|
Кафедра неврологии СибГМУ (г. Томск), НИИ медицинской генетики (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам пятого конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича.- Томск, СибГМУ.- 2004.- 413 с.
Скачать сборник целиком
Цереброваскулярная патология занимает второе место в ряду главных причин смертности и является ведущей причиной инвалидизации населения в экономически развитых странах, что определяет её как одну из важнейших медицинских и социальных проблем. Смертность от цереброваскулярных заболеваний в различных регионах России колебалась в 2001г. от 0,70 до 3,31 на 1000 населения. Социально значимыми являются и тяжелые последствия инсультов - развитие стойкой инвалидности с потерей трудоспособности, повторных нарушений мозгового кровообращения, сосудистой деменции [1].
Инсульт является мультифакториальным заболеванием с широким разнообразием фенотипических проявлений и факторов риска, одним из которых является генетическая предрасположенность. Это позволяет изучать генетическую компоненту, вносящую вклад в развитие данного заболевания, методами анализа, применяемыми для исследования патологических состояний полигенной природы. В настоящем исследовании была выполнена оценка вклада полиморфных вариантов генов NOS3 (VNTR, C774T, G894T, C691T), FV (G1691A, A4070G), FII (G20210A), GPIIIa (T196C) в предрасположенность к развитию инсульта.
Материалы и методы
Для проведения работы были обследованы больные инсультом (n=108), проходившие курс лечения на базе стационаров г. Томска (неврологическая клиника СибГМУ, неврологическое отделение железнодорожной больницы) и городской больницы №2 г. Северска. Диагноз подтверждён компьютерной томограммой (КТ) головного мозга, которая проводилось на базе лаборатории клиник СибГМУ. Объективная оценка тяжести состояния больного проводилась по шкале степени тяжести инсульта (NIH) американского института неврологических расстройств. Чем выше балл, тем хуже клиническое состояние больного [2].
Контрольную группу (n=110) составили здоровые лица, не имеющие клинических признаков сердечно¬сосудистых нарушений, что подтверждалось данными клинического обследования, и электрокардиографии. Данная группа была сформирована из участников эпидемиологического исследования факторов риска ИБС в г. Томске, проводимого в НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН совместно с кафедрой факультетской терапии Сибирского государственного медицинского университета.
Генотипирование осуществляли с помощью ПДРФ анализа, включающего полимеразную цепную реакцию (ПЦР), гидролиз продуктов амплификации соответствующим ферментом, элктрофорез в агарозном или полиакриламидном геле [3,4]. Распределение генотипов по исследованным полиморфным локусам проверяли на соответствие равновесию Харди-Вайнберга с помощью точного теста Фишера. Для сравнения частот аллелей и генотипов между различными группами использовали критерий х2 с поправкой Йетса на непрерывность и точный тест Фишера.
Результаты и обсуждение
По всем исследованным полиморфным вариантам генов NOS3 (VNTR, C774T, G894T, C691T), FV (G1691A, A4070G), FII (G20210A), GPIIIa (T196C) распределение частот аллелей и генотипов в группах лиц больных инсультом и контроле соответствовало ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга. Исследование "случай-контроль" показало отсутствие различий частот аллелей и генотипов полиморфных вариантов генов NOS3(VNTR, G894T, C691T), FV(G1691A; A4070G), FII(G20210A), GPIIIa(T196C) в группах лиц больных инсультом и контроле. Выявлена ассоциация полиморфного варианта гена NOS3 (C774T) с инсультом. Частота патологического аллеля "t" в группе больных и контроле составили 25,5% и 20,1% соответственно (р=0,039).
Данные, полученные в последние годы, показали вклад гена NOS3 в предрасположенность к развитию различных заболеваний, таких как сердечно-сосудистая патология, сахарный диабет, диструкция легких при наличии а1- антиприпсиновой недостаточности [5]. Ассоциации полиморфных вариантов гена NOS3 с цереброваскулярной патологией до настоящего времени недостаточно изучены.
При сравнении частот аллелей и генотипов у больных инсультом разной степени тяжести и контрольной группе, в настоящем исследовании не было выявлено различий по полиморфным вариантам генов NOS3(VNTR, G894T), FV(A4070G), FII (G20210A), GPIIIa(T196C). Показано накопление патологического аллеля "А" FV(G1691A) в группе больных с наибольшей степенью тяжести заболевания (группа III) и аллеля "T" гена NOS3 (C774T) в группе со средней тяжестью (группа II) по сравнению с контролем (Табл.1).
Примечание. Р - уровень значимости, полученный при сравнении частот генотипов в группах больных и контроле с помощью критерия х2 или точного теста Фишера.
Установлена значимость аллеля "Т" полиморфного варианта гена NOS3 (C691T) для прогнозирования тяжести течения инсульта, поскольку выявлено увеличение частоты данного аллеля по мере возрастания степени тяжести заболевания (Табл.1).
|
Таблица 1.
Частоты аллелей и генотипов у больных инсультом разной степени тяжести и здоровых лиц
|
| Группы |
Степень тяжести
инсульта |
Гены |
| FV (G1691A) |
NOS3(C774T) |
NOS3(C691T) |
| I-гр. |
I-V -
легкая
|
GG-53 |
cc-34 |
сс-41 |
| Ga-3 |
ct-22 |
сt-13 |
| AA-0 |
tt-1 |
tt-0 |
| G-109(97,3%) |
c-90(78,9%) |
c-95(88%) |
| A-3(2,7%) |
t-24(21,1%) |
t-13(12%) |
| II-гр. |
VI-X -средняя |
GG-33 |
cc-13 |
cc-24 |
| GA-1 |
ct-18 |
ct-9 |
| AA-0 |
tt-1 |
tt-2 |
| G-67(98,5%) |
c-44(68,75%) |
c-57(81,4%) |
| A-1(1,5%) |
t-20(31,25%) |
t-13(18,6%) |
| III-гр. |
XI и выше - тяжелая |
GG-14 |
cc-9 |
cc-11 |
| GA-1 |
ct-5 |
ct-3 |
| AA-1 |
tt-2 |
tt-2 |
| G-29(90,6%) |
c-23(71,9%) |
c-25(78,1%) |
| A-3(9,4%) |
t-9(28,1%) |
t-7(21,9%) |
| контроль |
GG-113 |
74cc |
76cc |
| GA-5 |
31ct |
25ct |
| AA-0 |
7tt |
4tt |
| G-321(97,9%) |
c-179(79,9%) |
c-177(84,3%) |
| A-5(2,1%) |
t-45(20,1%) |
t-33(15,7%) |
| Р |
I и II гр. |
0,661 |
0,223 |
0,195 |
| I и III гр. |
0,166 |
0,155 |
0,03 |
| I и контроль |
1 |
0,192 |
0,346 |
| II и III гр. |
0,282 |
0,177 |
0,646 |
| II и контроль |
0,999 |
0,01 |
0,854 |
| III и контроль |
0,022 |
0,335 |
0,317 |
Полученные результаты свидетельствуют, что полиморфные варианты гена NOS3 (C774T, C691T) могут вносить вклад в предрасположенность к развитию инсульта и дают возможность прогнозировать тяжесть течения заболевания. Наличие мутации Лейдена является фактором риска тяжелого течения инсульта.
Список литературы:
1.Гусев Е. И., Скворцова В. И., Стаховская Л. В. Эпидемиология инсульта в России. Инсульт. - 2003.-№8. -с. 4-9.
2.Goldstein L. B., Bertels C., Davis J. N. Interrater reability of the NIH stroke scale // Arch Neurol 1989;
46:660-662.
3.Avcu f., Akar E., Demirkilic U., Yilmaz E., Akar N., Yalcin A. The role prothrombotic mutations in patients whith Buerger's disease // Thromb Res. 2000 Nov 1;100(3):143-7;
4.Novoradovsky A., Brantly M. L.,Waclawiw M. A. Endothelial Nitric Oxide Synthase as a Potential Susceptibility Gene in the Pathogenesis of Emphysema in 1-Antitrypsin Deficiency. // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -1999. - V. 20. - P. 441-447.
5.Косянкова Т.В., Пузырев К.В., Ковалев И.А., Цимбалюк И.В. Синтазы оксида азота6полиморфизм генов и сердечно-сосудистая патология // Медицинская генетика. - 2003.- Т.2. - №2. - с.73-77.
|
