Ставропольский государственный университет

Куриный эмбрион является уникальной биологической моделью, которая традиционно используется в биологии в связи с рядом особенностей, которые присущи зародышу. Но, не взирая на то, что эмбрион птиц это экологически чистый изолированный от внешней среды объект, в процессе развития возможен его контакт с антигенами различного происхождения, что может оказать влияние на резистентность организма. Если действие на эмбрион птиц ряда физических и химических факторов изучено [2], то действие биологических антигенов относительно слабо исследовано. Наименее изученными являются реакции организма эмбриона на контакт с повсеместно распространенными аллергенами. Для взрослых особей кур не характерно развитие аллергической реакции немедленного типа I, связанной с отсутствием способности организма птиц вырабатывать иммуноглобулины класса Е. Нельзя с уверенностью сказать об отсутствии у них других типов реакций гиперчувствительности описанных в иммунологии и связанных с особенностями реагирования сенсибилизированных иммуномпетентных клеток, с другими классами иммуноглобулинов, а также с псевдоаллергическими реакциями. Кроме того, известны факты, свидетельствующие о накоплении продуктов экзогенного происхождения, в том числе агрессивных аллергенов, в желточном мешке. В связи с тем, что эмбрион в процессе развития в качестве источника питательных веществ использует желток, можно предположить, что накопление аллергена окажет какое-то влияние на ход эмбрионального развития.
Одним из важных процессов эмбриогенеза является формирование печени, так как она в этот период выполняет кроветворную функцию наряду с желточным мешком. Помимо этого по сообщению Ф.И. Сулейманова [1], печень первой начинает реагировать на изменяющиеся условия окружающей среды.
В связи с вышеизложенным целью работы явилось изучение на разных стадиях эмбрионального развития особенностей строения печени куриного эмбриона при нормальных условиях инкубации и при введении в желточный мешок аллергена.
В качестве антигена применялся аллерген пыльцевой амброзии полыннолистной. Для работы в лабораторных условиях были сформированы две группы эмбрионов. Первая группа являлась контролем. Эмбрионам второй группы однократно вводился антиген в желточный мешок на 12, 14, 16, 18-е сутки инкубации. Концентрация антигена составляла 1:100000, а доза – 0,03 мл. Отбор эмбрионов производился с периодичностью в 18-20 часов после введения аллергена, то есть на 13, 15, 17, 19 сутки инкубации. Для определения характера влияния антигена на развитие печени на различных стадиях эмбриогенеза оценивалось общее гистологическое строение органа. Исследования проводили по общепринятой методике с использованием современного микротома «ТЕХНОМ МЗП-1003» и замораживающего устройства «ТЕХНОМ ОМТ 0228» при температуре минус 8…14?С, с последующей окраской срезов гематоксилин-эозином.
В контрольной группе эмбрионов на 13 сутки инкубации гепатоциты не формируют характерных для печени балок и долек. Деления ткани на паренхиму и строму не прослеживается. Эритроциты в большом количестве инфильтрируют всю поверхность органа, что свидетельствует о кроветворении в печени.
В опытной группе в этот период строение печени эмбрионов не отличается от контрольной.
Следовательно, на 13 сутки инкубации формирующиеся ткани печени практически ареактивны на введение антигена. Вероятнее всего это связано с тем, что в этот период у эмбриона еще не произошло становление иммунной системы, обеспечивающей защитные функции организма. Как в опытной, так и в контрольной группе эмбрионов печень выполняет свойственную ей на данный период развития кроветворную функцию.
На 15 сутки инкубации в печени эмбрионов контрольной группы гепатоциты начинают выстраиваться в балки. Дольки не визуализируются. Паренхима и строма, свойственные зрелому органу, не дифференцируется. Происходит формирование синусов, которые в этот период умеренно расширены и кровенаполнены. В поле зрения отмечено наличие бессистемно расположенных и умеренно кровенаполненных сосудов различного диаметра как артериального, так и венозного происхождения, а также округлые скопления клеток низкого призматического эпителия (очевидно формирующиеся желчные протоки). По-прежнему сохраняется значительная эритроцитарная инфильтрация ткани.
В опытной группе на 15 сутки развития отсутствует балочное расположение гепатоцитов и разделение печени на дольки. Степень развития стромальных элементов органа не отличается от контроля. Однако в некоторых полях зрения отмечена выраженная околососудистая полиморфноклеточная инфильтрация. Среди клеток можно выделить соединительнотканные элементы (лимфоидные, эпителиоидные и гистиоциты). Кровенаполнение синусов несколько выше, чем в контрольной группе. Наблюдается набухание стенки как венозных, так и артериальных сосудов с повышением проницаемости сосудистой стенки и выходом элементов крови за ее пределы.
Таким образом, на 15 сутки прослеживаются реактивные изменения со стороны соединительно-тканных элементов, сопровождающиеся повреждением сосудов. По сравнению с контролем наблюдается замедление становления балочной структуры.
На 17 сутки инкубации в контрольной группе отчетливо выражено балочное строение органа. Разделения печени на дольки нет. Четко выраженной стромы не обнаружено. Синусы заполнены эритроцитами. Артериальные сосуды органа контрольной группы эмбрионов умеренно наполнены кровью. Общая инфильтрация ткани эритроцитами снижена, по сравнению с более ранними периодами развития. Это может свидетельствовать о некотором снижении интенсивности кроветворной функции органа.
В опытной группе эмбрионов на 17 сутки прослеживается балочное расположение гепатоцитов. Визуализируемого разделения печени на дольки нет. Четко выраженной стромы также не обнаружено. Синусы сформированы и в большей степени наполнены кровью, по сравнению с контрольной группой в этот период развития. Стенки артерий утолщены за счет набухания, отмечается слущивание эндотелия в просветы сосудов. Очаги экстрамедулярного кроветворения обширнее, чем в контроле.
Следовательно, на данный период развития контакт с аллергеном приводит к повреждению стенок сосудов по типу эндоартериита. Как и в течение предыдущих суток инкубации наблюдается замедление формирования органа в опытной группе по сравнению с контролем, выражающееся, прежде всего, в замедлении формирования балочной структуры.
На 19 сутки инкубации в контрольной группе эмбрионов балки выстроены, отмечены признаки формирования долек, что очевидно связано с нарастанием интенсивности образования соединительнотканных элементов, представленных скоплениями мелких, полиморфоядерных клеток между гепатоцитами. Кровенаполнение синусов и сосудов умеренное. Между дольками четко отделяются желчные протоки. Дифференцируются отграниченные очаги кроветворения.
В опытной группе сформировано четко выраженное балочное строение печени, но разделения на дольки в отличие от контроля слабо выражено. В отдельных, более крупных сосудах артериального происхождения прослеживаются признаки слущивания эндотелия, однако менее выраженные, чем в предыдущие сутки исследования опытной группы. В отличие от контроля отмечается более выраженное кровенаполнение артериальных сосудов и синусов. Вокруг желчных протоков и сосудов в междольковой ткани отмечена выраженная полиморфноклеточная инфильтрация. Сохраняются отдельные ограниченные очаги кроветворения также как и в контроле.
Таким образом, на 19 сутки развития под воздействием антигена реактивность тканей печени достаточно выражена и превосходит таковую на 17 сутки. При этом степень повреждающего воздействия на сосуды менее интенсивна.
Основываясь на полученных и описанных выше результатах экспериментальной работы можно заключить, что при введении куриному эмбриону в желточный мешок аллергена пыльцевого амброзии полыннолистной организм с разной интенсивностью отвечает на воздействие антигена выраженностью сосудистой реакции, степенью повреждения сосудов, замедлением этапов становления балочной структуры, реакцией соединительнотканных элементов, интенсивностью кроветворной функции.

 

 

Литература
1.    Сулейманов, Ф.И. Морфологическая реакция органов иммунной системы эмбрионов кур на изменение режима инкубации / Ф.И. Сулейманов, В.А. Голубцова // Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных. – Воронеж: Научная книга, 2006. – С. 199-203.
2.    Якименко И.Л., Розумнюк В.Т. Обработка инкубационных куриных яиц расфокусированным излучением гелий-неонового лазера // Киевский НИПЦ ИМЭКС, информ. листок. - К, 1991. - N002-91. - 3 с.