Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Кафедра патофизиологии

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 71-й итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 14-16 мая 2012 г.), под ред. В. В. Новицкого, Н.В. Рязанцевой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2012. − 335 с. 

Скачать сборник (MS Word, 1 мб)

Скачать программу конференции  

Актуальность. Вторичная иммунологическая недостаточность (ВИН), лежащая в основе туберкулеза легких, определяет характер течения заболевания и существенно влияет на эффективность специфической противотуберкулезной химиотерапии. В большинстве случаев, основным критерием ВИН при туберкулезе легких является гипопродукция интерлейкина 2 (IL-2) и, как следствие, снижение пролиферативной активности Т-хелперных клонов типа 1 (Th1), абсолютно необходимых для формирования эффективной противотуберкулезной защиты. Среди причин, приводящих к недостаточной секреции IL-2, рассматривают нарушения процессов межклеточной кооперации, осуществляющейся путем прямого взаимодействия МНС-пептидного комплекса антигенпрезентирующих клеток с Т-клеточным рецептором на лимфоцитах при участии корецептора CD4 (первый активационный сигнал) и костимулирующих молекул CD28 на Т-лимфоцитах и СD80/СD86 на APC (второй сигнал). При наличии обоих сигналов Т-лимфоциты подвергаются активации, дифференцировке, пролиферации и синтезируют цитокины, в частности IL-2. В отсутствие костимуляторного сигнала Т-лимфоциты теряют способность эффективно «отвечать» на антигенные стимулы и подвергаются апоптозу.

Цель. Выявить нарушения CD3/CD28-индуцированной продукции IL-2 в Т-лимфоцитах крови при различных клинико-патогенетических вариантах туберкулеза легких.

Материалы и методы. Обследовано 56 пациентов (43 мужчины и 13 женщин) с впервые выявленным лекарственно-устойчивым (ЛУТЛ) и лекарственно-чувствительным (ЛЧТЛ) туберкулёзом лёгких в возрасте от 20 до 55 лет. Обследование проводилось в разгар заболевания до начала специфической противотуберкулезной химиотерапии. Группу контроля составили 21 практически здоровых донора с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту. Материалом исследования служили лимфоциты венозной крови, взятой утром натощак из локтевой вены. Выделение клеток осуществлялось методом центрифугирования на градиенте плотности фиколл-урографина (ρ=1,077 г/см³). Культивирование клеток проводили в полной питательной среде. В качестве специфических индукторов лимфоцитов использовали анти-CD3 (1мкг/мл), анти-CD4 (4 мкг/мл) и блокатор внутриклеточного транспорта моненсин (5мкг/мл). Исследование лимфоцитов, содержащих IL-2, и поверхностных маркеров проводили методом проточной цитофлюориметрии. Исследование уровня спонтанную и CD3/CD28-индуцированной продукции IL-2 проводили с использованием иммуноферментного анализа. Статистическую обработку полученных результатов проводили при помощи программного приложения BD Cell CellQuest for Mac OS® X и программы Statistica for Windows Version 6.0.

Результаты. В ходе исследования было установлено резкое снижение спонтанной и стимулированной продукции IL-2 у больных ЛУТЛ относительно контрольных значений. ЛЧТЛ характеризовался нормальным уровнем базальной секреции и снижением  IL-2-продукции при добавлении стимулятора. При этом было отмечено уменьшение числа IL-2-позитивных клеток, несущих поверхностные (CD3, CD28) маркеры при обоих вариантах туберкулезного процесса, наиболее выраженное при ЛУТЛ. В тоже время было зарегистрировано значительное увеличение числа CD3⁺CD28^-IL-2^- лимфоцитов (р<0,001) и снижение количества CD3⁺CD28⁺IL-2^- клеток (р<0,01) у больных с ЛУТЛ как относительно контрольных значений, так и по сравнению с ЛЧТЛ, где данные показатели не отличались от нормы.

Выводы. ЛУТЛ до лечения сопровождается снижением продукции IL-2 на фоне уменьшения количества CD3⁺CD28⁺IL-2⁺, CD3⁺CD28⁺IL-2^- лимфоцитов и увеличения числа CD3⁺CD28^-IL-2^- клеток.