Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 67-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2008 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.
C.
angustifolium
применяется в народной, традиционной (тибетской) медицинах [1]. Ранее из
соцветий C. angustifolium был
предложен препарат «Ханерол», обладающий высокой противоопухолевой активностью
и оказывающий геммаглютинирующее действие, которое связывали с суммой фенольных
соденинений.[4,3].
Целью нашей работы было исследование
качественного состава и количественного содержания основных групп действующих
веществ надземной части х. узколистного, произрастающего на территории Сибири и
Дальнего Востока.
Материалы и методы исследования. Объектами
исследования были образцы сырья (трава) к. узколистного, собранного по фазам
вегетации, из разных точек ареала и местообитаний: Новосибирская область (НСО
ф. цветение - обр. № 1), респ. Бурятия (ф. цветение - обр. № 2), Ярославская
область (ф. цветение - обр. № 3); по органам: лист (обр. № 4), стебель (обр. № 5),
соцветие (обр. № 6); и по фазам развития растений: проростки (пр.) h=3-10 см (обр. № 7), пр. h=15-25 см (обр. № 8), пр. h=25 см
(обр. № 9), пр. h=25-50 см
(обр. № 10), пр. h≥50 см (обр. № 11), вегетация (обр. № 12), бутонизация (обр. №
13), цветение (обр. № 14) и плодоношение (обр. № 15), собранных в НСО в 2005-2006
гг.
Для хроматографического анализа флавоноидов
использовали системы: кислоту уксусную15%, систему Форесталя (3:30:10). Идентификацию
веществ осуществляли по величинам Rf, свечению пятен в УФ-свете до и после
обработки хроматограмм проявителями (пары аммиака и 5% спиртовой раствор
алюминия хлорид) и окраске пятен в сравнении со свидетелями. Сумму
экстрактивных веществ определяли по ГФ XI издания. Количественное определение
биологически активных веществ проводили спектрофотометрическим методом в суммарных
извлечениях из сырья соответствующим экстргентом. Оксикоричные кислоты определяли
при длине волны 267 нм, в пересчете на т-коричную кислоту, флавоноидов - при длине
волны 361 нм, в пересчете на рутин и кумаринов – при длине волны 323 нм, в
пересчете на умбеллиферон.
Хроматографическое исследование суммы
флавоноидов в образцах C. angustifolium,
собранных в НСО, показало наличие 15 веществ, из которых идентифицированы:
рутин, кверцетин, кверцетина рамнозид, апигенин, байкалеин, буплерин. Ранее
нами был определен качественный состав оксикоричных кислот в образце C. angustifolium, собранном в НСО. Установлено
наличие 7 веществ из которых идентифицировано 5: феруловая, галловая, хлорогеновая,
глюкуроновая, кофейная кислоты.[5]
Анализ количественного содержания оксикоричных
кислот и флавоноидов по органам показал, что максимальное содержание
оксикоричных кислот наблюдается в соцветии (обр. № 6 - 2,97 %), флавоноидов – в
листьях (обр. № 4 - 2,1 %). При определении количественного содержания
оксикоричных кислот и флавоноидов в
различные стадии развития проростков установили, что их содержание у проростков
высотой 3-10 см.(1,92
% и 1,81 % оксикоричных кислот и флавоноидов соответственно) постепенно возрастает,
достигает максимума у проростков высотой 15-20 см,(2,6 % и 2,66 %
соответсвенно), а затем снижается(1,56 % и 1,59 % соответственно). При
вступлении растения в фазу вегетации содержание групп исследуемых веществ минимально
(1,0 % и 1,0 % соответственно), затем начинает увеличиваться к фазе бутонизации
(1,92 % и 1,16 % соответственно). Максимальный уровень накопления БАВ наблюдается в фазу цветения (2,63 % и
5,47 % соответственно), а затем вновь снижается и к фазе плодоношения (2,2 % и
1,23 % соответственно).
При определении суммы экстрактивных веществ в
обр. № 1, использовали экстрагенты: вода очищенная, спирт этиловый 20, 40 и 70 %
и выявили, что происходит постепенное увеличение выхода экстрактивных веществ
при повышении содержания этилового спирта в экстрагенте. (Вода очищенная -
33,52 %; 20 % спирт этиловый – 34,8; 40 % - 36,56 % и 70 % - 40,31 %)
В дальнейшем перед нами стояла задача
определения экстрагента, извлекающего наибольшее количество оксикоричных
кислот, кумаринов и флавоноидов в образцах, собранных в различных местах произрастания.
Установлено, что наилучшим экстрагентом является
70 % спирт этиловый (таблица).
При определении содержания действующих веществ в
зависимости от места произрастания растения выявили, что содержание и
соотношение веществ существенного различия не имеют.
Таблица.
Количественное содержание веществ фенольной природы в образцах C. angustifolium в зависимости от экстрагента.
(в % в пересчете на абсолютно сухое сырье).
БАВ
Экстрагент
|
Оксикор. кислоты
|
Кумарины
|
Флавоноиды
|
№ образца
|
№ образца
|
№ образца
|
1
|
2
|
3
|
1
|
2
|
3
|
1
|
2
|
3
|
Вода
|
2,79
|
2,04
|
2,24
|
2,21
|
1,7
|
1,76
|
1,24
|
0,93
|
1
|
Этанол
20%
|
2,53
|
2,04
|
2,02
|
2,05
|
1,65
|
1,38
|
1,15
|
0,96
|
0,84
|
Этанол 40%
|
2,2
|
1,84
|
2,72
|
1,8
|
1,28
|
2,01
|
0,8
|
0,74
|
1,09
|
Этанол
70%
|
5,7
|
5,23
|
4,8
|
6,19
|
5,07
|
4,32
|
2,48
|
2,16
|
2,22
|
Выводы:
1. Качественный состав
суммы флавоноидов надземной части C.
angustifolium представлен 15 веществами, из которых идентифицированы:
рутин, кверцетин, кверцетина рамнозид, апигенин, байкалеин и буплерин.
2. Сравнительный
хроматографический анализ суммы оксикориченых кислот и флавоноидов в
зависимости от фазы развития и по органам растения показал идентичность их качественного
состава за исключением стебля (не обнаружен байкалеин).
3. Установлено, что 70 %
спирт этиловый извлекает наибольшее количество веществ фенольной природы.
Максимальное накопление оксикоричных кислот и флавоноидов наблюдается в фазу
проростков (обр. № 8) и цветения (обр. № 14), а в зависимости от органов растения
– в соцветии (обр. № 6) и листьях (обр. № 4).
4. В качестве сырьевой
части C. angustifolium предлагаем
использовать верхнюю облиственную часть стебля с соцветием.
Список литературы:
1.
Растительные
ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства
Hydrangeaceae – Haloragaceae./ П. Д. Соколов и др.// Л. : Наука, 1987. – 200 с.
2.
Сыркин,
А. Б., Коняева, О. И. Фармацевтическое исследование некоторых новых противоопухолевых
средств /
А. Б. Сыркин, О. И. Коняева // Химико-фармацевтический журнал. - 1984. - № 10.
- С. 1172-1180.
3.
Рабинович
А.М. Фитотерапия против рака /А. М. Рабинович //Экология и жизнь.
-2001. - №5. - С. 78-81.
4.
Фармакогностический
анализ травы хамериона узколистного (Chamerion angustifolium (L.) Holub.) / Р.
И. Валов, М. А. Ханина // Разработка,
исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сборник научных
трудов. – Пятигорск, 2007. – Вып.62. – С. 23-24.