Дальневосточный государственный аграрный университет (г.Благовещенск) Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Естествознание и гуманизм» (2005 год, Том 2, выпуск 5), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н. Посмотреть титульный лист сборника Несмотря на значительный успех в изучении язвенной болезни, внедрение и разработку новых направлений в лечении, данная проблема остается акту-альной, так как большой арсенал противоязвенных средств обладают недостаточным лечебным и профилактическим эффектом. Кроме того, длительное их приме-нение вызывает различные побочные эффекты и тяжелые осложнения [4,6,7,9,12]. В последнее десятилетие с внедрением в клиническую практику эндоскопических исследований выяснилось, что ульцерозные процессы у собак регистри-руются значительно чаще, чем мы об этом думали ранее [1,2,3]. Цель работы – изучить гистоморфологическую реакцию периульцерозного инфильтрата при сочетанном и раздельном лечении экспериментальной яз-венной болезни желудка собак энтеросгелем, рибонаном и лазерным излучением (ЛИ) в постоянном магнитном поле (ПМП). Гидрогель метилкремниевой кислоты (энтеросгель) – единственный энтеросорбент, обладающий избирательностью сорбции, практически не связывает вещест-ва с молекулярной массой меньше 70 (ионы металлов, минеральные соли, электролиты) и более 1000 (белки, иммуноглобулины). Кроме того, препарат не подвер-гается гидролизу в желудочно-кишечном тракте, имеет обволакивающий эффект в отношении поверхности слизистой желудка и кишечника, защищая её при эрозиях и язвенных процессах [8]. Риботан – препарат, действующий на иммунную систему, представляет собой смесь низкомолекулярных полипептидов и низкомолекулярных фрагментов РНК [11]. Применяемые при лечении различных патологий желудочно-кишечного тракта низкоинтенсивные лазеры в сочетании с ПМП, повышающим степень проникно-вения вглубь тканей, позволяют осуществлять чрескожное воздействие на внутренние органы [5]. Объектом для исследований служили беспородные собаки, у которых моделировали язву желудка в пилорическом отделе, путем диатермо-коагуляции слизистой оболочки через фиброгастроскоп (OLIMPUS CLE – 4U) с последующим введением винкрестина из расчета 0,01 мг/кг для стойкой хрониза-ции процесса, терапию применяли с восьмых суток. Собаки были распределены на 6 групп по 3 животных в каждой. Животные первой контрольной группы были интактные, на них язву не моделировали, но аналогично опытным группам вводили винкристин. Вторым контролем служила группа животных с язвенной болез-нью желудка, без лечения. Первой опытной группе один раз в сутки перорально вводили энтеросгель из расчета 0,2г на 1кг массы тела. Собакам второй опытной группе через сутки внутримышечно иньецировали риботан в дозе 2,0 мл на 20 кг массы тела. Собакам третьей опытной группы облучали область желудка ЛИ в ПМП с частой 50 Гц и мощностью 40-45 мВт в 4 зонах (по 2 мин в каждой). Собакам четвертой опытной группы облучали область желудка ЛИ в ПМП с частой 50 Гц и мощностью 40-45 мВт в 4 зонах (по 2 мин в каждой), затем им один раз в сутки перорально вводили энтеросгель из расчета 0,2г на 1кг массы тела. Через сутки собакам внутримышечно инъецировали риботан в дозе 2,0 мл на 20 кг массы тела. Экспериментальных животных подвергали эвтаназии на 16 сутки, т.е. после 8 суток лечения. Желудок извлекали сразу после смерти животного и отбирали материал для гистологического исследования, который фиксировали в 10-процентном водном растворе нейтрального формалина и жидкости Карнуа. Гистотопо-графические срезы, проведенные через язвенные дефекты стенки желудка и окружающую их слизистую оболочку, готовили из парафиновых блоков по общепри-нятой методике. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, альцеановым и толуидиновым синим, а также проводили ШИК-реакцию. Морфометрические исследования проводили с помощью окулярного микрометра МОВ-1-15 и окулярной сетки для цитогистостереометрических исследований со 100 и 25 точка-ми. Все цифровые данные обрабатывались методами вариационной статистики с определением критерия (t) Стьюдента. На восьмые сутки течения язвенной болезни (контроль – 2) при гистологическом исследовании в участках прилежащих к краям язвы определялась инфильтра-ция собственной пластинки и эпителия полиморфно-ядерными лейкоцитами (3,3+0,02%%), лимфоцитами (8,2+0,03%%), плазматическими клетками (7,4+0,03%%) и единичными макрофагами (3,7+0,04%%). Параллельно определялось полнокровие сосудов в собственной пластинке слизистой оболочки желудка периульцероз-ной зоны. На восьмые сутки лечения язвенной болезни желудка все морфофункциональные показатели состояния периульцерозного инфильтрата у экспериментальных животных представлены в таблице. В группе без какого либо лечения с течением хронической язвы желудка 16 дней было обнаружено, что количество межэпите-лиальных лимфоцитов достоверно увеличивалось по отношению к показателям интактных животных и собак с длительностью хронической язвы желудка восемь дней, на 69% (Р<0,05) и 6,5% (Р<0,05) соответственно. Изменения воспалительного инфильтрата по сравнению с восьмыми сутками эксперимента подчинялись закономерностям развития хронического воспаления. Так у собак без лечения объемная доля лимфоцитов возрастала на 29% (Р<0,05), макрофагов – 68% (Р<0,05) и плазматических клеток – 3%. В то время как объемная доля полиморфно-ядерных лейкоцитов уменьшалась на 49% (Р<0,001). По отношению к не леченой группе животных во всех группах, где в течение восьми дней проводили лечение, происходило уменьшение степени кровенаполне-ния сосудов, объемной доли лимфоцитов, плазматических клеток, эозинофилов, полиморфноядерных лейкоцитов и макрофагов, но количество межэпителиальных лимфоцитов увеличивалось. Однако данные изменения в опытных группах происходили неоднозначно. Количество межэпителиальных лимфоцитов было достоверно выше в группах с применением лазерного излучения в ПМП на 11% (Р<0,05) и сочетанного при-менения энтеросгеля, риботана и лазера в ПМП на 12% (Р<0,05). При этом степень кровенаполнения сосудов достоверно уменьшалась под действием ЛИ в ПМП в 1,3 раза, в сравнении с группой не получавшей лечение, при выпаивании энтеросгеляаблица Гистоморфологические показатели слизистой оболочки периульце-розной зоны желудка собак при хронической язве желудка с применением различных методов лечения в течение восьми дней, М+m
показатели | Контрольные группы | Опытные группы | Первая (интактный контнроль) | Вторая (без лечения) | Первая (энтеросгель) | Вторая (риботан) | Третья (ЛИ в ПМП) | Четвертая (энтеросгель, риботан и ЛИ в ПМП) | Толщина слизистой оболочки, мкм | 653+89 | 891+53 Р1<0,01 | 751+38 Р1<0,05; Р2<0,01 | 790+42 Р1<0,05; Р2<0,01 | 740+39 Р1<0,05; Р2<0,01 | 711+48 Р1<0,05; Р2<0,01 | Кровенаполнение сосудов, % | 16,4+1,79 | 57,3+3,98 Р1<0,001 | 40,9+4,32 Р1<0,001; Р2<0,05 | 47,8+3,12 Р1<0,001; Р2<0,05 | 44,1+3,21 Р1<0,01; Р2<0,05 | 35,8+2,24 Р1<0,05; Р2<0,01 | Объемная доля: - лимфоциты, %% | 2,3+0,19 | 10,60 Р1<0,001 | 6,44 Р1<0,001; Р2<0,05 | 7,31 Р1<0,001; Р2<0,05 | 6,81 Р1<0,001; Р2<0,05 | 5,01 Р1<0,001; Р2<0,05 | - плазматические клетки, %% | 8,48+0,59 | 7,68 Р1<0,05 | 6,23 Р1<0,01; Р2<0,05 | 7,01 Р1<0,01; Р2>0,05 | 7,91 Р1<0,01; Р2>0,05 | 8,01 Р1<0,05; Р2>0,05 | - эозинофилы, %% | 1,79+0,15 | 3,42 Р1<0,001 | 2,37 Р1<0,05; Р2<0,05 | 2,1 Р1<0,05; Р2<0,05 | 2,3 Р1<0,05; Р2<0,05 | 2,01 Р1<0,05; Р2<0,01 | - полиморфно-ядерные лейкоциты, %% | 0 | 1,61 Р1<0,001 | 1,48 Р1<0,001; Р2>0,05 | 1,21 Р1<0,001; Р2>0,05 | 1,10 Р1<0,001; Р2<0,05 | 0,7 Р1<0,001; Р2<0,01 | - макрофаги, %% | 2,42+0,2 | 6,23 Р1<0,001 | 4,18 Р1<0,01; Р2>0,05 | 5,2 Р1<0,01; Р2>0,05 | 5,01 Р1<0,01; Р2>0,05 | 4,39 Р1<0,01; Р2>0,05 | - тучные клетки, %% | 0,18+0,02 | 1,73 Р1<0,001 | 1,14 Р1<0,01; Р2>0,05 | 1,2 Р1<0,01; Р2>0,05 | 1,01 Р1<0,01; Р2>0,05 | 1,01 Р1<0,01; Р2>0,05 | - фибробласты, %% | 0 | 2,79 Р1<0,001 | 2,69 Р1<0,001; Р2>0,05 | 3,1 Р1<0,001; Р2>0,05 | 3,01 Р1<0,001; Р2>0,05 | 2,1 Р1<0,001; Р2<0,05 | Количество межэпителиальных лимфоцитов на 1000 эпителиоцитов, ед. | 51,1+2,74 | 86,6 Р2<0,01 | 83,4 Р2<0,01; Р2>0,05 | 91,1 Р2<0,01; Р2>0,05 | 96,3 Р2<0,01; Р2<0,05 | 97,1 Р2<0,01; Р2<0,05 | Ядерно-цитоплазматическое отношение | 0,62+0,08 | 0,69 Р1>0,05 | 0,76 Р1>0,05; Р2>0,05 | 0,71 Р1>0,05; Р2>0,05 | 0,74 Р1>0,05; Р2>0,05 | 0,81 Р1>0,05; Р2>0,05 | Примечание: Р1 – достоверность показателей к интактному контролю; Р2 - достоверность показателей к контролю.
На фоне уменьшения отечности и полнокровия микрососудистого русла состав воспалительного клеточного инфильтрата изменялся в зависимости от вида ле-чения неоднозначно. Объемная доля лимфоцитов в сравнении с группой не леченого контроля достоверно уменьшалась при всех вариантах лечения, и наибольшее снижение данного показателя наблюдали в четвертой опытной группе в два раза (Р<0,01). Данные, полученные в отношении объемной доли плазматических кле-ток, при применении энтеросгеля имела тенденцию к снижению на 19% (Р<0,05), а при остальных вариантах лечения достоверно не отличалась от показателей не леченой группы. При облучении лазером в ПМП и в группе сочетанного применения энтеросгеля, риботана и лазера в ПМП объемная доля полиморфноядерных лейкоцитов по сравнению с группой без лечения достоверно уменьшалась на 32 (Р<0,05) и 57% (Р<0,01) соответственно. При других вариантах лечения данный показатель имел тенденцию к снижению. Объемная доля макрофагов и тучных клеток в сравнении с группой без лечения достоверно уменьшались при всех вари-антах лечения. Таким образом достоверное снижение лимфоплазмоцитарной и полиморфно-ядерной инфильтрации периульцерозной зоны наблюдалось в группе сочетанного применения энтеросгеля, риботана и лазера в ПМП. ЛИТЕРАТУРА 1. Абдулаев Дж. С. Опыт хирургического лечения язвенной бо- лезни желудка/ Дж. С. Абдулаев //Хирургия.- 1999. - №6. -С. 8-11. 2. Аруин Л.И. Хронические эрозии желудка / Л.И. Аруин, А.А. Ильченко // Архив патологии. - 1985. - № 12. - С. 26-32. 3. Василенко В.Х. Язвенная болезнь/ В.Х. Василенко, А..Л. Гребнев. – М., 1987. – С. 224-230. 4. Дегтярев И.И., Харченко И В. Язвенная болезнь/ И.И. Дегтярев, И.В. Харченко- Киев., 1995.-245С. 5. Илларионов В.Е. Основы лазерной терапии/ В.Е. Иларионов. – М., 1992. 123с. 6. Коробов Диагностика язвенной болезни желудка у свиней / // Ветеринария –1998. -№10. –С. 10 –11. 7. Коробов А.В. Язвенная болезнь / А.В. Коробов // Внутренние болезни животных. СПб.: Изд-во «Лань», - 2002. - С. 145-153. 8. Мамаев, И.В. Клиническое применение препарата энтеросгель у больных с патологией органов пищеварения/ И.В. Мамаев, Ю.Н. Шевченко А.Б. Петухова// Москва. Методические рекомендации. –2000. 9. Ниманд Х.Г. Болезни собак: Практическое руководство для ветеринарных врачей/ Х.Г. Ниманд, П.Ф. Скутер. – М., 1998. – С.525. 10. Ойвин, И.А. Статистическая обработка результатов экспериментальных исследований/ И.А. Ойвин// Патологическая физиология и экспериментальная терапия. – 1960. – №4. – С. 76. 11. Серебрянская М.В., Раппопорт С.И Роль иммунных механизмов в этиологии и патогенезе язвенной болезни / М.В. Серебрянская, С.И. Раппопорт// Клинич.медицина. – 1988. – Т.66, № 5 . – С. 13-20. 12. Старченков С.В. Болезни мелких животных/ С.В.Старченков. – СПб: Лань, 1999. –С. 115-117.
|