Среди веществ, образующих  фенольный комплекс  важное место занимают антоцианидины, которые имеют самостоятельное значение как биологически-активные соединения (БАС), обладающие Р-витаминной активностью, и, соответственно, капилляроукрепляющим действием [3]. Именно действием антоцианидинов, вероятнее всего, обусловлен положительный этиотропный эффект применения ягод в комплексной терапии ЖД, в то время как микроэлементы оказывают действие на патогенез заболевания.

Целью настоящей работы являлось определение фармакологической активности   экстракта из плодов ч. обыкновенной, а также определение количественного содержания антоцианидинов и микроэлементов кроветворного комплекса.

В качестве объектов исследования были выбраны плоды черники обыкновенной, собранные в Новосибирской области в 2007 году.

Фармакологические исследования проводились на крысах линии «Vistor» трехмесячного возраста. ЖДА вызывалась у всех крыс путем периодического забора крови из хвостовой вены и диагностировалась по уровню гемоглобина (Hb<70 г/л).

По достижению ЖДА (уровень гемоглобина до начала введения препаратов Hb=43,0±1,0 г/л) одопытные животные случайным образом разделялись на группы. Контрольная группа лечению не подвергалась, группе сравнения вводился препарат сравнения – «Мальтофер» в форме сиропа, опытным группам - экстракт из исследуемого растения.

Микроэлементный состав сырья определялся методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой на приборе «ELAN».

Антоцианидины обладают характерными максимумами  поглощения в области 500 - 530 нм и являются удобными веществами для стандартизации лекарственного растительного сырья (ЛРС). На указанном свойстве, базируется методика  прямой спектрофотометрии количественного определения антоцианидинов, основанная на определении оптической плотности суммарного извлечения при длине волны 510 нм [1]. В тоже время, данная методика не учитывает вклад в оптическую плотность раствора других компонентов из состава сырья.

Известно [2], что поглощение антоцианидиновых пигментов сильно зависит от рН раствора: в сильнокислой среде окраска большинства антоцианидинов ярко-красная, при увеличении рН она постепенно переходит в темно-синюю, что связано с изменением структуры входящего в состав пигмента агликона. Различие в адсорбции при λ= 510 нм и рН=1 и рН=4,5 пропорционально содержанию антоцианидина. На этом принципе основано определение антоцианидинов методом pH-дифференциальной спектрофотометрии [2].

Из высушенного сырья  по фармакопейной методике получали суммарное извлечение с использованием в качестве экстрагента 1 % кислоты хлористоводородной. На спектрофотометре СФ-56 были сняты УФ-спектры извлечений в диапазоне 350-750 нм.

Дополнительно были проведены измерения оптической плотности при λ=510 нм и λ=700 нм при разных pH исследуемого раствора. Исследуемый раствор исходно имел pH=1,0. Доведение до pH=4,5 производилось путем добавления к исследуемому раствору нескольких капель водного раствора аммиака. При анализе УФ-спектра, был выявлен максимум поглощения при λ= 515 нм. Сдвиг максимума поглощения в длинноволновую область характерен для суммы антоцианидинов с преобладанием дельфинидина). Для ягод черники содержание дельфинидина сравнимо с содержанием цианидина-3-глюкозида (33 и 35 % относительно всей суммы антоцианидинов [2]).

Исследование фармакологической активности плодов черники обыкновенной в эксперименте на крысах с модельной ЖДА постгеморрагического генеза показало, что восстановление исходного уровня гемоглобина достигается к 20 дню, в то время как у контрольной группы животных к 30 дню. Скорость роста гемоглобина 5,9 г/л в сутки.

Результаты количественного определения биологически-активных соединений представлены в таблице.

Таблица. Содержание антоцианидинов (в %) и микроэлементов (в мкг/г) в плодах ч. обыкновенной

*1 - в пересчете на цианидин-3,5-диглюкозид

*2 - в пересчете на цианидин-3-глюкозид

*3 –  в пересчете на дельфинидин

В результате проведенных исследований  можно сделать следующие выводы:

1.   Установлена противоанемическая активность экстракта из плодов ч.обыкновенной.

2.   Выявленное содержание антоцианидинов и микроэлементов кроветворного комплекса в плодах ч.обыкновенной позволяет предполагать комплексное воздействие в терапии ЖДА

3.   Методика прямого спектрофотометрического определения антоцианидинов дает несколько завышенное значение по сравнению с методом pH-дифференциальной спектрофотометрии.

Список литературы:

1.   Государственная фармакопея СССР : Вып.2 Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье/ МЗ СССР. - 11-е изд. - М. : Медицина, 1989. - 400с.

2.   Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище: Руководство Р 4.1.1672-03 от 30.06.2003// М., Фед. центр Госсанэпиднадзора МЗ РФ, 2004. - 240с.

3.   Awika, J. M. Anthocyanins from black sorghum and their antioxidant properties / J. M.Awika, L. W. Rooney, R. D. Waniska// Food Chemistry. - 2004. - v. 90. - pp. 293-301

4.   Bohm, H. Flavonols, flavones and anthocyanins as native antioxidants and their possible role in the prevention of chronic diseases/ H. Bohm [ et al.] // European Journal of Nutrition.- 1998. - V. 37. - № 2. - pp. 147–163