Введение. ХОБЛ - широко распространенное заболевание респираторного тракта, имеющее в основе мультифакторную природу. При изучении ХОБЛ длительное время считали, что ведущими факторами риска развития данной патологии являются экзогенные, такие как курение, профессиональные вредности и др. Однако, в последние несколько лет ведущее значение в предрасположенности к данному заболеванию отводится генетическим факторам [1]. Одна из патологий, часто проявляющееся клиникой ХОБЛ, является альфа1-антитрипсиновая недостаточность (ААТН) - аутосомно-рецессивное заболевание, обусловленное мутацией в гене PI, приводящее к снижению уровня альфа 1-антитрипсина [2]. Также среди возможных кандидатных генов подверженности к ХОБЛ внимание исследователей привлекает группа генов синтаз оксида азота (NOS): нейрональная (nNOS), индуцибельная (iNOS) и эндотелиальная (eNOS). На первом этапе была исследована распространенность VNTR полиморфизм гена eNOS (NOS3), который насчитывает два аллеля, состоящих из двух аллелей А и В.
Целью данного исследования было: 1. Выявить случаи ААТН у больных ХОБЛ; 2. Изучить распространение VNTR полиморфизма гена эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3) у пациентов, страдающих ХОБЛ.
Материалы и методы. Было проведено исследование 52 больных ХОБЛ, средний возраст которых составил 56,1 ± 14,5. Из группы больных 65% имели стаж курения, индекс курения пачка/лет в среднем составил 62,5 ± 37,9. Контакт с профессиональными вредностями отмечался у 62% больных. Контрольную группу составили 122 индивида, сходные с больными по возрасту, анамнезу курения, времени контакта с профессиональными вредностями и не имеющих бронхолегочной патологии. Снижение уровня сывороточного ААТ было отмечено у 46 % больных и не отмечалось в контрольной выборке. Изучение полиморфных вариантов исследуемых генов проводили с помощью амплификации соответствующих участков генома методом ПЦР, используя структуру праймеров и параметры температурных циклов, описанных в геномной базе данных (GDB) и литературе. Генотипирование полиморфизмов осуществляли путем ПДРФ-анализа: продукты амплификации обрабатывали соответствующими рестриктазами с последующим разделением в 3% агарозном геле. Фрагменты ДНК окрашивали бромистым этидием и визуализировали в УФ-свете с применением системы гель-документирования "UV-VIS Imager-II" (США).
Результаты и обсуждение. С целью выявления случаев ААТН было проведено генотипирование двух наиболее распространенных дефицитных аллелей гена PI (S и Z). В результате исследования было выявлено 2 гетерозиготы MS (4,08%) у больных ХОБЛ, т.о. частота дефицитного аллеля S в данной группе составила 0,01.
При исследовании распространенности VNTR полиморфизм гена NOS3 в группе больных, в отличие от контрольной, было показано отклонение распределения частот аллелей и генотипов от равновесия Харди-Вайнберга (%2=7,11, р<0,05). Возможно, это связано с тем, что группа больных не является случайной популяционной выборкой, а отобрана на основании четких диагностических критериев ХОБЛ.