Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Василёк шероховатый (Centaurea scabiosa) является ярким представителем рода Centaurea сем. Asteraceae, насчитывающего более 80 видов на территории стран СНГ. Это многолетнее травянистое растение широко распространено в Европейской части России, на Кавказе, в Западном Казахстане, в Западной и Восточной Сибири. В народной медицине василёк шероховатый применяется в качестве седативного, противовоспалительного, диуретического, вяжущего средства, рекомендован при эпилепсии, гепатите, асците, аллергических дерматитах, сыпи, фурункулах. В эксперименте оказывает противовоспалительное, противосудорожное и спазмолитическое действия.
Целью нашего исследования является установление анатомического строения травы василька шероховатого и изучение его химического состава.
  Для выявления анатомических признаков сырья были приготовлены микроскопические препараты: поперечный срез стебля, плоскостные препараты листа, листочков обвёртки, лепестков венчика. Стебель имеет пучковое строение, пучки закрытые коллатеральные, расположены по кругу в один ряд. При рассмотрении листа с поверхности видны клетки эпидермиса слегка извилистые, многоугольной формы. Устьица, расположенные с двух сторон листа, многочисленные, широкораскрытые, окружены 3?4, реже 5-тью клетками эпидермиса. Основными диагностическими признаками являются 3 типа волосков: головчатые, очень мелкие, червеобразноизогнутые, имеющие маленькую шаровидную головку и ножку, состоящую из 3?4 клеток, и простые волоски, состоящие из 3-5 клеток, с одноклеточным или многоклеточным основаниями. Характерно чёткое расположение простых волосков по краю листа и беспорядочное по всей поверхности. В мезофилле листа имеются многочисленные включения шаровидной формы. Вдоль жилок расположены секреторные ходы с жёлто-бурым содержимым. Клетки эпидермиса лепестков имеют четковидное утолщение оболочек.
В результате исследования качественного химического состава надземной части василька шероховатого общепринятыми методами фитохимического анализа были обнаружены следующие группы БАВ: флавоноиды, кумарины, дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты, полисахариды, сесквитерпеновые лактоны, сапонины и антрагликозиды [1].
  Для изучения полисахаридов (ПС) использовали известную методику фракционного выделения ПС, с помощью которой полисахаридные комплексы были разделены на фракции, содержащие водорастворимые полисахариды, извлекаемые последовательно экстракцией холодной и горячей водой (ВРПС1 и ВРПС2, выход фракций составил 2,64 % и 2,7 % от воздушно-сухого сырья соответственно), пектиновые вещества (ПВ - 9,98 %), гемицеллюлозы А и Б (ГМ А ? 18,77 % и ГМ Б ? 6,07 %). Соотношение выходов фракций составляет: ВРПС1: ВРПС2: ПВ: ГМ А: ГЦ Б = 1:1:3,8:7,1:2,3.
Для установления моносахаридного состава выделенных фракций проводили их гидролиз в течение 36 часов серной кислотой (1 моль/л). Моносахариды определяли в гидролизатах методом хроматографии на бумаге в сравнении с достоверными образцами сахаров в системе растворителей: н-бутанол:пиридин:вода (6:4:3), детекцию проводили анилинфталатным реактивом при нагревании, моносахариды проявлялись в виде красновато-коричневых пятен. В результате было установлено, что основными мономерными единицами ПС являются глюкоза, арабиноза, рамноза, галактоза, глюкуроновая и галактуроновая кислоты.
Количественное определение ВРПС и ПВ проводили гравиметрией [2] и спектрофотометрическим методом, основанным на измерении оптической плотности продуктов реакции ПС с антронсерным реактивом [3]. Для выбора стандарта были сняты 2 спектра поглощения продуктов реакции глюкозы и ПС василька шероховатого с антронсерным реактивом в одних и тех же условиях: оба спектра имеют выраженные максимумы поглощения при длине волны 620 нм. Вычисление процентного содержания ПС проводили по калибровочному графику(4,7?0,4 %). Количественное содержание ВРПС и ПВ, определённое гравиметрическим методом, составляет в траве 6,1?0,5 % и 7,7?0,5 %, в листьях 8,4?0,5 % и 14,8?0,5 %, в цветочных корзинках 4,3?0,5 % и 6,3?0,5 % и в стеблях менее 0,5 % и 6,5?0,5 % соответственно.
Для изучения фенольных соединений (ФС) были получены водный и водно-спиртовые экстракты с различной концентрацией этилового спирта. Предварительное разделение экстрактивных веществ проводили фракционированием различными растворителями с увеличивающейся полярностью (хлороформ, этилацетат, бутанол). Качественный состав суммарных извлечений и отдельных фракций анализировали с применением методов хроматографии на бумаге и в тонких слоях сорбентов (силикагеля, полиамида и порошка целлюлозы) паралельно с достоверными веществами-свидетелями в различных системах растворителей [1]. Было установлено наличие в полученных фракциях (хлороформной, этилацетатной, бутанольной, водном остатке) и подфракциях, выделенных хроматографией на колонках, таких фенолкарбоновых кислот, как хлорогеновая, феруловая, п-кумаровая и кофейная, наличие флавоноидов: апигенина, рутина, кверцетина и байкалеина.
Количественное содержание суммы дубильных веществ определяли методом перманганатометрии по Лёвенталю [3]. Содержание дубильных веществ составило 3,6?0,4 % в пересчёте на гидролизуемые дубильные вещества и 4,9?0,4 % в пересчёте на конденсированные.
Определение количественного содержания флавоноидов проводили спектрофотометрическим методом с использованием ГСО рутина и комплексообразующей реакции с алюминия хлоридом [2]. Содержание флавоноидов в 40 % и 70 %-ных водно-спиртовых экстрактов в пересчёте на рутин составило 6,5 % и 6,6?0,4 % соответственно.
Выводы:
1). Определены основные микроскопические признаки травы василька шероховатого.
2). Впервые проведено качественное и количественное исследования полисахаридного комплекса василька шероховатого. Проведённый фракционный анализ показал наличие значительных количеств всех фракций ПС. Для определения содержания ПС в сырье был применён антроновый метод, который является более точным, удобным в использовании и позволяет объективно оценить содержание ВРПС в сырье.
3). Определены экстракты и фракции наиболее богатые веществами флавоноидной природы, фенолкарбоновыми кислотами, полисахаридами.
4). Проведено качественное и количественное исследование некоторых групп фенольных соединений (флавоноидов, фенолкарбоновых кислот и дубильных веществ).

Список литературы:
1. Гринкевич, Н. И. Химический анализ лекарственных растений / Н. И. Гринкевич, Л. Н Сафронич. ? М., 1983. ? 176 с.
2. Государственная Фармакопея СССР. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. – 11-е изд., доп. – М. : Медицина, 1990. – 400 с.
3. Сафонов, М. Ю. Спектрофотометрический метод определения содержания полисахаридов в слоевищах Cetraria islandica (L.) ACH / М. Ю. Сафонов, Е. И. Саканян, Е. Е. Лесиовская // Раст. ресурсы. – 1999. – Т. 35, № 2. – С. 101?105.