Тверская государственная медицинская академия. МУЗ родильный дом №2 (г.Тверь)

Эта статья опубликована сборнике научных трудов "Проблемы и перспективы современной науки" с материалами Четвертой Международной Телеконференции "Фундаментальные науки и практика" - Том 3 - №1. - Томск - 2011.

 
Фетоплацентарная недостаточность (ФПН), согласно исследованиям, выполненным в последние десятилетия, лежит в основе многих видов тяжелых акушерских осложнений, приводящих к неблагоприятному исходу для плода. Частота выявляемости ФПН в настоящее время достигает 60-70% [1, 2]. Данная патология диагностируется при 69% мертворождений, является причиной 46% перинатальной смертности и 40% заболеваемости новорожденных. ФПН представляет собой симптомокомплекс, при котором возникают различные нарушения как со стороны плаценты, так и со стороны плода вследствие различных заболеваний и акушерских осложнений. Разнообразие вариантов проявления ФПН, частота и тяжесть осложнений для беременной и плода, преобладающее нарушение той или иной функции плаценты зависят от срока беременности, силы, длительности и характера воздействия повреждающих факторов, а также от стадии развития плода и плаценты, степени выраженности компенсаторно-приспособительных возможностей системы мать-плацента-плод  [3, 4].
ФПН может развиваться под влиянием различных причин. Нарушения формирования и функции плаценты могут быть обусловлены заболеваниями сердца и сосудистой системы беременной, патологией внутренних органов, хронической инфекцией, заболеваниями эндокринной системы и целым рядом других патологических состояний. Важную роль в развитии ФПН играют различные инфекционные заболевания, особенно протекающие в острой форме или обостряющиеся во время беременности.
Для диагностики ФПН используется определение  гормонов  фетоплацентарной  системы, выявление гипотрофии плода по данным ультразвуковой фетометрии,  ультразвуковое исследование плаценты, выявление признаков гипоксии плода по данным кардиотокографии,  допплерометрии,  амниоскопии. Своевременно выявленная патология плаценты позволяет разработать рациональную тактику ведения беременности. Послеродовая диагностика состояния плаценты проводится, в основном, с помощью морфометрических и морфологических методов. Она позволяет достоверно оценить степень ФПН, правильность и эффективность выбранной тактики лечения. Вместе с тем, данные методы исследования часто не дают возможности выявить причины нарушения кровоснабжения плода. Это становится принципиально важным в случае развития ФПН инфекционного генеза. Наличие у беременной очагов инфекции, особенно «скрытой», является фактором риска для развития различных патологических состояний плода и новорожденного. Причем, наряду с острым течением инфекции у плода может наблюдаться длительная персистенция возбудителя с формированием латентного или медленно текущего хронического инфекционного процесса.  Заключения о частоте инфекционной перинатальной патологии выносятся чаще всего ретроспективно, на основании выявления больных детей. Тотального скрининга на перинатально значимые инфекции нет ни в одной стране мира. Искажению показателей инфицированности, заболеваемости, риска вертикальной передачи возбудителей способствует и отсутствие микробиологического мониторинга всех плодов при прерванной беременности, мертворожденных, плацент во всех случаях проявления патологии во время беременности и наличия урогенитальной инфекции в анамнезе [5].
В последнее время внимание научных работников и практических врачей привлекают относительно простые в исполнении и применении методы исследования, которые не требуют дорогостоящих реактивов и оборудования. Одним из них является кристалломорфология. В результате изучения особенностей кристаллизации биологических объектов человека,  таких как физиологические жидкости (моча, ликвор, слюна), либо гомогенатов исследуемых тканей, установлено, что они могут служить объективными показателями функционального состояния организма [6, 7]. Принцип метода основан на том, что изменение концентрации и (или) химического состава биологической пробы приводит к изменению габитуса растущих из ее раствора кристаллов.  Известно, что метод кристаллизации уже давно используется в акушерстве с целью выявления «подтекания» околоплодных вод в отделяемом из влагалища и носит название симптома папоротника, или феномена арборизации. Он основан на способности шеечной слизи при высушивании образовывать кристаллы. Причиной кристаллизации является изменение физико-химических свойств слизи под действием гормонов, содержащихся в околоплодных водах. Отделяемое из влагалища наносят, на предметное стекло и высушивают, оценку кристаллизации производят при микроскопии под малым увеличением. При «подтекании» околоплодных вод на стекле виден рисунок, похожий на листья папоротника.
Цель настоящего исследования – выявить возможность использования метода кристалломорфологии для диагностики фетоплацентарной недостаточности различного генеза. В качестве материала для исследований брали амниотическую жидкость, взятую во время родов.  Женщин с ФПН, у которых брали материал для исследований, распределили на две группы: 1-я группа - беременные с артериальной гипертензией, 2-я группа - женщины с урогенитальными инфекциями в анамнезе. 3-я группа -  группа сравнения – ее составили женщины с нормально протекающей беременностью. Минимальное количество проб (20) было в группе сравнения.
Равные по объему жидкости выливали в чашки Петри и оставляли при температуре 180 в течение 10-12 часов на строго горизонтальной поверхности до полного высыхания. С целью сопоставления кристалломорфологических картин кристаллизацию проводили тремя способами:
1. Методом высушивания кристаллизовали амниотическую жидкость, взятую у здоровых женщин и беременных с ФПН, вызванной гипертензией, урогенитальной инфекцией.
2. Кристаллизовали спиртовой раствор нингидрина, который использовали в качестве кристаллообразующего вещества.
3. Используя метод тезиографии (изучение форм кристаллов, полученных при действии кристаллообразующего вещества на нативную жидкость), кристаллизовали спиртовой раствор нингидрина с амниотической жидкостью, взятой у женщин с фетоплацентарной недостаточностью и без нее.
Результаты исследований показали, что закристаллизованная методом высушивания амниотическая жидкость, взятая у женщин, беременность которых протекала без осложнений и рожениц с диагнозом ФПН различного генеза,  имела одинаковую форму  кристаллов.  Они представляли собой многочисленные равномерно распределенные по площади чашки Петри одиночные вискеры (формы «листа папоротника») по которым дифференциальная диагностика затруднена.
В процессе кристаллизации спиртового раствора нингидрина выявлялись крупные кристаллы в форме правильных сферолитов с тонкими, длинными лучами. Все лучи имели одинаковую длину и толщину.        
Метод тезиографии, при котором в спиртовой раствор нингидрина добавляли амниотическую жидкость женщин сравниваемых групп, позволил выявить определенные закономерности. В пробах, взятых у женщин с физиологически протекающей беременностью, кристаллы приобретали форму полусферолитов, имели четкие лучи первого и второго порядков. Размеры кристаллов были меньше по сравнению с кристаллами нингидрина. Данная форма выявлялась в подавляющем большинстве проб и была принята нами за норму.
При кристаллизации комплекса нингидрина с амниотической жидкостью, взятой у рожениц, беременность которых осложнялась ФПН, вызванной гипертензией, кристаллы сохраняли форму полусферолитов. Вместе с тем, лучи полусферолитов были нечеткими и  утолщенными, имели разную длину. Кроме того, появлялись лучи второй и третьей генерации. С точки зрения кристаллографии изменение формы кристаллов можно объяснить специфическим изменением химического состава амниотической жидкости при данном виде патологии. Многочисленными исследованиями доказано, что состав околоплодных вод изменяется в зависимости от срока беременности, возможной патологии, факторов среды, так как включает множество химических компонентов, таких как белки, липиды, углеводы, кислород и углекислый газ, электролиты, витамины, различные ферменты, гормоны, факторы свертывания крови, иммуноглобулины. Кроме того, еще в них находятся пушковые волосы, частички первородной смазки, слущенные с кожи чешуйки эпителия, секреты сальных желез плода, капельки жира, которые также изменяют химический состав амниотической жидкости.
Изучение кристалломорфологического рисунка спиртового раствора нингидрина с амниотической жидкостью больных с признаками фетоплацентарной недостаточности и инфекционными заболеваниями мочеполовых путей в анамнезе показало, что кристаллы приобретали иную форму. Они представляли собой ставролиты с малым числом лучей неодинаковой длины и толщины. Как размеры кристаллов, так и их количество было значительно меньше по сравнению с нормой. Основная площадь чашек Петри была заполнена толстым слоем аморфного вещества и не разросшимися кристаллами.
Таким образом, нами выявлены закономерные изменения формы, размеров, степени формирования кристаллов, очевидно вызванные изменением химического состава амниотической жидкости в условиях нормы и патологии, что может быть опробировано в акушерской практике в качестве метода дифференциальной диагностики.

Список литературы:
1.    Володин Н. Н. Показатели смертности и рождаемости в Российской Федерации / Н. Н. Володин // Педиатрия. – 2006. - N 1. – С. 5 - 8.
2.    Сидорова, И. С., Макаров И. О. Клинико-диагностические аспекты фетоплацентарной недостаточности / И. С. Сидорова, И. О. Макаров // М. – МИА. – 2005. - 296 С.
3.    Стрижаков, А. Н., Игнатко И. В., Баев О. Р. Фетоплацентарная недостаточность: патогенез, диагностика, акушерская тактика / А. Н. Стрижаков, И. В. Игнатко, О. Р. Баев //  Матер. 5-го Рос. форума «Мать и дитя». – М. – 2003. – С. 222 – 224.
4.    Пустонина, О. А., Бубнова Н. И., Гуртовой Б. Л., Младковская Т. Б. Клинические, морфологические и цитологические критерии диагностики врожденной инфекции / О. А. Пустонина и др. // Акушерство и гинекология. - 2002. - N1. - C. 13 – 16.
5.    Сидорова, И. С., Макаров И. О., Матвиенко Н. А., Эдокова А. Б., Макарова И. И. Состояние фетоплацентарной системы при высоком риске внутриутробного инфицирования плода / И. С. Сидорова // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - N2. – 2000. С. 5 – 8.
6.    Курбатова, Л. А. Кристаллизация в биологических средах и ее применение в медицине / Л. А. Курбатова // Автореф. на ...к.х.н. – Тверь. – 1995. - 18 С.
7.    Денисов, А. Б. Слюна и слюнные железы / А. Б. Денисов // М. – Изд-во РАМН. – 2006. – 370 С.