Дальневосточный государственный аграрный университет

В последнее десятилетие с внедрением в клиническую практику эндоскопических исследований выяснилось, что ульцерозные процессы у собак регистрируются значительно чаще, чем мы об этом думали ранее [1-3]. Несмотря на значительный успех в изучении язвенной болезни, внедрение и разработку новых направлений в лечении данная проблема остается актуальной, так как большой арсенал противоязвенных средств обладает недостаточным лечебным и профилактическим эффектом [4; 6; 7; 9; 11].
Энтеросгель - энтеросорбент, обладающий избирательностью сорбции. Кроме того, препарат не подвергается гидролизу в желудочно-кишечном тракте, имеет обволакивающий эффект в отношении поверхности слизистой желудка и кишечника, защищая её при эрозиях и язвенных процессах [8].
Применяемые при лечении различных патологий желудочно-кишечного тракта низкоинтенсивные лазеры (ЛИ) в сочетании с постоянным магнитным полем (ПМП), повышающим степень проникновения вглубь тканей, позволяют осуществлять чрескожное воздействие на внутренние органы [5].
Цель работы - изучить гистоморфологическую реакцию периульцерозного инфильтрата при сочетанном и раздельном лечении экспериментальной язвенной болезни желудка собак энтеросгелем и лазерным излучением в постоянном магнитном поле.
Объектом для исследований служили беспородные собаки, у которых моделировали язву желудка в пилорическом отделе, путем диатермокоагуляции слизистой оболочки через фиброгастроскоп (OLIMPUS CLE-4U) с последующим введением винкрестина из расчета 0,01 мг/кг для стойкой хронизации процесса. Терапию применяли с восьмых суток. Собаки были распределены на пять групп по три животных в каждой. Животные первой контрольной группы были интактные, на них язву не моделировали, но аналогично опытным группам вводили винкристин. Вторым контролем служила группа животных с язвенной болезнью желудка, без лечения. Первой опытной группе один раз в сутки перорально вводили энтеросгель из расчета 0,2 г на 1 кг массы тела. Собакам второй опытной группы облучали область желудка ЛИ в ПМП с частой 50 Гц и мощностью 40-45 мВт в 4 зонах (по 2 мин в каждой). Собакам третьей опытной группы облучали область желудка ЛИ в ПМП с частой 50 Гц и мощностью 40-45 мВт в 4 зонах (по 2 мин в каждой), затем им один раз в сутки перорально вводили энтеросгель из расчета 0,2 г на 1 кг массы тела.
Экспериментальных животных подвергали эвтаназии на 16 сутки, т.е. после 8 суток лечения. Желудок извлекали сразу после смерти животного и отбирали материал для гистологического исследования, который фиксировали в 10% водном растворе нейтрального формалина и жидкости Карнуа. Гистотопографические срезы, проведенные через язвенные дефекты стенки желудка и окружающую их слизистую оболочку, готовили из парафиновых блоков по общепринятой методике. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, альцеановым и толуидиновым синим, а также проводили ШИК-реакцию. Морфометрические исследования проводили с помощью окулярного микрометра МОВ-1-15 и окулярной сетки для цитогистостереометрических исследований со 100 и 25 точками. Все цифровые данные обрабатывались методами вариационной статистики с определением критерия (t) Стьюдента.
На восьмые сутки течения язвенной болезни (контроль - 2) при гистологическом исследовании в участках, прилежащих к краям язвы, определялась инфильтрация собственной пластинки и эпителия полиморфно-ядерными лейкоцитами (3,3±0,02%), лимфоцитами (8,2±0,03%), плазматическими клетками (7,4±0,03%) и единичными макрофагами (3,7±0,04%). Параллельно определялось полнокровие сосудов в собственной пластинке слизистой оболочки желудка переульцерозной зоны.
На восьмые сутки лечения язвенной болезни желудка все морфофункциональные показатели состояния периульцерозного инфильтрата у экспериментальных животных представлены в таблице.

Гистоморфологические показатели слизистой оболочки

периульцерозной зоны желудка собак при хронической язве желудка

с применением различных методов лечения в течение восьми дней, М

Показатель	Контрольная группа		Опытная группа
	первая (интактный контроль)	вторая (без лечения)	первая (энтеросгель)	вторая (ЛИ в ПМП)	третья (энтеросгель и ЛИ в ПМП)
Толщина слизистой оболочки, мкм	653	891 Р1<0,01	751 Р1<0,05 Р2<0,01	740 Р1<0,05 Р2<0,01	711 Р1<0,05 Р2<0,01
Кровенаполнение сосудов, %	16,4	57,3 Р1<0,001	40,9 Р1<0,001 Р2<0,05	44,1 Р1<0,01 Р2<0,05	35,8 Р1<0,05 Р2<0,01
Объемная доля, %: лимфоциты	2,30	10,60 Р1<0,001	6,44 Р1<0,001 Р2<0,05	6,81 Р1<0,001 Р2<0,05	5,01 Р1<0,001 Р2<0,05
плазматические клетки	8,48	7,68 Р1<0,05	6,23 Р1<0,01 Р2<0,05	7,91 Р1<0,01 Р2<0,05	8,01 Р1<0,05 Р2<0,05
эозинофилы	1,79	3,42 Р1<0,001	2,37 Р1<0,05 Р2<0,05	2,30 Р1<0,05 Р2<0,05	2,01 Р1<0,05 Р2<0,01
полиморфно-ядерные лейкоциты	0	1,61 Р1<0,001	1,48 Р1<0,001 Р2<0,05	1,10 Р1<0,001 Р2<0,05	0,70 Р1<0,001 Р2<0,01
макрофаги	2,42	6,23 Р1<0,001	4,18 Р1<0,01 Р2>0,05	5,01 Р1<0,01 Р2>0,05	4,39 Р1<0,01 Р2>0,05
тучные клетки	0,18	1,73 Р1<0,001	1,14 Р1<0,01 Р2>0,05	1,01 Р1<0,01 Р2>0,05	1,01 Р1<0,01 Р2>0,05
фибробласты	0	2,79 Р1<0,001	2,69 Р1<0,001 Р2>0,05	3,01 Р1<0,001 Р2>0,05	2,10 Р1<0,001 Р2>0,05
Количество межэпителиальных лимфоцитов на 1000 эпителиоцитов, ед.	51,1	86,6 Р1<0,01	83,4 Р1<0,01 Р2>0,05	96,3 Р1<0,01 Р2<0,05	97,1 Р1<0,01 Р2<0,05
Ядерно-цитоплазматическое отношение	0,62	0,69 Р1>0,05	0,76 Р1>0,05 Р2>0,05	0,74 Р1>0,05 Р2>0,05	0,81 Р1>0,05 Р2>0,05

Примечание: Р₁ – достоверность показателей к интактному контролю; Р₂ – достоверность показателей к контролю

В группе без какого-либо лечения с течением хронической язвы желудка - 16 дней было обнаружено, что количество межэпителиальных лимфоцитов достоверно увеличивалось по отношению к показателям интактных животных и собак с длительностью хронической язвы желудка восемь дней на 69% (Р<0,05) и 6,5% (Р<0,05) соответственно. Изменения воспалительного инфильтрата по сравнению с восьмыми сутками эксперимента подчинялись закономерностям развития хронического воспаления. Так, у собак без лечения объемная доля лимфоцитов возрастала на 29% (Р<0,05), макрофагов - 68% (Р<0,05) и плазматических клеток - 3%. В то время как объёмная доля полиморфно-ядерных лейкоцитов уменьшалась на 49% (Р<0,001)..
По отношению к нелеченым животным во всех группах, где в течение восьми дней проводили лечение, происходило уменьшение степени кровенаполнения сосудов, объемной доли лимфоцитов, плазматических клеток, эозинофилов, полиморфно-ядерных лейкоцитов и макрофагов, но количество межэпителиальных лимфоцитов увеличивалось. Однако данные изменения в опытных группах происходили неоднозначно.
Количество межэпителиальных лимфоцитов было достоверно выше в группах с применением лазерного излучения в ПМП на 11% (Р<0,05) и сочетанного применения энтеросгеля и лазера в ПМП на 12% (Р<0,05). При этом степень кровенаполнения сосудов достоверно уменьшалась под действием ЛИ в ПМП в 1,3 раза, в сравнении с группой, не получавшей лечение, при выпаивании энтеросгеля в 1,4 раза, при их сочетании в 1,6 раза. На фоне уменьшения отечности и полнокровия микрососудистого русла состав воспалительного клеточного инфильтрата изменялся в зависимости от вида лечения неоднозначно.
Объемная доля лимфоцитов в сравнении с группой контроля достоверно уменьшалась при всех вариантах лечения. Наибольшее снижение данного показателя наблюдали в четвертой опытной группе: в два раза (Р<0,01). Данные, полученные в отношении объемной доли плазматических клеток, при применении энтеросгеля имели тенденцию к снижению на 19% (Р<0,05), а при остальных вариантах лечения достоверно не отличалась от показателей животных нелеченой группы. При облучении лазером в ПМП и в группе сочетанного применения энтеросгеля и лазера в ПМП объемная доля полиморфно-ядерных лейкоцитов, по сравнению с группой без лечения, достоверно уменьшалась на 32 (Р<0,05) и 57% (Р<0,01) соответственно.
При других вариантах лечения данный показатель имел тенденцию к снижению. Объемная доля макрофагов и тучных клеток в сравнении с группой без лечения достоверно уменьшались при всех вариантах лечения.
Таким образом, достоверное снижение лимфоплазмоцитарной и полиморфно-ядерной инфильтрации периульцерозной зоны наблюдалось в группе сочетанного применения энтеросгеля и лазера в ПМП.

 

 

Литература
1. Абдулаев, Дж.С. Опыт хирургического лечения язвенной болезни желудка / Дж. С. Абдулаев // Хирургия.-1999.- №6.- С. 8-11.
2. Аруин, Л.И. Хронические эрозии желудка / Л.И. Аруин, А.А. Ильченко // Архив патологии.-1985.- № 12.-С. 26-32.
3. Василенко, В.Х. Язвенная болезнь / В.Х. Василенко, А.Л. Гребнев.- М., 1987.- С. 224-230.
4. Дегтярев, И.И. Язвенная болезнь / И.И. Дегтярев, И.В. Харченко.- Киев, 1995.- 245 с.
5. Илларионов, В.Е. Основы лазерной терапии / В.Е. Илларионов.- М, 1992.-123 с.
6. Коробов, А.В. Диагностика язвенной болезни желудка у свиней / А.В. Коробов // Ветеринария.-1998.- №10.- С.10-11.
7. Коробов, А.В. Язвенная болезнь / А.В. Коробов // Внутренние болезни животных.- СПб.: Лань, 2002.- С. 145-153.
8. Мамаев, И.В. Клиническое применение препарата энтеросгель у больных с патологией органов пищеварения: метод, рекомендации / И.В. Мамаев, Ю.Н. Шевченко, А.Б. Петухова.- М., 2000.
9. Ниманд, Х.Г. Болезни собак: практ. руководство для ветеринарных врачей / Х.Г. Ниманд, П.Ф. Скутер.- М.,1998.- С. 525.
10. Ойвин, И.А. Статистическая обработка результатов экспериментальных исследований / И.А. Ойвин // Патологическая физиология и экспериментальная терапия.-1960.- №4.- С. 76.
11. Старченков, С.В. Болезни мелких животных / С.В. Старченков.- СПб.: Лань, 1999.- С. 115-117.