Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
Кафедра фармацевтической химии
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 68-й научной итоговой студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 20-22 апреля, 2009 год); под реакцией академика РАМН В.В. Новицкого, член. корр. РАМН Л.М. Огородовой
Посмотреть титульный лист сборника
Скачать сборник целиком (1,5 мб)
Для защиты печени, восстановления и нормализации ее функции используют гепатопротекторные средства. Арсенал их ограничен и представлен преимущественно импортными препаратами [1].
Одной из актуальных проблем в настоящее время является разработка новых гепатопротекторных фитопрепаратов на основе растений Сибири и Дальнего Востока. Перспективным в этом плане является василек шероховатый (Centaurea scabiosa L.), обладающий выраженными антиоксидантными свойствами.
Целью данной работы явилось изучение химического состава и влияния экстракта из надземной части василька шероховатого (ВШ), полученного на 70% этаноле на липидный обмен печени крыс с острым токсическим гепатитом.
Надземная часть василька шероховатого была собрана в естественных условиях обитания в июле 2007 г. в фазах цветения и бутонизации в окрестностях г. Томска, Томской обл. Экстракт получали на 70% этаноле при нагревании на водяной бане, далее растворитель удаляли под вакуумом и экстракт высушивали. Химический состав полученного экстракта из надземной части растения исследовали с помощью общеизвестных методов фитохимического анализа. В результате были обнаружены следующие группы биологически активных веществ: флавоноиды (8,100,4% в пересчете на рутин), фенолкарбоновые кислоты (8,760,32% в пересчете на кофейную кислоту), дубильные вещества (4,3±0,25% конденсированные и 6,05±0,43% гидролизуемые), кумарины, полисахариды (8,3±0,25%.), сесквитерпеновые лактоны, каротиноиды, аскорбиновая кислота (311,8±14,2 мг %) и аминокислоты.
Эксперименты проводили на 44 беспородных крысах-самцах массой 180-220 г, которые содержались в виварии при естественном световом режиме, свободном доступе к воде и пище, на стандартном рационе. Животные были разделены на шесть исследуемых групп: I группа животных (8 крыс) – интактные получали воду очищенную в течение 4 суток, II группе животных (в количестве 10) для развития гепатита ежедневно в течение 4 дней вводили 50% масляный раствор тетрахлорметана в дозе 1 мл/кг, III группе – контрольной (6 крыс) вводили эквиобъемное количество растительного масла в течение 4 дней и последующие шесть дней 1% крахмальную слизь, IV группа животных после развития гепатита (8 крыс) ежедневно в течение шести дней получала 1% крахмальную слизь, V группа – животные с гепатитом (6 крыс) после 6 дневного лечения экстрактом из надземной части ВШ на 1% крахмальной слизи в дозах 200мг/кг. В качестве препарата сравнения использовали карсил в дозе 100 мг/кг (VI группа, 6 крыс). Животным всех экспериментальных групп тетрахлорметан, экстракт, карсил и растворители вводили перорально с помощью зонда. Дозы экстракта и препарата сравнения применяли в соответствии с методическими указаниями по изучению гепатозащитной активности фармакологических веществ [2].
Для определения общих липидов (ОЛ) и общих фосфолипидов (ОФЛ) в печени использовали спектрофотометрический метод, липидный экстракт получали по методу Folch [3]. Разделение отдельных липидных и фосфолипидных компонентов проводили хроматографическим методом на пластинках «Silufol». Для разделения ОЛ в качестве растворителей использовали смесь гептан – этиловый эфир – этилацетат (80:20:1,5), для фракций ФЛ – хлороформ – метанол – вода (65:25:4). В качестве детектора использовали 2% этанольный раствор фосфорно-молибденовой кислоты.
Статистическую обработку проводили, используя пакет программ StatSoft Statistica v6.0 с определением средней арифметической (М) и ее ошибки (m), уровень статистической значимости различий оценивали с использованием непараметрического критерия Вилкоксона.
Результаты исследования показали, что у крыс с гепатитом печени было установлено накопление ОЛ более чем в 2 раза по сравнению с контрольной группой животных за счет значительного повышения содержания триацилглицеридов (ТАГ), а также свободного холестерина (СХ) и неэтерифицированных жирных кислот (НЭЖК), в то время как уровень эфиров холестерина (ЭфХ) снизился (табл.). После лечения экстрактом ВШ наблюдается статистически достоверное снижение их количества почти в 2 раза по сравнению с больными животными и приближается к величинам, полученным у здоровых крыс, лишь содержание ЭфХ осталось на прежнем уровне.
Полученные результаты свидетельствуют, что лечение экстрактом ВШ в дозе 200 мг/кг в ткани печени привело к достоверному снижению уровня ОФЛ, в основном за счет уменьшения содержания сфингомиелина (СФ) более чем в 3 раза и в 2,7 раза лизофосфатидилхолина (ЛФХ). Незначительно снизилось количество фосфатидилхолина (ФХ) и фосфатидилэтаноламина (ФЭА), а уровень фосфатидных кислот (ФК) практически не изменился. В сравнении с препаратом карсилом отмечается более существенное снижение СХ, НЭЖК, СФ, ФЭА, а также ЭфХ.
Эксп.
гр.
|
I
группа
Контроль 1
|
II
группа
Гепатит 1
|
III группа
Контроль 2
|
IV
группа
Гепатит 2
|
70%
экстракт ВШ
|
Карсил
|
ОЛ
|
35,06±2,67
|
67,16±4,71
|
22,26±1,24
|
48,06±1,042
|
32,88±1,153,4
|
36,58±5,163,4
|
СХ
|
6,75±0,63
|
11,96±0,681
|
5,02±0,65
|
8,98±0,282
|
6,50±0,623,4
|
6,98±1,683,4
|
НЭЖК
|
4,28±0,27
|
6,70±0,561
|
3,14±0,18
|
4,36±0,432
|
3,00±0,533,4
|
4,44±0,673,4
|
ТАГ
|
8,13±0,73
|
20,82±0,731
|
5,60±0,07
|
16,84±0,662
|
10,07±0,563,4
|
9,60±0,613,4
|
ЭфХ
|
8,86±0,80
|
6,12±0,331
|
4,58±0,63
|
3,34±0,472
|
5,45±0,273,4
|
6,78±0,183,4
|
ОФЛ
|
12,97±0,13
|
22,76±0,971
|
11,85±0,33
|
18,13±2,092
|
11,14±0,793,4
|
12,38±0,553,4
|
ЛФХ
|
0,49±0,02
|
0,85±0,051
|
0,35±0,03
|
0,67±0,072
|
0,31±0,023,4
|
0,28±0,013,4
|
СФ
|
0,98±0,02
|
1,86±0,091
|
0,79±0,01
|
1,21±0,282
|
0,50±0,023,4
|
0,74±0,033,4
|
ФХ
|
6,33±0,16
|
12,08±0,321
|
6,11±0,26
|
8,72±1,272
|
5,63±0,423,4
|
7,23±0,263,4
|
ФЭА
|
3,71±0,09
|
6,13±0,391
|
3,42±0,17
|
4,99±0,782
|
3,37±0,223,4
|
2,81±0,153,4
|
ФК
|
1,44±0,09
|
1,84±0,151
|
1,04±0,09
|
1,70±0,182
|
1,31±0,113,4
|
1,07±0,063,
|
Анализируя полученные данные, можно заключить, что развитие гепатита у крыс приводит к значительным сдвигам в метаболизме ОЛ и ФЛ. После лечения животных экстрактом ВШ установлены репаративные процессы в печени.
Список литературы:
1. Оковитый, С. В. Клиническая фармакология гепатопротекторов / С. В. Оковитый, С. Н. Шуленин. – СПб. : 2006. – 80 с.
2. Руководство по экспериментальным (доклиническим исследованиям) новых фармакологических веществ / Под ред. Р. У. Хабриева. – 2-е изд., перераб. и доп. – М. : Медицина, 2005. – 836 с.
3. Folch, I. A simple method for the isolation and purification of total from animal tissues / I. Folch, M. Jees, Sloane Stanley g. H. // The Journal boil. Chemistry. – 1957. – № 1. – Р. 497-509.
|