Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра фундаментальных основ клинической медицины
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 69-й научной итоговой студенческой конференции, посвященной 200-летию со дня рождения Н.И. Пирогова (г.Томск, 11-13 мая, 2010 год); под реакцией академика РАМН В.В. Новицкого, член. корр. РАМН Л.М. Огородовой
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (1,4 мб)
Актуальность: в настоящее время отмечается неуклонный рост заболеваемости сахарным диабетом (СД) во всех возрастных и этнических группах. Если дебют СД приходится на период от 18 до 40 лет, могут иметь место различные его патогенетические варианты, требующие дифференцированной терапевтической тактики [1]. Среди пациентов с СД 1 и 2 типов обозначилась особая группа больных латентным аутоиммунным диабетом взрослых (LADA). Основным лабораторным критерием LADA является наличие циркулирующих антител к клеткам панкреатических островков. Для LADA характерна манифестация в возрасте от 30 до 50 лет и отсутствие абсолютной инсулиновой недостаточности в последующие 6 месяцев, что по совокупности клинических данных приводит к постановке диагноза СД 2 типа ?2, 3?. Однако у данной группы больных достаточно быстро (6 мес – 5 лет) развиваются симптомы резистентности к препаратам сульфонилмочевины и инсулиновой недостаточности. Имеющиеся в литературе данные позволяют считать, что такое медленное повреждение b-клеток при LADA не является случайным, а отражает патогенетические особенности функционирования Т–звена иммунитета, отличные от механизмов развития классического СД типа 1. В настоящее время в качестве ключевых звеньев патогенеза повреждения b-клеток рассматриваются аутоиммунные механизмы, глюкозо- и липотоксичность, а также системный окислительный стресс и цитокиновый дисбаланс. В 1986 г. Mosmann и сотрудники предложили модель Th1/Th2 – поляризации иммунного ответа, постулирующую, что эти клеточные типы находятся во взаимоотношениях контррегуляции посредством продукции цитокинов. Считается, что Th1-клетки играют главную роль в патогенезе аутоиммунного диабета. Напротив, предполагается, что цитокины профиля Th2 могут быть протективными, подавляя патологический аутореактивный ответ 1 типа и поддерживая иммунологическую толерантность.
Цель работы - установить взаимосвязь между клиническими проявлениями сахарного диабета и поляризацией в системе Th1/Th2 посредством анализа зависимости базальной и фитогемагглютинин-стимулированной продукции мононуклеарными лейкоцитами IL-2, IL-4 и IL-10 от клинического типа диабета, стажа заболевания, индекса массы тела пациента и потребности в инсулине.
Материал и методы. В исследовании приняли участие 39 пациентов, с возрастом от 21 года до 62 лет, в том числе 25 женщин и 14 мужчин. Выборка была сформирована из больных сахарным диабетом, находившихся на обследовании и лечении в эндокринологическом отделении ОГУЗ ТОКБ и клиники эндокринологии ГОУ ВПО СибГМУ Росздрава. Диагноз сахарного диабета устанавливался на основании критериев ВОЗ. Группу больных с СД типа 1 составили 12 человек, средний возраст – 36,5?2,3 г., длительность заболевания – 9,5?2,8 г. Диагноз СД типа 1 устанавливался на основании развития кетоацидоза в течение первых 6 месяцев от начала заболевания, персистирующей потребности в инсулинотерапии после ликвидации кетоза и достижения метаболической компенсации.
Группу больных с СД типа 2 составил 21 человек, средний возраст – 52,6?1,1 г., длительность заболевания – 5,3?1 г. Диагноз СД типа 2 устанавливался на основании наличия маркеров метаболического синдрома, постепенного начала заболевания без развития кетоацидоза, отсутствия потребности в инсулинотерапии после ликвидации кетоза и достижения метаболической компенсации как минимум в течение 6 месяцев от начала заболевания. Группу больных LADA составили 6 человек, средний возраст – 44,2?3,8 г., длительность заболевания – 4,2?1,7 г.. Диагноз LADA устанавливался на основании клинических критериев - острой манифестации в возрасте от 30 до 50 лет без развития кетоацидоза, отсутствия потребности в инсулинотерапии после ликвидации кетоза и достижения метаболической компенсации как минимум в течение 6 мес от начала заболевания.
Контрольная группа включала 30 человек, средний возраст – 45,3?5,6 г., и была сопоставима по полу и возрасту с группами пациентов с СД.
Материалом исследования являлась венозная кровь обследованных лиц, взятая утром натощак. Кровь стабилизировали гепарином (25 Ед/мл). Мононуклеарные лейкоциты выделяли на градиенте плотности фиколл-верографин. Для получения супернатантов выделенные клетки ресуспендировали в полной питательной среде, стандартизируя их количество до 2,0?106/мл. Определение спонтанного и ФГА-стимулированного уровней IL-2, IL-4, и IL-10 в супернатантах проводили с использованием твердофазного иммуноферментного метода по инструкциям, предлагаемым производителями тест-систем («Procon», Россия). Учет результатов иммуноферментного анализа производили с помощью фотометра для микропланшетов «Multiscan EX» («ThermoLabSystems», Финляндия) при длине волны 450 нм.
Данные обрабатывали с использованием стандартного пакета программ Statistica for Windows (2008, версия 8.0) и пакета программ Microsoft Exсel (2007). Для оценки достоверности различий выборок, не подчиняющихся нормальному распределению, использовали критерии Манна-Уитни (для независимых выборок). Различия считались достоверными при уровне значимости р<0,05.
У пациентов с СД типа 1 обнаружен высокий уровень базальной продукции IL-2 и низкий уровень базальной продукции IL-4 и IL-10, что согласуется с гипотезой о Th1-поляризации иммунного ответа при этом заболевании. Низкие уровни ФГА-стимулированной продукции как IL-2, так и IL-4 и IL-10, вероятно, свидетельствуют о снижении функционального резерва мононуклеарных лейкоцитов вследствие метаболических расстройств (дисгликемия, дислипидемия) и абсолютной инсулиновой недостаточности.
У больных LADA также отмечен высокий уровень базальной продукции IL-2, что подтверждает тождественность патогенеза СД 1 типа и LADA как органоспецифических аутоиммунных заболеваний. Интересен тот факт, что уровни базальной и ФГА-стимулированной продукции IL-4 и IL-10 при LADA достоверно выше, чем у больных остальных клинических групп. Этот факт отражает особенности функционирования Т–звена иммунитета при LADA, отличные от механизмов развития СД типа 1, определяющие более медленное повреждение ?-клеток при этом заболевании.
Выводы: все вышеизложенное, на наш взгляд, не только подтверждает важную роль поляризации иммунного ответа в патогенезе аутоиммунного диабета, но и ставит вопрос о значении цитокиновой регуляции в механизмах формирования LADA, т.е. о детерминации скорости деструкции ?-клеток при естественном течении заболевания. Дальнейшее расширение знаний в этой области, верификация и детализация участия иммунопатологических процессов в прогрессировании деструкции b-клеток поджелудочной железы при СД типа 1 даст возможность разработать новые диагностические и терапевтические подходы в отношении этого заболевания.
Список литературы:
1. Смирнова О. М., Кононенко И. В., Дедов И. И. Аутоиммунный латентный сахарный диабет у взрослых // Проблемы эндокринологии. 2008. Т. 54, № 2. С. 1-7.
2. Fourlanos S., Perry C., Stein M. S. [et al.] A clinical screening tool identifies autoimmune diabetes in adults // Diabetes Care. 2006. V. 29, № 5. P. 970-975.
3. Maioli M., Puddu L., Pes G. M. [И др.] [Latent autoimmune diabetes in adults] [Article in Italian] // Clin Ter. – 2006. – V. 157, № 1. – P. 69-7
