Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского

Применение селена для профилактики и лечения различных заболеваний остаётся наиболее актуальным вопросом в современной медицинской практике. В настоящее время широко применяются биологически активные добавки, содержащие неорганический селен, главным образом селенит натрия. В то же время органические соединения селена по сравнению с неорганическими являются менее токсичными, более биодоступными и лучше усваиваемыми живыми организмами [1].
В животноводстве и в птицеводстве ряда регионов России в настоящее время применяется селеноорганический препарат диацетофенонилселенид (ДАФС-25), который позволяет нормализовать деятельность иммунной, антиоксидантной и детоксицирующей систем организма животных и птиц, приводит к увеличению яичной и мясной продукции [2].
Заключение об антиоксидантной роли селена, впервые представленное английским биохимиком А. Диплоком в 1970 г. [3], до настоящего времени остается основополагающим в метаболических функциях соединений селена.
В связи с этим целью исследования явилось изучение антиоксидантного действия селеноорганических препаратов in vivo.
Материалы и методы.
В эксперименте использовали: препарат 1,5-дифенил-3-селенапентандион-1,5 - ДАФС-25 (препарат 1) в концентрации 800 мкг/кг, 1,5-ди-(п-хлорфенил)-3-селенапентандион-1,5 и 1,5-ди-(п-фторфенил)-3-селенапентандион-1,5 - хлорированный и фторированный производные препарата ДАФС-25 (препараты 2 и 3 соответственно) в концентрации 800 мкг/кг и 1,5-ди-(п-нитрофенил)-3-селенапентандион-1,5 - нитропроизводное соединения ДАФС-25 (препарат 4) в концентрации 800 мкг/кг. Препараты 1-4 растворяли в растительном масле. Эксперимент проводили на самцах белых крыс возрастом 6 месяцев и массой 200 г. Каждая группа крыс включала 5 животных. Животных первой группы (контроль) кормили растительным маслом в количестве 50 мкл.  Животных 2-5 групп кормили препаратами 1-4 соответственно в количестве 50 мкл, с дозой 800 мкг/кг. Эксперимент проводили в течение 14 дней.
Сыворотку крови получали из крови, взятой из вены сафена (saphenous vein) [4]. Эритроциты трижды отмывали в физрастворе, затем с использованием фотоэлектроколориметра доводили оптическую плотность эритроцитов до 0,7 [5]. В подготовленной суспензии эритроцитов определяли содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ): малонового диальдегида (МДА) [6] и диеновых конъюгатов (ДК) [7], а также активность ферментов каталазы [5] и супероксиддисмутазы (СОД) [8]. Измерение оптической плотности экспериментальных проб проводили с помощью спектрофотометра «SPECORD UV - VIS», произведенного в Германии. Расчет производили на 1 мл эритроцитов.
Результаты и их обсуждение.
Изучаемые селеноорганические препараты проявляли антиоксидантную активность, что выражалось в уменьшении концентрации продуктов ПОЛ – МДА и ДК, уменьшении активности каталазы, а также в увеличении активности СОД. Антиоксидантной активностью обладали препараты 4 > 2 > 1 (см. таблицу).

Таблица 1. Антиоксидантная активность селеноорганических препаратов in vivo

* - p<0,01

При использовании препаратов 1, 2 и 4 в качестве антиоксидантов in vivo отмечается снижение концентрации продуктов ПОЛ в эритроцитах: МДА на 39,47%, 44,74% и 37,6% соответственно и ДК на 27,52%, 24,8% и 29,91% соответственно. Следует отметить увеличение активности СОД в эритроцитах на 340% при использовании препарата 4 в качестве антиоксиданта  in vivo. Введение per os препарата 2 вызывает увеличение активности СОД в эритроцитах на 43,2%. Антиоксидантная активность препаратов 1,2 и 4 подтверждается снижением активности каталазы in vivo на 42,22%, 35,55% и 44,2% соответственно. Данные показатели достоверно (р < 0,01) отличались от контроля. Соединение 3 демонстрирует прооксидантные свойства, т.к. при его использовании in vivo наблюдается увеличение концентрации продуктов ПОЛ и снижение активности СОД.
Следовательно, наибольшей антиоксидантной активностью из изученных селеноорганических препаратов обладал препарат 4 – нитропроизводное ДАФС-25.

Литература.
1.    Гмошинский И.В., Мазо В.К. Селен в питании: краткий обзор.// Medicina Altera.-1999.-№ 4.-С.18-22.
2.    Древко Б.И., Антипов В.А., Жуков О.И. и др. Средство для лечения и профилактики болезней, вызываемых недостаточностью селена в организме сельскохозяйственных животных и птиц. Пат. № 2051681 РФ // Бюл. изобрет. - 1996. - № 1.
3.    Diplock A.T. Recent studies on the interaction between vitamin E and selenium// Trace element metabolism in animals. Ed. by C.F. Mills. Edinburgh and L.: E. and S. Livingstone, 1970. P. 190-203.
4.    Hem A., Smith A.J. & Solberg P. Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink // Laboratory Animals. 1998. 32: 364-368.
5.    Артюхов В.Г., Наквасина М.А. Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами: Учеб. пособие. – Воронеж: Издательство Воронежского государственного университета, 2000. 296 с.
6.    Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. М.: Медицина, 1977. - С. 66-68.
7.    Стальная И.Д. Метод определения диеновой коньюгации ненасыщенных высших жирных кислот // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. М.: Медицина, 1977. - С. 63-64.
Дубинина Е.Е., Сальникова Л.А., Ефимова Л.Ф.  Активность и изоферментный спектр супероксиддисмутазы  эритроцитов и плазмы крови человека // Лаб. дело. – 1983. – №10. – С. 30-33.