Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра патофизиологии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.
Актуальность: решающим моментом в формировании специфического иммунного ответа при туберкулезной инфекции является активация наивных Т-лимфоцитов (Th0) в направлении хелперов типа 1 (Th1) [1]. Критериями активности Th1-ответа считают продукцию интерлейкина (IL)-2 и стимулированную данным цитокином пролиферацию T-клеток. В ранее проведенных исследованиях была зарегистрирована гипопродукция IL-2 мононуклеарными лейкоцитами крови in vitro у больных инфильтративным туберкулезом легких (ИТЛ) [2]. В качестве причин, приводящих к недостаточной секреции IL-2, рассматривают нарушения, возникающие в процессе межклеточной кооперации, которая осуществляется путем как непосредственного контактного взаимодействия клеток, с участием их поверхностных молекул, так и посредством цитокинов [3]. IL-12 отводят роль основного регуляторного цитокина, «ориентирующего» наивные Т-клетки в направлении Th1-ответа на начальных этапах формирования специфического иммунитета [4]. Известно, что IL-12 в ряде случаев выступает в роли заместителя IL-2, обеспечивая тем самым клональную пролиферацию Th0 в Th1. Следовательно, нарушение секреции IL-12 антигенпрезентирующими клетками может являться причиной, приводящей к снижению продукции лимфоцитарного IL-2. В настоящее время высказывается предположение о связи генетически детерминированной гипер- или гипопродукции цитокинов с качеством иммунного ответа на микобактерии туберкулеза (МБТ) [5].
Цель: установить роль аллельного полиморфизма промоторного региона A-1188C гена IL-12B в дизрегуляции Th1-ответа при инфильтративном туберкулезе легких.
Материалы и методы: в программу обследования вошли 78 пациентов (46 мужчин и 32 женщины) с впервые выявленным ИТЛ в возрасте от 19 до 55 лет. Обследование пациентов проводили до начала специфической противотуберкулезной химиотерапии. Контрольную группу составили 82 здоровых донора с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту. Материалом исследования служила периферическая кровь, а также выделенные из нее с помощью градиентного центрифугирования мононуклеарные лейкоциты. Культивирование клеток проводили в полной питательной среде. Оценку пролиферативной способности лимфоцитов исследовали с помощью МТТ-теста, используя в качестве стимулятора лимфоцитов рекомбинантный IL-2 в дозе 5 нг/мл. Секрецию IL-2 и IL-12 in vitro оценивали методом твердофазного иммуноферментного анализа. Оценку аллельного полиморфизма промоторного региона А-1188С гена IL12B проводили с использованием полимеразной цепной реакции в сочетании с рестрикционным анализом. Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием стандартных алгоритмов биометрии. Обработка результатов генетических исследований осуществлялась с использованием критерия отношения шансов OR с расчетом для него 95% доверительного интервала.
Результаты: проведенное исследование показало, что базальная секреция мононуклеарными клетками IL-2 и IL-12 у больных с ИТЛ была ниже, чем у здоровых лиц в 1,3 и 2,2 раза соответственно. При стимуляции клеточных культур in vitro рекомбинантным IL-2 было зарегистрировано статистически достоверное снижение пролиферативного ответа у больных туберкулезом в 1,3 раза по сравнению с нормой и, напротив, увеличение в 1,2 раза по отношению к уровню спонтанной бласттрансформации. В ходе иммуногенетического исследования было выявлено, что среди больных туберкулезом статистически значимо чаще встречались гетерозиготы с генотипом АС (50%) промоторного региона А-1188С гена IL12B, с этим же генотипом был связан и риск развития туберкулезного процесса (OR=1,65, р=0,012). Протективным эффектом обладал генотип СС (OR=0,5) полиморфного участка A-1188C гена IL12В. Проведенные нами исследования ассоциированности генотипа с уровнем продукции IL-12 показали, что генотип СС гена IL12B чаще выявляется среди индивидов с высоким уровнем продукции цитокина, однако статистически значимой зависимости продукции этого цитокина от генотипа промоторного региона А-1188С гена IL12B обнаружено не было.
Выводы: результаты проведенного исследования позволяют заключить, что течение ИТЛ сопровождается снижением продукции IL-2 и IL-12 мононуклеарными лимфоцитами периферической крови и угнетением пролиферативной способности Т-лимфоцитов. Низкий уровень секреции IL-12 ассоциирован с генотипом АС полиморфного участка A-1188C гена IL12В.
Список литературы:
1. Кетлинский, С. А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета / С. А. Кетлинский // Иммунология. – 2002. – № 2. – C. 77-79.
2. Аллельный полиморфизм генов цитокинов при туберкулезе легких / И. О. Наследникова, О. И. Уразова, В. В. Новицкий и др. // Бюл. эксп. биол. и мед. – 2009. – № 8. – С. 138.
3. Ивашкин, В. Т. Основные понятия и положения фундаментальной иммунологии / В. Т. Ивашкин // РЖГГК. – 2008. – № 4. – С. 4-13.
4. Симбирцев, А. С. Роль цитокинов в регуляции физиологических функций иммунной системы / А. С. Симбирцев // Физиология и патология иммунной системы. – 2004. – № 10. – С. 3-10.
5. Роль полиморфизма генов цитокинов в регуляции воспаления и иммунитета / А. С. Симбирцев, А. Ю. Громова, А. В. Рыдловская // Медицинский академический журнал. – 2006. – № 1. – С. 144-149.
|
