Волгоградский государственный педагогический университет
Эта работа опубликована в сборнике научных трудов «Современный мир, природа и человек» (2009 год, Том 1, выпуск 1), под редакцией проф., д.б.н. Ильинских Н.Н.
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (6 мб)
Мочевина занимает одно из центральных мест в обмене веществ человека и изучение ее количественного содержания в различных биологических средах является весьма актуальным. В связи с этим постоянно идет поиск новых методов анализа мочевины. Отметим, что достаточно хорошо исследованы в отношении содержания мочевины такие жидкости, как кровь, моча, и эти исследования широко применяются в клинической практике.
Имеются также данные о выделении мочевины кожей у спортсменов в условиях среднегорья [1-3].
Целью настоящего исследования явилось изучение количественного содержания мочевины в кожном экскрете в зависимости от различных патологий, в частности, от заболеваний почек и мочевыводящих путей.
Для количественного определения мочевины мы использовали тиосемикарбазидную модификацию реакции Фирона [4]. Суть этой реакции состоит в следующем. Мочевина вступает в реакцию с диметилглиоксимом (реактивом Чугаева) с образованием шестичленного гетероцикла, который взаимодействует с тиосемикарбазидом и в результате образуется аддукт малиново-розовой окраски. Измеряя оптическую плотность полученного в результате модифицированной реакции Фирона окрашенного раствора, рассчитывали концентрацию мочевины с использованием калибровочной кривой. Эту кривую строили по разведениям 0,001 М водного раствора мочевины [5].
Кожный экскрет для анализа брали с тыльной стороны ладони при помощи полосок фильтровальной бумаги определенного размера, предварительно смоченных в дистиллированной воде [6]. Полоски с помощью пинцета прикладывали на поверхность кожи, выдерживали в течение 3-5 минут до подсыхания.
Далее полоски с кожным экскретом помещали в химический стакан, в который с помощью бюретки отмеряли по 10 мл дистиллированной воды. Через 10 минут в пробирку приливали 3 мл исследуемого экскрета, добавляли 0,6 мл 1%-ного спиртового раствора диметилглиоксима и 3 мл 0,025%-ного раствора тиосемикарбазида в 25%-ной серной кислоте. Всю смесь тщательно перемешивали и ставили в затемненную, кипящую водяную баню на 20 минут.
Затем пробы охлаждали проточной водой до комнатной температуры и колориметрировали на фотоэлектроколориметре КФК-2 в кюветах с толщиной слоя 1 см при 490 нм против контроля на использованные для количественного анализа реактивы.
Нами были обследованы 30 пациентов стационарного нефрологического отделения, которые условно можно разделить на две возрастные группы. Среди этих обследуемых первую группу составили 13 человек в возрасте от трех до четырнадцати лет; вторую группу – 17 реципиентов в возрасте от двадцати до семидесяти лет.
У всех обследуемых диагностированы либо острые (в первой возрастной группе), либо хронические (во второй возрастной группе) заболевания почек и мочевыводящих путей: острый цистит, острый гломерулонефрит, инфекция мочевыводящих путей, мочекаменная болезнь-почечная колика, хронический пиелонефрит.
Исследования показали, что в кожных выделениях больных первой возрастной группы количество мочевины было в 5-6 раз выше, чем в кожном экскрете здоровых людей того же возраста. Статистическая обработка данных выявила достоверность указанных различий (коэффициент Стьюдента 4,5).
Количественное содержание экскретируемой кожей мочевины у больных второй возрастной группы превышало норму в 7-8 раз, коэффициент Стьюдента в этом случае составил 5,6, что указывает на несомненную достоверность выявленных различий.
Полученные экспериментальные данные свидетельствуют об объективной взаимосвязи между процессом экскреции мочевины кожей и патологией органов выделительной системы. Возможно, что заболевания почек и мочевыводящих путей сопряжены с усилением продукции аммиака и мочевины в организме, что и является следствием повышенного содержания последней в кожном экскрете.
Важно заметить, что эти данные получены с помощью неинвазивных методов обследования больных, и их можно рекомендовать для ранней диагностики заболеваний почек и мочевыводящих путей различной этиологии.
Литература.
1. Храмов, В.А. Кожные тесты, отражающие изменения азотистого обмена у спортсменов в условиях физической нагрузки / В.А. Храмов, З.Ю. Уртенова // Теория и практика физ. культуры. 1987. № 8. С. 20-21.
2. Храмов, В.А. Экскреция продуктов азотистого обмена при физических нагрузках в условиях среднегорья / В.А. Храмов, З.Ю. Уртенова // Теория и практика физ. культуры. 1995. № 10. С. 58-59.
3. Уртенова, З.Ю. Влияние физической нагрузки и условий внешней среды на кожную экскрецию азотистых метаболитов / З.Ю. Уртенова // Дис. … канд. биол. наук – Волгоград: 1994.
4. Храмов, В.А. Тиосемикарбазидная модификация реакции Фирона и ее использование для количественного определения мочевины / В.А. Храмов, Ю.В. Галаев // Вопр. мед. химии. 1969. Вып. 4. С. 435-438.
5. Савин, Г.А. Количественное определение мочевины в кожном экскрете / Г.А. Савин, Е.Ю. Гурина // Материалы международной научно-технической конференции «Наука и образование-2006». Мурманск, МГТУ (4-12 апреля 2006 г.) – Мурманск: 2006. С. 612-613.
6. Гурина, Е.Ю. Методы забора проб кожного экскрета / Е.Ю. Гурина, Г.А. Савин, В.А. Храмов // Естествознание и гуманизм. Сборник научных работ – Томск: «Вайар», 2005. Т. 2. № 5. С. 91.
|