Красноярский Государственный Университет, Институт биофизики СО РАН (г. Красноярск)

Эта работа опубликована в сборнике "НАУКИ О ЧЕЛОВЕКЕ" – Сборник статей молодых ученых и специалистов /Под ред. Л.М. Огородова, Л.В. Капилевич. – Томск, СГМУ.- 2002.-254 с.

Скачать сборник целиком

Одним из направлений в лечении фибропролиферативных заболеваний печени (цирроза), может  быть  разработка  методов   подавления  активности  фибробластов   с  одновременной

стимуляцией пролиферативной активности гепатоцитов. Возможным подходом к решению данной проблемы на наш взгляд является применение адреномиметиков. Известно, что катехоламины снижают чувствительность гепатоцитов к TGF-P, и через а-1-адренорецепторы вызывают синтез ДНК в первичной культуре гепатоцитов [1, 2]. В связи с этим в настоящей работе мы исследовали влияние на регенерацию печени мыши с посттоксическим циррозом одного из адреномиметиков -добутамина.

Методика исследования. Работа выполнена на мышах-самках линии Balb/c массой 25-27 г. Экспериментальный цирроз печени у мышей получали по стандартной методике. Гепатоциты выделяли с помощью метода описанного в работе [3]. В ряде опытов за 4 ч до перфузии мышам внутрибрюшинно дважды вводили ³Н-тимидин ( 3,7 кБк/мышь). После перфузии полученные клетки рассеивали по флаконам (10х10⁴ кл), последовательно промывали, фиксировали (ТХУ-этанолом), а затем просчитывали включившуюся радиоактивность на счетчике Бета-1. В экспериментах по изучению влияния добутамина на развитие цирроза мышам в течение 1 мес. вводили CCl₄, после чего в одной группе мышам внутрибрюшинно два раза в неделю также в течение 1 мес. вводили добутамин. В другой группе мыши получали добутамин на фоне одновременного введения CCl4 (через двое сут. после введения CCl4). Результаты эксперимента оценивали по гистологическим данным согласно классификации R. Knodell.

Результаты исследования. Эксперименты in vitro по изучению влияния добутамина на пролиферативную активность гепатоцитов интактной печени в суспензионной культуре показали, что добутамин стимулирует включение ^-тимидина в гепатоциты в монослойной культуре, причем оптимальной концентрацией является 8 мкг/мл добутамина. Более того оказалось, что добутамин стимулирует пролиферативную активность гепатоцитов подобно эпидермальному фактору роста (EGF).

Оказалось также, что и in vivo добутамин стимулирует включение ³Н-тимидина в гепатоциты подобно СС1₄, а введение добутамина через 24 ч после ЧГЭ резко стимулирует пролиферативную активность гепатоцитов. Подобный аддитивный эффект добутамина наблюдается и при предварительном отравлении печени СС1₄, но выражен в значительно меньшей степени. Напротив, введение добутамина вскоре после ЧГЭ (через 2 ч) подавляет пролиферативную активность стимулированных ЧГЭ гепатоцитов.

В дальнейшем на основе полученных данных мы использовали добутамин для лечения мышей с экспериментальным посттоксическим циррозом печени. Результаты показывают, что добутамин не только предотвращает развитие посттоксического цирроза, но и восстанавливает нормальное морфо-функциональное состояние печени после ее токсического поражения. При одновременном введении четыреххлористого углерода и добутамина, структурные изменения в печени не достигают той глубины и обширности, что наблюдаются без лечения. Обращает на себя внимание уменьшение количества соединительной ткани до уровня слабого фиброза при воздействии добутамина на печень, пораженную циррозом.

Литература:

1.       Houck K.A., Michalopoulos G.K. // JCell Physiol. 1989. V. 141 (3) P. 503 - 509.

2.       Cruise J.L., Houck K.A.. // Science. 1985. V.227. P. 749 - 751.

3.       Higgins G., Anderson R. // Arch. Pathol.-1931.- V. 12.- P. 186 - 202.