Na⁺,К⁺-АТФаза обеспечивает мембранный потенциал и осмотическую стабильность цитоплазмы эритроцита, благодаря чему выполняет немаловажную роль в сохранении двояковогнутой формы клетки, способствующей её продвижению по сосудам микроциркуляции и участию в газообмене [3]. Поэтому исследование активности этого мембранассоциированного фермента при воздействии гипоксических ксенобиотиков, в том числе монооксида углерода (СО) представляет большой интерес с позиции изучения механизмов развития гипоксическо-го синдрома.
В связи с этим целью нашего исследования явилось определение активности Na⁺,К⁺- АТФазы в мембране эритроцитов и ее роли в морфологической трансформации красных клеток крови у белых крыс при острой интоксикации монооксидом углерода.

Материал и методы. Эксперименты проведены на крысах-самцах линии Wistar весом 190-250 г, которых подвергали динамической затравке СО в концентрации 4000 мг/м³ в течение 1,5 ч (СL₅₀). Крыс контрольной группы помещали в затравочную камеру с продувкой атмосферного воздуха в течение 1,5 ч.
По окончании затравки исследовали кровь выживших животных, полученную методом декапитации и стабилизированную гепарином (50 ЕД/1 мл крови).
В крови определяли содержание карбоксигемоглобина (HbCO, %) спектрофотометриче-ским методом («Specord M40», Германия). Активность Na⁺,К⁺-АТФазы в мембранах эритроцитов, выделенных по методу J.T. Dodge (1963), определяли по уровню неорганического фосфора (Р^ (Казеннов А.М. и соавт., 1984). Топографию поверхности клеток красной крови изучали методом сканирующей электронной микроскопии в микроскопе «JEM-100» (Япония). Образцы для исследования готовили по методике Г. И. Козинца и соавт. (1982, 1984) в модификации Е.И. Степановой и соавт. (1982).
Результаты обработаны статистически с использованием непараметрического критерия Вилкоксона-Манна-Уитни (достоверность различий считали при р<0,05).

Результаты и обсуждение. Исследования показали, что по окончании затравки животных монооксидом углерода уровень HbCO в крови составлял в среднем 51,5±3,3% при отсутствии его у интактных животных.
Активность Na⁺,К⁺-АТФазы в мембране эритроцитов в этот период составляла 0,07±0,01 мкмоль Рi/час•мг белка при среднестатистическом контрольном значении 0,31±0,02 мкмоль Рi/час•мг белка (р<0,001).
Сканирующая электронная микроскопия позволила установить статистически значимое увеличение относительного содержания необратимых предгемолитических форм эритроцитов (куполообразных, сфероцитов, в виде «спущенного мяча») в среднем в 1,3; 3,0 и 3,2 раза по сравнению с контрольным показателями, равными 0,44±0,10, 0,64±0,10 и 0,22±0,07% соответственно. Количество дегенеративно измененных форм эритроцитов повысилось в 3,3 раза (контроль - 0,36±0,08%). Между тем содержание дискоцитов в этот период было ниже, чем у интактных животных в среднем на 9% (р<0,05) (контроль - 87,66±0,26%). Из числа клеток с измененным рельефом поверхности, способных к обратимой трансформации (плоский диск, дискоцит с выростом, дискоцит с множественными выростами, дискоцит с гребнем), особо отмечалось изменение количества дискоцитов с множественными выростами - в 4,5 раза выше исходных значений в контрольной группе (0,38± 0,07%).

Механизмы трансформации эритроцитов при острой интоксикации СО обусловлены, по всей видимости, структурной дезорганизацией липидов и белков мембраны клеток, нарушениями белок-липидных взаимодействий, изменением динамических свойств липидных молекул, ионтранспортных систем, что традиционно рассматривается механизмами нарушения функции мембранных ионтранспортирующих систем, в частности Na⁺,К⁺-АТФазы. Указанные явления, вероятно, являются результатом активации свободнорадикального окисления и истощения энергетических резервов в условиях гипоксии [1].

Таким образом, результаты проведенного исследования выявили параллелизм в нарушении активности Na⁺,К⁺-АТФазы мембраны эритроцитов и ухудшении морфологической картины красной крови, что свидетельствует о дестабилизации механизмов регуляции функциональной активности красных клеток крови при отравлениях монооксидом углерода.