факторов химического производства.   
Целью настоящего исследования является изучение гистогенеза стромы селезенки в ранние сроки эмбрионального развития у человека как норме, так и при воздействии на организм матери негативных факторов шинного производства.
Объектом исследования служили образцы селезенки эмбрионов и  плодов человека на  7-14 неделе внутриутробного развития, взятые при медицинских абортах по социальным показаниям от матерей, работающих в основных цехах шинного производства (основная группа). Контрольной группой являлись образцы селезенки эмбрионов и плодов, взятые от матерей, не связанных с шинным производством. Для проведения исследования было получено разрешение локального этического комитета. Селезенка, взятая у 240 эмбрионов и плодов, распределялась по четырем возрастным группам: 7-8 недель, 9-10 недель, 11-12 и 13-14 недель внутриутробного развития. Для световой микроскопии материал после обезвоживания в спиртах заливали в парафин. С парафиновых блоков на ротационном микротоме готовили срезы толщиной 7–10 мкм. Для электронной микроскопии кусочки органов дофиксировали в  1 % растворе осмиевой кислоты. Обезвоживание проводили этанолом, начиная с 30о до абсолютного, затем материал заключали в аралдит. Ультратонкие срезы контрастировали свинцом по Рейнольдсу и изучали в электронном микроскопе УЭМВ-100К.
Эухроматин и гетерохроматин в ядрах ретикулярных и эндотелиальных клетках селезенки определяли с помощью планиметрического метода [1]. Готовили 10 срезов каждого объекта исследования. Производили съемку ядер клеток селезенки, после чего их изображение с помощью фотоувеличителя приводилось к единому увеличению в 20000. В качестве измерительного инструмента послужила тестовая сетка с шагом в 1 см. Объемную плотность диффузного хроматина в ядрах клеток вычисляли в долях, в процентах. Оценку межгрупповых различий проводили при помощи критерия Стьюдента. За статистически значимые различия показателей принималось значение p < 0,05.  
В селезенке эмбриона и плода становление ретикулярной стромы имеет свои закономерности. Вначале клетки ретикулярной стромы селезенки контрольной группы мало чем отличаются от мезенхимных клеток. Они характеризуются малым числом внутриклеточных органелл и узким ободком цитоплазмы вокруг ядра. Контакт с другими ретикулярными клетками не приводит к каким-либо изменениям в структуре органелл и плазматических мембран. Первые изменения возникают в ретикулярных клетках при контакте с новообразующимися капиллярами. Механизм преобразований в клетках селезенки эмбриона и плода следующий: происходит дифференцировка внутриклеточных органелл – митохондрий, эндоплазматической сети, комплекса Гольджи, изменяется соотношение фракций ядерного хроматина. На 7-8 неделе эмбриогенеза в ретикулярных клетках (72,57±2,6 %) и эндотелиальных  клетках (79,2±2,7 %) селезенки контрольной группы доля эухроматина была максимальной. В селезенке плодов  контрольной группы установлено некоторое снижение содержания эухроматина в ядрах ретикулярных и эндотелиальных клетках на 11-12 неделе внутриутробного развития. В дальнейшем на 13-14 неделе эмбриогенеза доля эухроматина в ретикулярных и эндотелиальных клетках повышается. Связано это с тем, что в организме плода начинается перестройка систем и органов, усиление их функционирования. Побудительной причиной функциональной активности ядерных структур клеток селезенки, возможно, следует считать внедрение в орган кровеносных капилляров. Вероятно, в данном случае имеет место проявление общебиологической реакции, характерной и для других органов млекопитающих [2, 3].
Изучение эмбрионов и плодов человека от матерей, работающих в основных цехах шинного производства, показывает, что на 7-14-й неделе внутриутробного развития клетки, образующие селезенку, были отечными. При электронно-микроскопическом исследовании в клетках селезенки обнаруживали: вакуолизированные митохондрии, расширенные участки гранулярного ретикулума, разнообразные по размерам вакуоли и миелиноподобные тельца. Ядра этих клеток, в основном, неправильной формы, перинуклеарное пространство расширено. Что касается распределения гетерохроматина и эухроматина в ядрах эндотелиоцитов и ретикулярных клеток селезенки основной группы, то здесь наблюдается та же тенденция, что и в ядрах клеток контрольной группы, однако доля эухроматина в ядрах изучаемых клеток селезенки основной группы меньше, чем в контрольной. Связано это с неблагоприятным влиянием факторов шинного производства  на организм матери и плода. Снижение эухроматина является показателем нарушения дифференцировки клеток эмбрионов и плодов в основной группе.

Литература
1. Автандилов, Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов. – М.: Медицина. 1990, – 384 с.
2. Иванова И.П. и др. Пролиферация эндотелия капилляров первичного сплетения гироталамо-гипофизарной портальной системы циркуляции в онтогенезе у крыс / И.П. Иванова, Т.В. Родимичева и др. // Бюл. эксперим. биол. и мед. – 1995. – 119. – № 5. – С. 462-464.
3. Мкртчан О.З. и др. Микроциркуляторное русло и репродукция эпителия печени птиц на разных стадиях онтогенеза после однократного перегревания / О.З. Мкртчан и др. // Морфология. – 2005. – Т. 127. – № 4. – С. 109-110.