РАМН НИИ медицинской генетики СО РАМН, г. Томск
Лаборатория эволюционной генетики

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 69-й научной итоговой студенческой конференции, посвященной 200-летию со дня рождения Н.И. Пирогова (г.Томск, 11-13 мая, 2009 год); под реакцией академика РАМН В.В. Новицкого, член. корр. РАМН Л.М. Огородовой

Посмотреть титульный лист сборника

Скачать сборник целиком (1,4 мб)

 

Актуальность: на сегодняшний день в мире одним из наиболее тяжелых осложнении беременности является гестоз, занимающий ведущее место в структуре материнской и пе¬ринатальной заболеваемости и смертности. Часто¬та этой патологии в России составляет 12-20% и не имеет тенденции к снижению [1]. Существует большое количество теорий развития гестоза, но ни одна из них полностью не объясняет его генеза.  Ряд ученых придерживается мнения о возможной роли наследственной предрасположенности в возникновении данного заболевания [2]. Исходя из современных представлений о патогенезе гестоза, в качестве возможных генетических маркеров этой патологии можно выделить полиморфные варианты генов, ответственных за развитие гиперкоагуляции.
Цель: изучить влияние полиморфизмов генов метилентетрогидрофолатредуктазы (MTHFR), пятого фактора (FV), протромбина (FII), белка GPIIIa (GPIIIa) в формировании гиперкоагуляции при гестозе.
Материал и методы: было обследовано 74 женщины с беременностью осложненной гестозом. У 41 пациентки не было отмечено какой-либо сопутствующей патологий, у 33 беременных диагностирован гестоз различной степени тяжести на фоне экстрагенитальных заболеваний: вегетососудистой дистонии (ВСД) по гипертоническому типу хронического пиелонефрита, ожирения, метаболического синдрома, гипертонической болезни. Контрольную группу из 43 человек составили недавно родившие женщины с нормально протекающей беременностью.
Были изучены частоты следующих аллельных вариантов генов: C667T  в 4-м экзоне и A1298C в 7-м экзоне MTHFR; G1691A в 10-м экзоне и  A4070G в 13 экзоне FV; G20210A в 3'-UTR FII; полиморфизм PLA1/PLA2 гена GPIIIa.
У обследованных индивидуумов была выделена ДНК, амплифицированны интересующие полиморфные локусы (методом ПЦР) с последующим рестрикционным анализом с помощью специфических эндонуклеаз. Продукты амплификации и рестрикции анализировали с помощью электрофореза соответственно в 2%-м агарозном и 8%-м полиакриламидном гелях, окрашивая бромистым этидием.
Результаты: при проведении сравнительного анализа полиморфизма C677T выявлено достоверное повышение частоты генотипа TT в группе женщин с гестозом (??=8,39;p <0,05), в подгруппах с легкой, среднетяжелой и тяжелой формами гестоза (??= 8,06 и 5,84 соответственно; р<0,05) по сравнению с контрольной группой. При попарном  сравнении исследуемых групп частоты аллелей по локусу C677T гена MTHFR значимо отличались в группе беременных с гестозом и в контрольной группе (??=9,81; р<0,05). Как в подгруппе с легкой формой гестоза, так и в подгруппе со среднетяжелой и тяжелой формами встречалась более высокая частота аллеля  T (??=9,22 и ??=4,71 соответственно, р<0,05). При анализе частот генотипов полиморфного варианта A1298C гена MTHFR в группе беременных с гестозом генотип СС встречался в 2,6 раз чаще (26%), чем в контроле (9%) (?? = 4,09). Максимально высокая частота генотипа СС (42%) отмечалась в подгруппе со среднетяжелой и тяжелой формами гестоза. Сравнение частот аллеля 1298С в исследуемых группах выявило достоверно более высокие значения частоты данного аллеля в группе с гестозом. Более высокая частота аллеля С отмечалась в подгруппе женщин со среднетяжелой и тяжелой формами гестоза по сравнению с частотой данного аллеля в подгруппе с легкой формой и в контроле (?? = 16,43 и ?? = 4,83 соответственно, р < 0,05).
Ген MTHFR у человека расположен на коротком плече первой хромосомы(1p36.3). Полиморфизм С677Т приводит к замене цитозина на тимидин в 4-ом экзоне, что приводит к замене аминокислотного остатка аланина  на остаток валина в сайте связывания фолата и накоплению гомоцистеина в организме. Полиморфизм А1298С гена MTHFR приводит к замене глутамина на аланин в регулярном домене фермента, что сопровождается небольшим снижением его активности. Комбинаций гетерозиготности аллелей 677Т и 1298С сопровождаются снижением активности фермента, повышением гомоцистеина, снижением уровня фолата [3]. Высокий уровень ГЦ увеличивает риск атеросклероза, ишемических нарушений, болезни Альцгеймера, сосудистой патологии беременности, проявляющейся в виде гестоза: нефропатии, преэкламсии и экламсии [4,5].
При сравнительном анализе частот генотипов и аллелей в обследованных группах по полиморфизмам G1691A и A4070G гена FV, G20210A гена FII, PLA1/PLA2 гена GPIIIa значимых отличии не найдено.
Выводы: Полученные данные свидетельствуют об участи наследственной тромбофилии в развитии гестоза. По результатам исследования высокая частота аллеля Т и генотипа ТТ полиморфизма С677Т гена MTHFR наблюдалась во всех исследованных группах больных гестозом  по сравнению с контрольной группой. Аллель С локуса А1298С достоверно ассоциирован с гестозом легкой, средней и тяжелой степени тяжести.
В данном исследовании не было обнаружено ассоциации с гестозом изученных полиморфизмов генов FV, FII и GPIIIa.
 
Список литературы:
1. Савельева, Г. М. Ефимов, В. С. Кашежева, А. З. Осложненное течение  беременности и гипергомоцистеинемия /Г. М. Савельева, В. С. Ефимов, А. З. Кашежева // Акушерство и гинекология. – 2000. – №3. – С. 3–5.
2. Малышева, О. В. Мозговая, Е. В. Демин, Г. С. и др. Ассоциация полиморфных аллелей генов АСЕ и еNOS с развитием гестозов / О. В. Малышева, Е. В. Мозговая, Г. С. Демин // Мед. генетика. – 2003. – Т. –2. – №2. – С. 78–82.
3. Narayanan, S. McConnell, J. Little, J. et al. Associations between two common variants C677T and A1298C in the methylenetetrahydrofolate reductase gene  and measures of folate metabolism and DNA stability in human lymphocytes in vivo / S. Narayanan, J. McConnell, J. Little // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prey – 2004. – V. 13. – P. 1436–1443.
4. Frosst, P. Blom, H.J. Milos, R. Et al A candidate genetic risk factor  for vascular disease: a common mutation in methylenetetrahydrofolate reducta / P. Frosst, H. J. Blom, R. Milos // Nature Genet. - 1995. - V. - 10. - P.  111 – 113.
5. Djordjevic, V. Rakicevis, L.J. Mikovic, D. Et al. Factor V Leiden, FII G20210A, MTHFR C677T  mutation as risk factors for venous thrombosis during pregnancy and puerperium / V. Djordjevic, L. J. Rakicevis, D. Mikovic // Vojnosanit Pregl. – 2005. – V. 62. – P. 201–205.