Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.

 

Скачать сборник (формат MS Word, 7,3 мб)

Посмотреть основную информацию о сборнике, обложку и т.д.

 

Актуальность: В клеточный состав гранулемы, формирующейся в легочной ткани при внедрении M. tuberculosis, наряду с макрофагами и лимфоцитами, входят также и эозинофильные гранулоциты. В периферической крови у больных туберкулезом легких (ТЛ) также нередко регистрируется избыточное количество эозинофилов [1]. Многие зарубежные исследователи, ориентированные на новые знания о функциональных возможностях эозинофилов, склонны рассматривать эти уникальные клетки в качестве полноценных участников врожденного и адаптивного иммунитета [2]. Известно, что эозинофильные лейкоциты секретируют свыше 30 цитокинов, включая медиаторы с провоспалительной активностью (интерлейкин (IL) 2, IL-12, интерферон γ (IFN-γ), фактор некроза опухолей α (TNF-α)) и противовоспалительными свойствами (IL-4, IL-5, IL-10, IL-13, трансформирующий фактор роста β (TGF-β)), участвующие в реализации соответственно Th1- и Th2-опосредованного иммунного ответа [3]. В результате между клетками иммунной системы и эозинофилами формируется взаимонаправленность эффектов, обусловленная как иммуномодулирующим действием иммунокомпетентных клеток, так и способностью лейкоцитов эозинофильного ряда активировать лимфоциты и моноциты, и вызывать поляризацию иммунного ответа, направляя его по одному из вариантов развития: клеточному или гуморальному.

Учитывая высокую секреторную активность эозинофильных гранулоцитов, логично предположить, что эти клетки могут принимать активное участие в регуляции реакций специфической и неспецифической резистентности макроорганизма при заражении M. tuberculosis.

Цель: исследовать цитокинсекретирующую способность эозинофилов крови при ТЛ.
Задачи:

1. Определить особенности продукции цитокинов с провоспалительной (IL-2 и TNF-α) и противовоспалительной (IL-5) активностью эозинофилами периферической крови in vitro у больных ТЛ, сопровождающимся эозинофилией  и без эозинофилии.
2. Установить  общие закономерности и особенности изменений иммунорегуляторных свойств эозинофильных гранулоцитов при ТЛ.

Материал и методы: В программу исследования вошли 35 больных (мужчин и женщин) с впервые выявленным распространенным деструктивным ТЛ: 16 пациентов с ТЛ, сопровождающимся эозинофилией (абсолютное число эозинофилов составило 0,85±0,01 Г/л, относительное - 8,0±0,46 %) и 19 больных ТЛ без эозинофилии (абсолютное число эозинофилов - 0,29±0,01 Г/л, относительное - 3,0±0,30 %) в возрасте от 18 до 55 лет. Группу сравнения (контроль) составили 12 здоровых доноров с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту. Набор материала для исследования у больных ТЛ во всех случаях проводили до начала специфической противотуберкулезной терапии. Материалом исследования служила венозная кровь. Количественное определение цитокинов проводили в супернатантах культуральных суспензий эозинофильных клеток, предварительно выделенных на прерывистом градиенте плотности Percoll (p=1,133 г/л) («Sigma Life Science», США) с применением твердофазного иммуноферментного «сэндвичевого» метода (ELISA). Для стимуляции цитокинпродуцирующей активности эозинофилов в пробы вносили вакцинный штамм BCG в дозе 50 мкг/мл (ФГУП «НПО Микроген»). Результаты исследования обрабатывали с использованием стандартного пакета программ Statistica 6.0.

Результаты. Ключевую роль в патогенезе  туберкулезной инфекции играют медиаторы иммунного Th1 ответа, в частности IL-2 и TNF-α, оказывающие положительное влияние на течение инфекционного процесса. Напротив, ингибиторами генерации Th1-лимфоцитов, угнетающих их активность и препятствующих формированию гранулемы, является IL-5 – представитель группы противовоспалительных цитокинов [4]. В ходе проведенного нами исследования была установлена базальная гипопродукция IL-2 на фоне высокого уровня спонтанной секреции TNF-α эозинофильными гранулоцитами in vitro у всех обследованных больных вне зависимости от наличия у них эозинофильной реакции крови. В свою очередь, показатели базальной и BCG-индуцированной продукции IL-5 достоверно увеличивались только у пациентов с ТЛ, сопровождающимся эозинофилией. Тот факт, что наиболее выраженные изменения секреции IL-5 и TNF-α были зарегистрированы при туберкулезной инфекции, ассоциированной с эозинофилией, согласуется с данными литературы, характеризующими способность изученных цитокинов не только регулировать иммунный ответ, но и опосредовать длительное пребывание эозинофилов в периферической крови [2, 5].

В целом, полученные нами данные указывают на способность эозинофильных клеток активировать как клеточные (за счет продукции IL-2, TNF-α), так и гуморальные (за счет продукции IL-5) реакции иммунитета, и, тем самым, вносить вклад в общий цитокиновый дисбаланс, формирующийся при туберкулезной инфекции. Дальнейшее изучение расширенного спектра цитокинов, продуцируемых эозинофилами и играющих ключевую роль в иммунопатогенезе ТЛ, позволит с большей уверенностью судить об иммунорегуляторной активности эозинофильных клеток, способных вызывать поляризацию иммунного ответа по клеточному или гуморальному пути и соответственно способствовать или препятствовать эффективному ответу макроорганизма на воздействие M. tuberculosis.

Выводы:

1. У пациентов с ТЛ вне зависимости от наличия эозинофильной реакции  крови  установлено снижение спонтанной продукции IL-2,на фоне повышения базальной секреции TNF-α эозинофилами периферической крови in vitro.
2. У больных ТЛ с эозинофилией уровень базальной и BCG-индуцированной продукции IL-5 и TNF-α эозинофильными гранулоцитами in vitro выше, чем у больных ТЛ без эозинофилии.