Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра патологической физиологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 66-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2007 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
Скачать сборник целиком (формат .PDF, 1,5 мб)
На протяжении последних десятилетий рак легкого остается острейшей медико-социальной проблемой, занимая соответственно первое и четвертое места в структуре онкологической заболеваемости мужского и женского населения Российской Федерации.
Рак легкого характеризуется широким разнообразием фенотипических проявлений и факторов риска, одним из которых является генетическая предрасположенность [2]. Особый интерес вызывают полиморфные варианты генов II фазы системы биотрансформации ксенобиотиков – глутатион-S-трансфераз ?1 и ?1(GSTM1 и GSTT1). Белковые продукты этих генов участвуют во взаимодействии организма с неблагоприятными внешнесредовыми факторами. При “нулевых” генотипах GSTM1 (GSTM1 0/0) и GSTT1 (GSTT1 0/0) снижается активность глутатион-опосредованной биотрансформации ксенобиотиков, что, предположительно, повышает патогенность влияния токсичных метаболитов на ДНК. Генотип 0/0 широко распространен в популяции человека, при этом литературные сведения об ассоциации “нулевых” генотипов генов GSTM1 и GSTT1 с риском возникновения рака легкого и факторах, его модулирующих, противоречивы, что определяет актуальность подобных исследований в различных популяциях [1, 2, 3].
Целью исследования: провести сравнительный анализ частоты встречаемости генотипов GSTT1 и GSTM1 у больных мелкоклеточным раком легкого и здоровых доноров.
Проведено обследование 30 больных раком легкого, которые находились на лечении в клинике НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН и Областном онкологическом диспансере города Томска. Использованы 50 образцов периферической крови здоровых людей – 16 (32%) мужчин, 34 (68%) женщин в возрасте от 22 до 77 лет (средний возраст 43 года), которые составили контрольную группу, и 30 образцов крови больных мелкоклеточным раком легкого – 27 (90%) мужчин и 3(10%) женщин в возрасте от 46 до 72 лет (средний возраст 58 лет). Диагноз и гистологическая форма рака легкого были подтверждены морфологически, эндоскопически, рентгенологически. Весь обследуемый материал был классифицирован по международной классификации (TNM). У больных преобладала 3 – 4 стадия рака – 96%(29).
Кровь на исследование у пациентов забирали из локтевой вены утром натощак. Для выделения ДНК из лейкоцитов периферической крови был использован метод осаждения ДНК на сорбенте. Исследование полиморфизма генов GSTM1 и GSTT1 проводили методом мультиплексной ПЦР. Продукты амплификации фракционировали в 3%-ном агарозном геле с бромистым этидием в течение 30 мин при напряжении 130 В и визуализировали в УФ-свете. Гомозиготность по нулевым аллелям (0/0) генов GSTT1 и GSTM1 определяли по отсутствию на электрофореграммах фрагментов размером 131 и 114 п.н. соответственно.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием стандартных алгоритмов биометрии, в том числе сравнение частот генотипов в группах больных и здоровых лиц с помощью критерия хи-квадрат Пирсона. Относительный риск (OR – odd ratio, отношение шансов) развития заболевания при определенном генотипе рассчитывался по стандартной формуле OR=a/b*d/c, где a и b – количество человек в контрольной группе, имеющих и не имеющих мутантный генотип; d и с – количество человек в контрольной группе, имеющих и не имеющих мутантный генотип. OR указан с 95%-ным доверительным интервалом.
Проведено исследование нулевых аллелей глутатионтрансфераз GSTT1 и GSTM1 у больных мелкоклеточным раком легкого. Показано, что у больных, имеющих мелкоклеточную форму рака легкого, генотип GSTT1 0/0 встречается в 4,4 раза чаще, чем в группе контроля (в 73,3 и 16,6%, соответственно) (?2=17,24; Р=0,00003). Относительный риск развития мелкоклеточного рака легкого у здоровых носителей данного генотипа составил 13,75 (ORCI95%=13,75; 3,40-60,40). Для гена GSTM1 значимых различий в распределении частоты генотипов для данной гистологической формы рака легкого не выявлено.
Таким образом, в результате исследования полиморфизма генов II фазы биотрасформации ксенобиотиков GSTM1 и GSTT1 выявлено, что полиморфный генотип GSTT1 может иметь высокую рисковую значимость для формирования мелкоклеточного рака легкого.
