Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск

Целесообразность изучения роли клеток соединительной ткани в воспалительных процессах связана с проблемами коррекции хронических воспалительных заболеваний и неоднозначным прогнозом в отношении восстановления трудоспо¬собности пациентов [3; 4].
Для изучения ряда вопросов, имеющих важное практическое значение, широко используются клеточные культуры [1; 2]. Доказано, что при совместном культивировании тучных клеток и макрофагов наблюдается значительная активизация фагоцитарной функции последних [5], а от концентрации клеток зависит выраженность иммунного ответа [2]. Поскольку многие функции лаброцитов изучены недостаточно [2; 6; 7], то уточнение особенностей их дегрануляции необходимо признать одной из приоритетных задач.
Цель работы состояла: в изучении особенностей дегрануляции тучных клеток в культурах перитонеальных клеток (выделенных от мышей линий C57BL/6 и CBA) в зависимости от концентрации посадки, и в исследовании характера взаимодействия клеток при совместной инкубации культур фибробластов и перитонеальных клеток, при различной концентрации посадки последних.
В зависимости от генетической принадлежности и концентрации посадки клеток были сформированы следующие группы культур. Концентрация посадки в контрольных группах составляла 1000 тыс. перитонеальных клеток в 1 мл взвеси, выделенных от мышей линий C57BL/6 и CBA, а в экспериментальных группах она соответствовала 500 тыс. клеток в 1 мл. При проведении эксперимента по совместной инкубации культур перитонеальных клеток (содержащих лаброциты) и фибробластов мыши, в первой группе одномоментно вносили взвесь в объеме 1,5 мл, содержащую 100 тыс. фибробластов и 1000 тыс. перитонеальных клеток. Аналогичным образом формировали культуры второй группы, с той разницей, что концентрация посадки составляла 500 тыс. перитонеальных клеток.
Подсчет лаброцитов проводили дифференцированно для дегранулирующих и не дегранулирующих клеток. Результаты оценивали на 2, 24, 48 и 72 часа инкубации. Контролем служили культуры, инкубируемые в течение 2 часов. Все последующие изменения описаны относительно контроля.
В культурах перитонеальных клеток с высокой концентрацией посадки лаброциты присутствовали в препаратах уже на ранние сроки инкубации, чего не наблюдали в группах с пониженной концентрацией клеток.
Это явление можно объяснить тем, что при низкой концентрации посадки перитонеальных клеток, последние не успевают в достаточной мере продуцировать матрикс, который способствует прикреплению лаброцитов. В процессе промывки смываются слабо прикрепленные тяжелые тучные клетки, контактирующие с подложкой незначительной частью площади мембраны. Поскольку наличие белкового матрикса во многом обеспечивает адекватное прикрепление, то вполне объяснимо и большее содержание лаброцитов на поздних сроках инкубации в препаратах культур с высокой концентрацией клеток.
В таких культурах активность накопления метаболитов и секреция медиаторов макрофагами была повышенной, что и способствовало процессу дегрануляции. При пониженном содержании клеток требовалось значительно больше времени для накопления указанных факторов. В культурах, полученных от животных линии СВА, находили большее количество лаброцитов, чем в культурах групп C57BL/6 с аналогичными условиями культивирования.
В культурах группы с высокой концентрацией перитонеальных клеток при одномоментной посадки с фибробластами были созданы наиболее благоприятные условия для инкубации клеток соединительной ткани и фагоцитов. По этой причине в данной группе культур на 48 часов наблюдения лаброциты дегранулировали реже, чем в группе с низкой концентрацией клеток в 1,6 раза.
Таким образом, показана зависимость концентрации лаброцитов и степени активности дегрануляции от плотности посадки клеток, генетической принадлежности культур и сроков их инкубации. Полученные данные могут использоваться при моделировании процессов хронического воспаления с различной концентрацией лаброцитов и активностью процесса их дегрануляции, что является одним из этапов разработки методов коррекции хронических воспалительных заболеваний.

Список литературы:
1. Ильин Д.А., Архипов С.А. Модель взаимодействия гетерогенных клеточных культур // Компенсаторно-приспособительные процессы: Всероссийская конференция. Новосибирск, 2004. - С. 32 – 33.
2. Ильин Д.А., Архипов С.А Сравнительная оценка функциональной и интегративной активности макрофагов и лаброцитов в генотипически различных культурах перитонеальных клеток // VII всероссийская конференция по патологии клетки. Москва, 2005. - С. 56 – 57.
3. Ковалева С.И. Особенности эпидемиологии туберкулеза в Москве и меры по ее улучшению // Пробл. туб. – 1994. – № 5. – С. 2 – 4.
4. Хоменко А. Г. Туберкулез  сегодня и завтра – проблемы и пути решения // Пробл.туб. – 1995. – № 1. – С. 4 – 8.
5.Kovanen PT. Mast cell granule-mediated uptake of low density lipoproteins by macrophages: a novel carrier mechanism leading to the formation of foam cells // Ann Med. – 1991 –V. 23. – № 5. P. 551 – 559.
6.Lin T.J., Issekutz T.B., Marshall J.S. Sdf-1 induces il-8 production and transendothelial migration of human cord blood-derived mast cells // Int. Arch. Allergy Immunol. - 2001. – Vol. 124. – № 1–3. - P. 142 – 145.
7.Metcalfe D.D., Baram D., Mekori Y.A. Mast cells // Physiol. Rev. – 1997. – V. 77. – № 4. – P. 1033 – 1079.