Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 68-й научной итоговой студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 20-22 апреля, 2009 год); под реакцией академика РАМН В.В. Новицкого, член. корр. РАМН Л.М. Огородовой
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (1,5 мб)
На сегодняшний день герпетическая инфекция (ГИ) человека самая распространенная и неконтролируемая. Важнейшим свойством герпесвирусов является способность вызывать у инфицированных ими хозяев пожизненную персистирующую инфекцию с периодической реактивацией. Вирусы герпеса, характеризуемые полиорганным тропизмом, могут вызывать не только острые, клинически выраженные формы, но и бессимптомные, латентные формы инфекции. Последние обусловлены способностью герпесвирусов к длительной персистенции в организме. Эти вирусы обладают иммуносупрессорным действием, подавляя как клеточный, так и гуморальный иммунные ответы в организме.
К другим проявлениям вторичной иммунной недостаточности относятся аллергические заболевания. Среди причин увеличения частоты аллергических заболеваний называют не только генетические, но и иммунодефициты, связанные с хроническими вирусными инфекциями [1].
Ключевую роль в развитии противовирусного иммунитета играют врожденные механизмы защиты: интерферон альфа (ИФα), натуральные киллеры(NK), Toll-like рецепторы (TLR-2,4,7,8,9). Адаптивный (системный) противовирусный иммунитет связан с активностью IL-12 и ИФγ, СD8-лимфоцитов. Секретируемые преимущественно Тh1-лимфоцитами IL-2 и ИФγ обеспечивают в организме высокую активность «вспомогательных» клеток и эффекторных цитотоксических СD8- лимфоцитов, поддерживая тем самым клеточный иммунный ответ.
Известный механизм контроля активности клеточного и гуморального ответов связан с антагонизмом ИФγ и IL4. Перераспределение активности в сторону гуморального иммунного ответа на вирусный антиген связано с клинической хронизацией вирусного процесса и делает неэффективным контроль цитотоксических лимфоцитов за апоптозом вирус-поврежденных клеток или активностью жизненного цикла вируса. При этом, IL-4 участвует в регуляции гуморального ответа, включает переключение на синтез антител с Ig M на IgG 4, 3, 2 и IgE. При этом IgE и IgG4 – связаны с развитием атопии [2]. В результате этого прослеживается связь хронического течения ГИ и формирование аллергии.
Цель исследования – сопоставить клинико-иммунологические характеристики инфекционного процесса и генетические особенности полиморфизма генов цитокинов в 2-х моделях: «инфекционной» и «аллергической». В «инфекционную» модель включались волонтеры с отсутствием фоновых заболеваний (иные инфекции, кроме герпетических; аллергии; аутоиммунные и паразитологические заболевания). «Аллергическую» модель представили пациенты с ГИ и установленным диагнозом «атопическая бронхиальная астма (АБА)», согласно критериям GINA (2005 г.).
В программу исследования вошли 179 волонтеров, в возрасте от 18 до 60 лет, проживающие на территории г. Томска. 1 модель – «инфекционная» включала 90 человек, модель 2 – «аллергическая» – 89 человек с бронхиальной астмой. Собирались инфекционный и аллергологический анамнезы жизни. Всем участникам исследования проводилось аллерготестирование панелями неинфекционных аллергенов, утвержденным методом скарификаций in vivo. Дополнительным материалом исследования служила венозная кровь, взятая из локтевой вены утром натощак. На момент забора крови у пациентов не было клинических проявлений ГИ и обострений, связанных с приступами БА. Определялись уровни общего IgЕ, а также специфических титров Ig M и IgG к HSV I и HSV II методом ИФА. Исследование полиморфных участков генов IL4RA (rs1805010), IL12B (rs3212227) и INF (rs2069705) осуществляли с использованием рестрикционного анализа продуктов амплификации специфических участков генома методом ПЦР, с применением специфических праймеров.
Статистическая обработка результатов проводилась в программе SPSS 11.5. Сравнение частот встречаемости признаков и попарное сравнение групп проводилось с использованием критерия χ2 Пирсона с поправкой Йетса на непрерывность и/или точный тест Фишера. Сравнение количества IgE в группах пациентов с разными типами течения ГИ проводилось с помощью непараметрического критерия Краскала-Уоллиса, попарное сравнение групп – с помощью критерия Манна-Уитни с поправкой Бонферрони.
По клиническим проявлениям герпетических инфекций были выделены 3 варианта: латентное течение – волонтеры имели позитивные титры АТ к HSV1/HSV2 типов, но отрицали клинические проявления ГИ когда-либо в жизни; эпизодическое течение – клинические проявления ГИ в основном с локализацией на коже и слизистых до 4х раз в год, без обращений к врачу и специфического лечения; рецидивирующее течение – ГИ более 4 раз в год, прием специфического лечения во время обострений (ацикловир).
В целом, по различиям клинического течения ГИ в исследуемых моделях 1 и 2 были установлены статистически значимые различия с p<0,01. У пациентов модели 2 снижена частота латентного течения, в основном пациенты с БА имеют эпизодическое и рецидивирующее течение ГИ.
Распределение генотипов А/А и А/С гена IL12B значительно различались между 2-мя моделями при латентной форме течения ГИ (p < 0,05). Для модели 1 – анализ полиморфных вариантов гена IL12B показал преобладание генотипа А/А при латентном (76,0 %) и рецидивирующем (78,6 %) течение ГИ. В то время как для модели 2 более распространенным являлся генотип А/С гена IL12B при латентном (53,1 %) течении ГИ. При этом рецидивирующее течение ГИ у пациентов с БА ассоциировано с генотипом С/С гена IL12В (p< 0,05).
Установлено достоверное различие по встречаемости генотипов V/V гена IL4RA при латентном течении в 1 и 2 модели (p<0,01). При латентном течении ГИ генотип V/V встречался в 56,3% в модели 2. Для 1 модели более характерным являлся генотип I/I (25,5%). Стоит отметить, что среди пациентов с БА данного генотипа не встречалось. Эпизодическое и рецидивирующее течение ГИ во 2 модели ассоциируется с вариантом V/V гена IL4RA (70,4% и 63,2% соответственно).
Анализ полиморфизма генов ИФγ выявил преобладание варианта T/C как в 1, так и во 2 модели при всех типах течения ГИ. На наш взгляд, данные требуют дальнейшего анализа. Во 2 модели установлена связь значений IgE с генотипами V/V полиморфного варианта гена IL4RA и A/C – IL12B. При этом в 1 модели эпизодическое течение ГИ сопровождается повышением средних значений IgE, что достоверно связано с аллелями A/C и C/C гена IL12В (р<0,05) по сравнению с латентным течением (в котором IL12В представлен А/ А). На основании полученных данных можно сделать заключение о преобладании генотипа А/А полиморфизма гена IL12B, в группах, различающихся по латенции ГИ, так и вероятным контролем против развития аллергической сенсибилизации при проявлении ГИ. Полиморфный вариант гена IL4RA во 2 модели, по-видимому, влияет на течение аллергического заболевания и также определяет эпизодический характер течения ГИ.
В настоящее время проводится статистический анализ наличия латентной сенсибилизации к неинфекционным аллергенам в 1 модели и оценка особенностей сенсибилизации от полиморфизма генов IL12B и IL4RA по 2 модели; разрабатываются модели прогноза течения ГИ.
Список литературы:
1. Бурдина, Л. В. Рецидивирующая инфекция : Автореф… дис. канд. мед. наук / Л. В. Бурдина. – Пермь, 2007 –12 с.
2. The IL12B untranslayed region DNA polymorphism is not associated with early-onset type 1 diabetes / R. M. McCormack, A. P. Maxwell, D. J. Carson et al. // Genes and immunity. – 2002. – N 3. P. 433 – 435.
