Сибирский государственный медицинский университет

Кафедра офтальмологии

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 71-й итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 14-16 мая 2012 г.), под ред. В. В. Новицкого, Н.В. Рязанцевой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2012. − 335 с. 

Скачать сборник (MS Word, 1 мб)

Скачать программу конференции  

Актуальность.  Любой патологический процесс первоначально реализуется на клеточном уровне, сопровождаясь изменениями ультраструктуры и метаболизма клеток при модулирующем влиянии факторов микроокружения. В полости глазного яблока микроокружение складывается из взаимодействующего комплекса анатомо-физиологических особенностей и внестромальных компонентов регуляции. Внестромальные компоненты представлены клеточными элементами, мигрирующими в витреальную полость. В общем ансамбле клеток особого внимания заслуживают мононуклеары, создающие в патологическом очаге микросреду со сложной системой межклеточных контактов.

Цель. В эксперименте in vivo изучить особенности развития и прогрессирования фиброваскулярной пролиферации в полости глазного яблока, индуцированной мононуклеарами крови, в зависимости от функционального состояния клеток данной популяции.

Материал и методы. Разработаны экспериментальные модели фиброваскулярной пролиферации путем интравитреального введения аутологичных мононуклеаров крови, находящихся в различном функциональном состоянии. Выполнена серия экспериментов на 50 половозрелых крысах-самцах породы Wistar. Животным 1-й группы (n=25) патологический процесс моделировали путем интравитреального введения функционально активных мононуклеаров крови: через плоскую часть цилиарного тела вводили 0,05 мл изотонического раствора хлорида натрия, содержащего мононуклеары из расчета 3,0×106/мм3. Мононуклеары, взятые из крови экспериментального животного, выделяли с помощью градиента фиколл-верографин. Чистота мононуклеаров составляла 96-98%, жизнеспособность - 97-98%. Животным 2-й группы (n=25) патологический процесс индуцировали интравитреальным введением мононуклеаров крови, инактивированных в течение 24 часов в условиях гипотермии при температуре 0-1° С. Жизнеспособность клеток  составляла 49%.

В ходе экспериментов проводили непрямую бинокулярную  офтальмоскопию на 3, 7, 14 и 21 сутки после инъекции в условиях медикаментозного мидриаза. После каждой офтальмоскопии декапитировали по 5 животных из экспериментальных групп. Выполняли энуклеацию обоих глаз. Полученный материал фиксировали для световой и электронной микроскопии.

Результаты. Сравнительный анализ результатов морфологических исследований позволил выявить следующие отличия. Нарушение структуры сетчатки у животных обеих групп проявлялось деструкцией нейросенсорных клеток, которая в 1-й группе обнаруживалась уже на 3-е сутки, во 2-й группе - на 7-е от начала эксперимента.

Наряду с изменениями нейросенсорных клеток, наблюдалось расширение субретинального пространства, гипертрофия и отек отростков радиальной глии. У животных 1-й группы деструктивные изменения через внутренние слои доходили до наружного ядерного слоя и начинались уже с 7-х суток, усиливались к 14-м и местами сопровождались его выпадением. У животных 2-й группы истончение коснулось внутреннего ядерного слоя, которое началось на 14-е сутки. При этом на 21-е сутки выявлено его полное выпадение.

У животных 1-й группы фибриллярные структуры в стекловидном теле появлялись уже на 3-и сутки. На 14-е сутки формировались витреоретинальные шварты, активно развивались новообразованные сосуды. У животных 2-й группы фибриллярные структуры в стекловидном теле обнаруживались лишь на 7-е сутки, а образование фиброзных волокон начиналось на 14-е сутки.

Несмотря на разницу в выраженности и времени возникновения дегенеративных изменений у животных обеих групп пролиферативные периретинальные мембраны характеризовались сходным морфологическим строением. Клеточный состав был представлен, преимущественно, фибробластами, макрофагами и лимфоцитами. В течение всего периода наблюдения количество фибробластов в пролиферативных мембранах у животных 2-й группы было в несколько раз меньше, чем у животных 1-й группы вплоть до 7-х суток от начала эксперимента. Однако к 21-м суткам разница сократилась и составила лишь на 27,12% меньше, чем в эксперименте с функционально активными мононуклеарами.

Выводы. Таким образом, интравитреальное введение мононуклеаров крови в эксперименте индуцирует развитие фиброваскулярной пролиферации в полости глазного яблока, выраженность которой зависит от функциональной активности данных клеток. Функционально активные мононуклеары крови индуцируют выраженную фиброваскулярную пролиферативную реакцию в полости глазного яблока с усилением дегенеративных изменений структуры сетчатки. Мононуклеары, инактивированные в условиях гипотермии, вызывают, преимущественно,  повреждение внутренних слоев сетчатки с образованием эпиретинальной пролиферативной мембраны.

Работа выполнена при поддержке гранта Президента РФ для молодых ученых № МК-2650.2012.7.