Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Кафедра патофизиологии

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 71-й итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 14-16 мая 2012 г.), под ред. В. В. Новицкого, Н.В. Рязанцевой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2012. − 335 с. 

Скачать сборник (MS Word, 1 мб)

Скачать программу конференции 

Актуальность. Несмотря на многочисленные исследования, проводимые отечественными и зарубежными учеными, туберкулез продолжает оставаться значительной угрозой для здоровья человечества. Согласно современным представлениям, ключевым этапом в формировании антимикобактериального иммунитета является взаимодействие антигенпрезентирующих (АПК) и эффекторных клеток. Функциональная активность последних напрямую зависит от цитокинового микроокружения, которое формируется из медиаторов, продуцируемых АПК. Из литературных источников известно, что именно IL-12 (interleukin-12) является основным в формировании иммунного ответа при инфицировании Mycobacteriumtuberculosis (M. tuberculosis). Под влиянием IL-12 запускаются такие процессы, как трансформация Th0-лимфоцитов в Th1 и активация последних, усиление пролиферации и дифференцировки натуральных киллеров и цитотоксических Т-лимфоцитов, усиление антигенпрезентирующих свойств дендритных клеток.

Цель работы. Исследование IL-12β-секреторной активности моноцитов крови при туберкулезе легких.

Материал и методы. Были сформированы две группы: первую составили 48 больных с впервые выявленным распространенным деструктивным туберкулезом легких (ТЛ), во вторую вошли 25 здоровых доноров (возраст – 18-55 лет). Материал исследования – периферическая кровь, стабилизированная гепарином (25 ЕД/мл). Взятие крови проводили утром натощак из локтевой вены в количестве 20 мл. Выделяли мононуклеарные лейкоциты из крови стандартным методом на градиенте плотности Ficoll-Paque. Моноциты отделяли путем адгезии к пластику. Не прилипшие клетки смывали средой RPMI-1640. Для стимуляции секреторных способностей моноцитов в пробы вносили комплексный белковый антиген, выделенный из M. tuberculosisBeijing семейства, в дозе 20 мкг/мл. Определение концентрации IL-12β в клеточных супернатантах проводили иммуноферментным «сэндвичевым» методом («BioSource», Великобритания). Анализ полученных данных осуществляли с помощью программы Statistica 6.0. Для оценки нормальности распределения использовали критерий Колмогорова-Смирнова; количественные признаки в независимых выборках сравнивали непараметрическим критерием Манна-Уитни; в сравниваемых группах вычисляли медиану, 25%-й и 75%-й квартили. Для проверки нулевых гипотез критическое значение уровня статистической значимости принимали равным 0,05.

Результаты. В ходе исследования установлено, что у больных ТЛ в острый период заболевания имеет место угнетение базальной продукции IL-12β моноцитами периферической крови в 2,1 раза ((35,50 (23,48-39,30) пг/мл)) относительно параметров в контрольной группе (73,70 (64,50-103,00) пг/мл). Индуцированная белковым антигеном секреция IL-12β у больных ТЛ оказалась в 3,9 раза ниже аналогичного показателя у здоровых доноров, но в 2,4 раза выше базальной секреции цитокина.

Известно, что секреция IL-12 является результатом взаимодействия M. tuberculosis с АПК. По-видимому, низкий уровень продукции IL-12β у больных ТЛ препятствует формированию адаптивного антимикобактериального иммунитета, поскольку в этом случае нарушаются механизмы, связанные с секрецией цитокина, в частности дифференцировка и пролиферация Th1-лимфоцитов, синтез интерферона γ (INFγ) NK-, NKT-, γδТ- и CD8⁺-Т цитотоксическими лимфоцитами, экспрессия молекул костимуляции на макрофагах и секреция ими активированных метаболитов кислорода.