Labirint.ru - ваш проводник по лабиринту книг
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -ГлавнаяОб АльманахеРецензентыАрхив телеконференций- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Сборники АльманахаДругие сборникиНаучные труды- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Образец оформленияИнформационное письмоО проведении телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Материалы I телеконференцииМатериалы II телеконференцииМатериалы III телеконференцииМатериалы IV телеконференцииМатериалы V телеконференцииМатериалы VI телеконференцииМатериалы VII телеконференцииМатериалы VIII телеконференцииМатериалы IX телеконференцииМатериалы Х телеконференцииМатериалы XI телеконференцииМатериалы XII телеконференцииМатериалы XIII телеконференцииУчастники XIII телеконференцииМатериалы XIV телеконференцииУчастники XIV телеконференцииЮбилейная XV Телеконференция Октябрь 2014Участники Юбилейной XV Телеконференции- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Конференция СМПиЧ-2015Участники СМПиЧ-2015- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -КонтактыФорум
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Поиск по сайту

Последние статьи

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ ВЛИЯНИЕ ВИРУСНОИ ИНФЕКЦИИ КЛЕЩЕВЫМ ЭНЦЕФАЛИТОМ НА ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДИКТОРЫ БОЛЕЗНИ РОЛЬ ГЕНА GSTM1 В ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЯХ КЛЕТОК КРОВИ и ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЯХ СПЕРМАТОЗОИДОВ ПРИ ГРАНУЛОЦИТАРНОМ АНАПЛАЗМОЗЕ ЧЕЛОВЕКА ГЕНЕТИЧЕСКИИ ПОЛИМОРФИЗМ И ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ Т- ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ АРТРИТОМ, АССОЦИИРОВАННЫМ В КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ КЛИНИЧЕСКИЕ ПОСЛЕДСТВИЯ ИКСОДОВОГО ВЕСЕННЕ-ЛЕТНЕГО КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫИ СТАТУС И АДАПТИВНЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ОРГАНИЗМА ПЕРВОКЛАССНИКОВ ШКОЛ г. НЕФТЕЮГАНСКА ТЮМЕНСКОИ ОБЛАСТИ Материалы трудов участников 14-ой международной выездной конференции русскоязычных ученых в Китае (Sanya, Haynan Island) "Современный мир, природа и человек", том 8, №3. ПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ И АПОПТОТИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ В ПРОЦЕССЕ СТИМУЛЯЦИИ АНТИГЕНОМ БОРРЕЛИИ THE ANALYSIS OF SOME INDICES OF IMMUNERESPONSE, DNA REPAIR, AND MICRONUCLEI CONTENT IN CELLS FROM TICK-BORNE ENCEPHALITIS PATIENTS КОМПЬЮТЕРНЫИ СПЕКТРАЛЬНЫИ МОРФОМЕТРИЧЕСКИИ АНАЛИЗ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ИКСОДОВЫМ КЛЕЩЕВЫМ БОРРЕЛИОЗОМ И ГРАНУЛОЦИТАРНЫМ ЭРЛИХИОЗОМ ЧЕЛОВЕКА

Полезная информация

 
 

ФАКТОРЫ, МОДУЛИРУЮЩИЕ АПОПТОЗ Т-ЛИМФОЦИТОВ

Печать E-mail
31.05.2011 г.
ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России (г. Томск)

Эта статья опубликована в сборнике статей по материалам XII Российского конгресса молодых  ученых  с  международным  участием "Науки о человеке"  (Томск, 26-27 мая 2011 г.) / под ред.   Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2011. – 104 с. 

Скачать сборник целиком (PDF, 1,6 MB)

Введение. Программированная клеточная гибель имеет большое значение в поддержании го- меостаза иммунной системы. Нарушение работы механизмов регуляции апоптоза лежит в основе развития многих заболеваний [1]. В связи с этим, для разработки новых терапевтических подходов, представляет интерес изучение механизмов модуляции апоптоза. Одним из апоптозрегулирующих факторов является белок теплового шока 90 (HSP90), увеличение содержания которого наблюдается во многих опухолевых клетках [2].

Цель. Изучить факторы, модулирующие апоптоз Т-лимфоцитов здоровых доноров и клеток линии Jurkat.

Материал и методы. Мононуклеарные лейкоциты здоровых доноров и клетки Т- лимфобластной лейкемии человека линии Jurkat (институт цитологии РАН, Санкт-Петербург) культивировали суспензионным методом с добавлением в среду 30 нг/мл рекомбинантного TNFα и 5мкМ ингибитора HSP90 17-AAG. Через 18 часов инкубации оценивали содержание апоптотически измененных клеток по связыванию аннексина-V, меченного FITC, и пропидий йодида на флуоресцентном микроскопе Carl Zeiss («Abcam», UK). Изменение трансмембранного потенциала митохондрий исследовали через 18 часов с помощью набора реагентов BD Biosciences (США) на проточном цитометре (BD FACSCalibur Flow Cytometer, США). Активность каспазы-8 и -3 определяли фотоколориметрическим методом через 2 и 3 часа инкубации, соответственно. Контрольную группу составили интактные клетки.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни с учетом поправки Бонферрони.

Результаты и обсуждение.
В клетках линии Jurkat при добавлении r-TNFα и 17-AAG отмечался достоверно более высокий уровень апоптоза, по сравнению с остальными условиями культивирования (р<0,05). Так содержание апоптотически измененных клеток при совместном действии r-TNFa и ингибитора HSP90 составило 88,68 (67,79-93,85)%, что было в 18 раз выше аналогичного показателя, полученного при исследовании интактных клеток, и в 3,5 раза выше, чем при действии rTNF-α или 17-AAG. Полученные результаты, возможно, связаны с тем, что HSP90 стабилизирует транскрипционные факторы RIP, Akt и NF-KB, активируемые сигналами от TNFα и приводящие к повышению жизнеспособности клеток [2].

При определении количества мононуклеарных лейкоцитов здоровых доноров в состоянии апоптоза, достоверных различий между группами с добавлением r-TNFα и 17-AAG или одного из препаратов выявлено не было (р>0,05). Отсутствие цитотоксического эффекта 17-AAG на мононук- леарные лейкоциты здоровых доноров, может говорить о том, что HSP90 в нормальных клетках не обладает значительным апоптозрегулирующим действием, как в опухолевых. Разный апоптогенный эффект ингибитора HSP90 в исследованных клетках, вероятно, связан с особенностями строения и внутриклеточного содержания данного белка. Например, известно, что в трансфор-мированных клетках HSP90 находится в мультишаперонном комплексе с высокой АТФ-азной активностью, который не характерен для нормальных клеток.

Ингибирование HSP90 в опухолевых клетках с помощью 17-AAG приводило к статистически значимому увеличению активности каспазы-8 (р<0,05). Исходя из этого, можно предположить, что белок теплового шока HSP90 влияет на активацию инициаторной каспазы-8. Так как активность каспазы-8 при совместном действии на клетки r-TNFa и 17-AAG достоверно не отличалась от изучаемого параметра при добавлении одного из препаратов, можно предположить, что HSP90 напрямую ин- гибирует превращение прокаспазы-8 в активную форму.

Активности каспазы-3 в клетках линии Jurkat достоверно увеличивалась при добавлении 17- AAG (р<0,05). Причем активность каспазы-3 увеличивалась в большей степени при ингибировании HSP90 без индуктора апоптоза, чем при совместном действии r-TNFα и 17-AAG. Это может быть связано с неоднозначной ролью TNFα в запуске программированной клеточной гибели [3].

Количество клеток линии Jurkat с деполяризованной митохондриальной мембраной было достоверно выше как при совместном действии 17-AAG и r-TNFα, так и при добавлении одного из препаратов, по сравнению с интактными клетками (р<0,05). Следовательно, белок теплового шока HSP90 может влиять на целостность мембраны митохондрий.

Заключение. В результате исследования было выявлено, что белок теплового шока 90 принимает участие в регуляции апотоза опухолевых клеток. Ингибирование HSP90 увеличивает чувствительность клеток линии Jurkat к апоптозу, индуцированному TNF-α, приводит к активации каспазы-8 и -3 и деполяризации митохондриальной мембраны. На мононуклеарные клетки здоровых доноров ингибитор 17-AAG не оказывает проапоптотического эффекта.
 
Список литературы:
  1. Sun Y., Peng Z. L. Programmed cell death and cancer // Postgrad Med J. - 2009. - № 1001. - С. 134140.
  2. Gallegos R. M., Floor K., Roepman P. et al. Integration of gene dosage and gene expression in non-small cell lung cancer, identification of HSP90 as potential target // Giaccone GPLoS 0ne. - 2008. - №5. - P. 63-71.
  3. G. V. Georgakis, Y. Li, G. Z. Rassidakis et al. Inhibition of Heat Shock Protein 90 function by 17- Allylamino- 17-Demethoxy-Geldanamycin in Hodgkin's Lymphoma Cells Down-Regulates Akt Kinase, Dephosphorylates Extracellular Signal Regulated Kinase, and Induces Cell Cycle Arrest and Cell Death // Clin Cancer Res. - 2006. - Vol. 12, № 2. - Р. 584-590.
 

Добавить комментарий

Правила! Запрещается ругаться матом, оскорблять участников/авторов, спамить, давать рекламу.



Защитный код
Обновить

« Пред.   След. »
 
 
Альманах Научных Открытий. Все права защищены.
Copyright (c) 2008-2024.
Копирование материалов возможно только при наличии активной ссылки на наш сайт.

Warning: require_once(/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php) [function.require-once]: failed to open stream: Нет такого файла или каталога in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99

Fatal error: require_once() [function.require]: Failed opening required '/home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/css/llm.php' (include_path='.:/usr/local/zend-5.2/share/pear') in /home/users/z/zverkoff/domains/tele-conf.ru/templates/bioinformatix/index.php on line 99