Арбутин - фенологликозид - содержащийся во многих растениях семейств Ericaceae, Crassulaceae, Asteraceae и др., и оказывающий мочегонное и дезинфицирующее действие.
В литературе описано несколько методик количественного определения арбутина, но все они имеют свои недостатки. Так, методика ГФ XI издания (ст. 26) [2] - йодометрическое титрование - требует большого количества реактивов, времени (более 5,5 часов) и достаточно трудоемка. Для спектрофотометрического метода необходима дорогостоящая специализированная аппаратура (спектрофотометр, УФ-лампа). Для фотоэлектроколориметрии с использованием 4-аминоантипирина требуется работа с хлороформом и его большая затрата. Метод по реакции с амидопирином недоступен для большинства лаборатории вследствие того, что амидопирин не выпускается отечественной фармацевтической промышленностью. Наиболее доступным является фотоэлектроколориметрический метод по реакции азосочетания арбутина с первичной ароматической аминогруппой ряда соединений.
При апробировании методики фотоэлектроколориметрического определения арбутина в листьях толокнянки разработанной В.А. Браиловской и Г.И. Лукьянчиковой [1] мы использовали раствор сульфацила-натрия, но интенсивность и устойчивость окраски оказались недостаточными. Поэтому мы провели ряд исследований по устойчивости окраски во времени (до 200 минут) с различными веществами, имеющими первичную аминогруппу (сульфадимезин, норсульфазол натрия, норсульфазол основание, новокаин, сульгин, стептоцид). В работе был использован 0,05% водный раствор арбутина-стандарта фирмы Sigma (Германия). Наименьшая интенсивность окраски наблюдалась при реакции со стрептоцидом, наибольшая - при реакции с норсульфазолом основанием. Наименьшая устойчивость во времени - при реакции с норсульфазолом натрия (уменьшение оптической плотности наблюдалось после 20 минут), наибольшая - при реакции с сульфадимезином (после 80 минут) и норсульфазолом основанием (после 70 минут). Согласно полученным результатам в дальнейшем использовали 0,083% водный раствор норсульфазола основания с добавлением 10 мл 0,1 н хлористоводородной кислоты на 100 мл раствора.
Исходя из спектральных характеристик окрашенных растворов, полученных на спектрофотометре марки СФ-46, максимум поглощения наблюдался при длине волны 505 нм. Поэтому для работы на фотоэлектроколориметре использовался зеленый светофильтр (Х=490 нм). Оптическую плотность окрашенных растворов определяли в кювете с толщиной рабочего слоя 1 см.
Содержание арбутина в растворах находили по удельному показателю поглощения (E1%) равного 221,5 [1]. Расчет процентной концентрации проводили по известной формуле с использованием коэффициента пересчета на безводный арбутин [1].
Таким образом, использование реакции с норсульфазолом основанием устраняет ошибки, возникающие при определении малых количеств арбутина, содержащегося в лекарственном растительном сырье.