Labirint.ru - ваш проводник по лабиринту книг
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -ГлавнаяОб АльманахеРецензентыАрхив телеконференций- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Сборники АльманахаДругие сборникиНаучные труды- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Образец оформленияИнформационное письмоО проведении телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Материалы I телеконференцииМатериалы II телеконференцииМатериалы III телеконференцииМатериалы IV телеконференцииМатериалы V телеконференцииМатериалы VI телеконференцииМатериалы VII телеконференцииМатериалы VIII телеконференцииМатериалы IX телеконференцииМатериалы Х телеконференцииМатериалы XI телеконференцииМатериалы XII телеконференцииМатериалы XIII телеконференцииУчастники XIII телеконференцииМатериалы XIV телеконференцииУчастники XIV телеконференцииЮбилейная XV Телеконференция Октябрь 2014Участники Юбилейной XV Телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Конференция СМПиЧ-2015Участники СМПиЧ-2015- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -КонтактыФорум
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Поиск по сайту

Последние статьи

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ ВЛИЯНИЕ ВИРУСНОИ ИНФЕКЦИИ КЛЕЩЕВЫМ ЭНЦЕФАЛИТОМ НА ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДИКТОРЫ БОЛЕЗНИ РОЛЬ ГЕНА GSTM1 В ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЯХ КЛЕТОК КРОВИ и ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЯХ СПЕРМАТОЗОИДОВ ПРИ ГРАНУЛОЦИТАРНОМ АНАПЛАЗМОЗЕ ЧЕЛОВЕКА ГЕНЕТИЧЕСКИИ ПОЛИМОРФИЗМ И ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ Т- ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ АРТРИТОМ, АССОЦИИРОВАННЫМ В КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ КЛИНИЧЕСКИЕ ПОСЛЕДСТВИЯ ИКСОДОВОГО ВЕСЕННЕ-ЛЕТНЕГО КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫИ СТАТУС И АДАПТИВНЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ОРГАНИЗМА ПЕРВОКЛАССНИКОВ ШКОЛ г. НЕФТЕЮГАНСКА ТЮМЕНСКОИ ОБЛАСТИ Материалы трудов участников 14-ой международной выездной конференции русскоязычных ученых в Китае (Sanya, Haynan Island) "Современный мир, природа и человек", том 8, №3. ПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ И АПОПТОТИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ В ПРОЦЕССЕ СТИМУЛЯЦИИ АНТИГЕНОМ БОРРЕЛИИ THE ANALYSIS OF SOME INDICES OF IMMUNERESPONSE, DNA REPAIR, AND MICRONUCLEI CONTENT IN CELLS FROM TICK-BORNE ENCEPHALITIS PATIENTS КОМПЬЮТЕРНЫИ СПЕКТРАЛЬНЫИ МОРФОМЕТРИЧЕСКИИ АНАЛИЗ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ И ГРАНУЛОЦИТАРНЫМ ЭРЛИХИОЗОМ ЧЕЛОВЕКА

Полезная информация

 
 

ИНКАПСУЛЯЦИЯ ВИСКУМИНА В ПОЛИЛАКТИДНУЮ МАТРИЦУ С ПОМОЩЬЮ СВЕРХКРИТИЧЕСКОГО ДИОКСИДА УГЛЕРОДА

Печать E-mail
Автор Рамонова А.А.   
20.10.2010 г.

Авторы: Рамонова А.А.1, Агапов И.И.1, 2, Мойсенович М.М.1, Богородский С.Э.3, Мусаэлян И.С.3, Попов В.К.3

1Биологический факультет МГУ имени М. В. Ломоносова (г. Москва)
2Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов (г. Москва)
3Институт проблем лазерных и информационных технологий РАН (г. Троицк, Московская область)

Эта статья опубликована сборнике научных трудов "Фундаментальные науки и практика" с материалами Третьей Международной Телеконференции "Проблемы и перспективы современной медицины, биологии и экологии" - Том 1 - №4. - Томск - 2010.



Вискумин – рибосоминактивирующий белок II типа, выделяемый из растения Viscum album, состоит из А- и В-субъединиц, соединенных дисульфидной связью. Молекулярный вес всей молекулы - 60 кДа. Не известны ни роль токсина в развитии омелы, ни причины, определяющие появление других белков этого семейства [1].
Действие РИБ II приводит к остановке белкового синтеза в результате выщеплении остатка аденина из 28S-рРНК эукариот. Данные токсины обладают высокой цитотоксической активностью для клеток млекопитающих - попадания одной молекулы в цитозоль достаточно, чтобы вызвать гибель клетки. ML-токсины (MLI, MLII, MLIII) являются основными белками во всех экстрактах из омелы, которые успешно используются десятки лет при терапии онкологических заболеваний [2,3]. Использование инкапсулированного вискумина может быть более эффективным вследствие пролонгированного выхода из матрицы и длительного действия цитотоксина на опухолевые клетки. В качестве такой матрицы нами был выбран полилактид – нетоксичный универсальный биоразлагаемый полимер. Все эти свойства позволяют использовать полилактид в медицине, в частности в системах контролируемой доставки лекарств. При этом лекарственный препарат инкапсулируют в полимерный носитель и вводят в организм с помощью инъекций или перорально [4,5]. Биодеградация полимерной матрицы приводит к постепенному высвобождению лекарственного препарата. Для инкапсуляции биоактивных веществ в полимерные матрицы обычно используют либо достаточно высокие температуры (до 100°C и выше), либо органические растворители (остатки которых трудно удалить из готового продукта), что приводит к снижению активности самих лекарственных препаратов и изменяет исходные свойства используемого полимера [6]. Применение метода «сухой» сверхкритической флюидной инкапсуляции позволяет проводить инкапсуляцию различных биоактивных компонентов в различные типы аморфных полимеров без потери ими физико-химических и биологических свойств, т.к. не используются жидкие растворители, температура близка к комнатной, а сверхкритическая двуокись углерода легко и практически без остатка удаляется из полимера простым сбросом давления ниже критического значения [7].
    В данной работе представлены результаты исследования физико-химических и биологических свойств вискумина, включенного в биорезорбируемую полилактидную матрицу методом «сухой» сверхкритической флюидной инкапсуляции. После высвобождения вискумина из матрицы изучены иммунохимические и цитотоксические свойства данного токсина.

Инкапсуляцию вискумина в полилактидный носитель проводили на экспериментальной установке [8] по следующему алгоритму: 0,2 вес.% (1 мг) порошка лиофилизированного вискумина, предварительно перемешанного с 0,5 г мелкодисперсного порошка полилактида (средний размер частиц 10-20 мкм) загружали в камеру высокого давления. Затем камера уплотнялась и в нее нагнетался СО2. Температуру камеры поддерживали на уровне 50°C, а температура сопла составляла около 30°C. Давление сверхкритического СО2 составляло 10 МПа. Содержимое автоклава тщательно перемешивали с помощью магнитного смесителя (150 об/мин). Систему выдерживали в этих условиях в течение 60 минут. За это время происходила пластификация полимера и его перемешивание с вискумином. После этого производился импульсно-периодический сброс полученной смеси и диоксида углерода через сопло в приемную камеру.

После выдержки полученного продукта в атмосферных условиях в течение 3 часов (необходимой для полного удаления СО2 из частиц полимера и их окончательного затвердевания), собранные частицы помещали в пластиковые пробирки на 1,5 мл и хранили при температуре -12°C до их дальнейшего анализа.

Получение контрольных образцов полимерных частиц, не содержащих вискумина, осуществляли в аналогичных условиях.

Далее нами были изучены физико – химические и биологические свойства полученных образцов. Вискумин, инкорпорированный в полилактидную матрицу, – порошок, состоящий из пористых микрочастиц размером от 50 до 200 мкм. Анализ данных, полученных методом конфокальной лазерной сканирующей микроскопии, позволил определить коэффициент пористости, который составил 22,5 %.
С помощью тест-системы на основе моноклональных антител MNA4 и MNA9 - bi [9] было проведено исследование кинетики выхода вискумина из полилактидной матрицы. По результатам иммуноферментного анализа через 120 часов высвободилось 6,75 % инкапсулированного вискумина.
Цитотоксические свойства высвободившегося из полилактида вискумина оценивали по стандартной методике с использованием МТТ-теста [10]. Тест основан на способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать бледно-желтый водорастворимый 3-(4,5,-диметилтиозолил-2-ил)-2,5 дифенилтетрозолий бромид (МТТ) до формазана (голубые кристаллы, нерастворимые в воде). Количество образованного формазана прямо пропорционально числу живых клеток. По данным МТТ-теста цитотоксическая активность вискумина, выявленного в анализируемых образцах, остается практически такой же как у токсина, не подвергавшегося дополнительной обработке.
Таким образом, было показано, что включение вискумина в полилактидный носитель методом «сухой» сверхкритической флюидной инкапсуляции не снижает его биологическую активность. Поэтому в перспективе данный метод может быть применён для создания противоопухолевых препаратов направленного пролонгированного действия.

Работа осуществлялась при поддержке Министерства образования и науки Российской федерации в рамках Федеральной целевой программы "Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009 - 2013 год" по Государственному контракту № П 407 от 12.05.2010 и частично на средства Российского Фонда фундаментальных исследований (грант № 09-02-00173)

Библиография:
1. H. Niwa, A.G. Tonevitsky, I.I Agapov et. al. // Eur.J.Biochem., 2003, V. 270, P. 2739-2749
2. M. van Wely, M. Stoss, R.W. Gorter // Am.J.Ther., 1999, V. 6, P. 37-43.
3. R. Park, M.S. Kim, H.S. So et. al. // Biochem.Pharmacol., 2000., V. 60, P. 1685-1691.
4. P.S.Kumar, T.R. Saini, D. Chandrasekar et. al. // Drug Deliv., 2007, V. 14, P. 517-523.
5. R.A. Graves, D.Poole, R. Moiseyev et. al. // Drug Dev.Ind.Pharm, 2008, V. 34, P. 419-426.
6. L.G. Griffith // Acta Materialia, 2000, V. 48, P. 263-277.
7. Ф.М. Гумеров, А.Н. Сабирзянов, Г.И. Гумерова // Суб- и сверхкритические флюиды в процессах переработки полимеров, 2000.
8. Е.Н. Антонов, С.Э. Богородский, Б.М. Фельдман и др. // Сверхкритические Флюиды: Теория и Практика, 2008, Т. 3, С. 34-42.
9. A.G. Tonevitsky, I.I. Agapov, D. Temiakov et. al. // Arzneimittelforschung, 1999, V. 49, P. 970-975.
10. T. Mosmann // J.Immunol.Methods, 1983, V. 65, P. 55-63.

Последнее обновление ( 12.04.2011 г. )
 

Добавить комментарий

Правила! Запрещается ругаться матом, оскорблять участников/авторов, спамить, давать рекламу.



Защитный код
Обновить

« Пред.   След. »
 
 
Альманах Научных Открытий. Все права защищены.
Copyright (c) 2008-2021.
Копирование материалов возможно только при наличии активной ссылки на наш сайт.

Warning: require_once(/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php) [function.require-once]: failed to open stream: Нет такого файла или каталога in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99

Fatal error: require_once() [function.require]: Failed opening required '/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php' (include_path='.:/usr/local/zend-5.2/share/pear') in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99