Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Институт молекулярной биологии и биофизики СО РАМН, г. Новосибирск
Кафедра биохимии и молекулярной биологии
Лаборатория биохимии чужеродных соединений
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.
Актуальность: хронические лимфопролиферативные заболевания — медленно прогрессирующие онкологические заболевания крови, ос¬но¬ву опу¬хо¬ли со¬став¬ляют лимфатические клетки разного уровня дифференцировки. Неэффективность химиотерапии при их лечении может быть обусловлена формированием множественной лекарственной устойчивости (МЛУ). Одним из механизмов МЛУ является функционирование системы метаболизма ксенобиотиков, которая способствует трансформации лекарственных средств и выведению их из клетки. Обезвреживание препаратов осуществляется в два этапа. В первую фазу происходит окисление и гидролиз ксенобиотиков, катализируемые суперсемейством цитохромов P450 (CYP), на втором – конъюгирование, например, семейством глутатион-S-трансфераз (GST). В биотрансформации препаратов, входящих в стандартные протоколы химиотерапии (CHOP, COP) при лечении хронических лимфопролиферативных заболеваний, участвуют ферменты суперсемейства цитохромов CYP2C и семейства глутатионтрансфераз GSTP1. Полиморфизмы генов CYP2C и GSTP1 могут быть причиной изменения активности ферментов, что влияет на эффективность терапии [1].
Цель: оценка ассоциации генетических полиморфизмов CYP2C8*2, CYP2C8*3, CYP2C9*2, CYP2C9*3, CYP2C19*2, CYP2C19*3 и GSTP1 A313G с риском формирования лекарственной устойчивости.
Материалы и методы: материалом для исследования были образцы периферической крови больных хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ) или неходжкинскими лимфомами (НХЛ), получавших лечение по стандартным протоколам химиотерапии в Государственной Новосибирской областной клинической больнице. Всего обследовано 62 пациента, из них 25 женщин (средний возраст 53 года) и 37 мужчин (средний возраст 57 лет). По эффекту от лечения пациенты были разбиты на 2 группы: в случае стабилизации, частичной или полной ремиссии ответ считали положительным, при прогрессии заболевания – отрицательным. Полиморфизмы CYP2C8*2, CYP2C8*3, CYP2C9*2, CYP2C9*3, CYP2C19*2, CYP2C19*3 и GSTP1 A313G определяли методом анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов с использованием рестриктаз Kzo9 I, BseR I, Asp S9 I, Erh I, Sma I, BamH I и BstMA I, соответственно. Наблюдаемое распределение генотипов проверяли на отклонение от равновесия Харди-Вайнберга. Для оценки ассоциации полиморфизмов с риском возникновения лекарственной устойчивости использовали показатель отношение шансов (ОШ), который был подсчитан для комбинированной группы, включающей гомозигот мутантного типа и гетерозигот, в сравнении с генотипом дикого типа [2]. Достоверность различий между группами оценивали по критерию χ2 с поправкой Йейтса и, в случае N<5, по двустороннему критерию Фишера.
Результаты: В результате исследований получены следующие частоты полиморфных аллелей: CYP2C8*2 - 0,00, CYP2C8*3 – 0,14, CYP2C9*2 – 0,13, CYP2C9*3 – 0,59, CYP2C19*2 – 0,14, CYP2C19*3 – 0,00 и GSTP1 A313G – 0,24. Полученные значения соответствуют литературным данным для европеоидных популяций [3, 4].
Анализ ассоциаций между полиморфными вариантами CYP2C8*3 и эффектом от лечения показал, что у больных, имеющих один или оба мутантных аллеля, вероятность устойчивости к химиотерапии в 4.57 раза достоверно выше (p=0.047) в сравнении с больными, имеющими генотип дикого типа. Аналогичная связь прослеживается для полиморфизма CYP2C9*2: у больных с наличием хотя бы одного мутантного аллеля в генотипе вероятность устойчивости к химиотерапии в 5.69 раза выше (p=0.0195), чем у больных, являющихся гомозиготами дикого типа. Для других исследуемых полиморфизмов не выявлено достоверно значимых ассоциаций: для CYP2C9*3 ОШ=0.99 (p=0.67), CYP2C19*2 ОШ=0.69 (p=0.89), CYP2C19*3 и GSTP1 A313G ОШ=1.17 (p=0.95). Отношение шансов для полиморфизмов CYP2C8*2 и CYP2C19*3 не определялось, так как все больные были гомозиготами дикого типа.
Таким образом, можно заключить, что у больных ХЛЛ и НХЛ полиморфизмы CYP2C8*3 и CYP2C9*2 ассоциированы с формированием лекарственной устойчивости.
Список литературы:
1. Rodriguez-Antonal C, Ingelman-Sundberg M. Cytochrome P450 pharmacogenetics and cancer // Oncogene. – 2006 – Vol. 25. – P. 1679 – 1691.
2. Pearce N. What does the odds ratio estimate in a case-control study? // Int. J. Epidemiol. – 1993. – Vol. 22. – N. 6. – P. 1189 – 1192.
3. Heydy V. Bravo-Villalta, Koujirou Yamamoto, Katsunori Nakamura et al. Genetic polymorphism of CYP2C9 and CYP2C19 in a Bolivian population: an investigative and comparative study. // European Journal of Clinical Pharmacology. – 2005 – Vol. 61. – N. 3. – P. 179 – 84.
4. Goldstein JA, Ishizaki T, Chiba K et al. Frequencies of the defective CYP2C19 alleles responsible for the mephenytoin poor metabolizer phenotype in various Oriental, Caucasian, Saudi Arabian and American black populations. // Pharmacogenetics. – 1997 – Vol. 7 – P. 59 – 64.
|
