Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск          
Кафедра фармацевтической химии

Препараты на основе сырья растительного происхождения в последние годы вызывают все больший интерес в медицинской практике. Фитопрепараты, содержащие комплекс биологически активных веществ (БАВ), характеризуются широким спектром фармако-логического действия, эффективностью и малой токсичностью, что позволяет использовать их длительное время для профилактики и лечения многих заболеваний без риска воз-никновения побочных явлений. Одним из наиболее интересных объектов исследования, как источника биологически активных соединений, обеспечивающих широкий спектр фармако-терапевтического действия, является календула лекарственная (Calendula officinalis L.).
Календула хорошо известна в народной и официальной медицине как противовоспалительное, антисептическое, ранозаживляющее, желчегонное средство и зарегистрирована в ГФ XI издания. В настоящее время из цветков календулы получают  спиртоводные и масляные извлечения, входящие в состав таких препаратов, как настойка календулы, ротокан, калефлон, масло календулы и других, выпускаемых фармацевтической промышленностью РФ.
Традиционно спиртоводные и масляные извлечения получают раздельно, используя либо масляный, либо спиртоводный экстрагент. При этом экстракция происходит неполно, и в от-ходах производства остается значительное количество биологически активных веществ [1].
Фармацевтическое производство требует внедрения ресурсосберегающих безотходных технологий в производство препаратов на основе сырья растительного происхождения.
Целью данной работы является разработка рациональной технологии получения экстракта из цветков календулы лекарственной двухфазной системой экстрагентов и его стандартизация.
Для комплексного извлечения БАВ из лекарственного растительного сырья предложен способ экстрагирования системой несмешивающихся растворителей различной полярности, т.е. двухфазная система экстрагирования [2].
В работе использованы цветки календулы лекарственной (Flores Calendulae officinalis L.), собранные в фазе цветения в июле-сентябре 2007-2008 гг. в окрестностях села Межениновка Томской области. По внешним признакам и числовым показателям сырье (высушенные цветочные корзинки) соответствовали требованиям ГФ XI издания [3].
Для получения экстракта использовали метод мацерации на водяной бане с обратным холодильником. В качестве экстрагентов применяли растительное масло и спирт этиловый.
Для установления более полного извлечения БАВ были изучены следующие техно-логические параметры: продолжительность и температура экстракции, характер экстрагента и соотношение сырья к экстрагенту. Об оптимальном подборе параметров судили по количественному содержанию флавоноидов в полученных сериях экстрактов.    
При установлении подлинности полученных экстрактов использовали спектро-фото-метрический метод в УФ- и видимой областях. Электронный спектр спиртового раствора экстракта в области от 200 до 700 нм имеет два максимума поглощения при 266 + 2 нм и при 329 + 2 нм, минимум при 280 + 2 нм, плечо от 260 нм до 265 нм.        
Учитывая наличие в цветках Сalendulae officinalis L. каротиноидов, флавоноидов,  тритерпеновых сапонинов, полисахаридов, карбоновых кислот и других БАВ [4], идентификацию проводили, используя хроматографию в тонком слое сорбента (ТСХ) на пластинках «Сорбфил – ПТСХ-П-А» в семи разных системах растворителей. Наилучшие результаты были получены в следующих двух системах: хлороформ-этанол 19:1 и бутанол- уксусная кислота- вода  (БУВ) 20:1:4.
Детектирование хроматограмм осуществляли путем просматривания в фильтрованном УФ-свете при длине волны 254нм. Проявляли вещества опрыскиванием 2% спиртовым раствором алюминия хлорида с целью идентификации флавоноидов, 25% спиртовым раствором фосфорно-вольфрамовой кислоты для обнаружения сапонинов и 10% спиртовым раствором фосфорно-молибденовой кислоты для установления подлинности каротиноидов. На хроматограммах были обнаружены следующие пятна: одно пятно соответствующее рутину и  имеющее значение  величины Rf 0,48 + 0,01, пятно соответствующее ?- каротину с Rf 0,79 + 0,01, а так же два пятна с Rf  0,21 + 0,01 и 0,15 + 0,01 соответствующие сапонинам. При анализе полученных хроматограмм для флавоноидов, сапонинов и каротиноидов  величины Rf  были  определены  как средние из 5 измерений.   
Количественное содержание флавоноидов в полученных экстрактах определяли методом дифференциальной спектрофотометрии по реакции образования комплекса с алюминия хлоридом в кислой среде при длине волны 410 нм. По результатам исследования оптимальное содержание флавоноидов в экстракте в пересчете на рутин составляет 0,194 + 0,004%, что значительно превышает количественное содержание данной группы БАВ в настойке календулы лекарственной.
Выводы. 1. В результате проведенных исследований подобраны оптимальные технологи-ческие параметры получения экстракта из цветков календулы методом двухфазной системы экстрагентов;
2. Разработан способ стандартизации полученного экстракта, при этом установлено, что со-держание флавоноидов в нем в четыре раза превышает их количество в настойке календулы.

Список литературы:
1. Дзаурова, М. М. Получение и исследование водного экстракта в условиях малоотходной технологии переработки цветков ноготков и его лекарственных форм: Aвтореф. дис. … канд. фарм. наук / М. М. Дзаурова. – Курск, 2007. – 22 с.
2. Иванова, С. А. Особенности массопереноса липофильных БАВ при экстрагировании сырья двухфазной системой экстрагирования / С. А. Иванова, В. А. Вайнштейн, И. Е. Каухова // Химико-фармацевтический журнал. – 2003. – Т. 37, № 8. – С. 30-33.
3. Государственная фармакопея СССР: Вып.2 Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырьё /  СССР. – 11-е изд. – М. : Медицина, 1990. – 400 с.
4. Коновалова, О. А. Биологически активные вещества Calendula officinalis L. / О. А. Коновалова, К. С. Рыбалко // Растительные ресурсы. – 1990. – Т. 26,  № 3. – С. 448 – 460.