|
Научные руководители: д-р мед. наук, проф. М.Г. Пустоветова, д-р мед. наук, проф. Е.Н. Самсонова
Новосибирский государственный медицинский университет, г. Новосибирск
Введение. В настоящем исследовании был использован ряд методических подходов, позволяющих оценить общую флогогенную активность сыворотки крови по ее способности усиливать кислородозависи-мую биоцидность лейкоцитов в результате которой активируются процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ). Также были использованы методы, основанные на усилении свободно-радикальных реакций в физиологических условиях. Такие реакции в тканях уравновешиваются активностью внутри- и внеклеточных антиоксидантов, формируя определенный оптимальный уровень про- и антиоксидантного равновесия [1, 2].
Цель и задачи. Установить уровень нарушения корреляции «оксидант - антиоксидант» у крыс с саркомой Walker-256 и изучить их состояния про- и антиоксидантного статуса в сыворотке крови.
Материал и методы. Исследование проводили на крысах-самцах линии Вистар. Суспензию клеток прививаемой карциносаркомы Walker-256 инъецировали в мышцу бедра в дозе 106 клеток. Концентрация была выбрана в соответствии с рекомендациями [3]. Размеры опухоли измеряли штангенциркулем в трех взаимно перпендикулярных направлениях, далее их перемножением определяли объем. Животных держали при фиксированном световом режиме (свет - темнота 12:12) и максимально стандартизированной окружающей температурой. Для получения сыворотки крови крысам проводилась декапитация под эфирным наркозом с момента перевивки опухоли, на 3-и, 7-е и 14-е сутки исследования. Проаксидантную активность (ПОА) сыворотки крови определяли с помощью лейкоцитарных тестов, общую антиоксидантую активность (АОА) сыворотки крови определяли с помощью хемилюминометра (ХЛ) по степени торможения суммарной ХЛ-светимости, запускаемой 3 % Н2О2. Анализ данных вели на PC CPU Intel P-II 750 МГц Celeron в среде Windows по программе SPSS 16.0 и Microsoft Excel версии 2007.
Результаты и обсуждение. Результаты оценки общей проокси-дантной активности (ПОА) сыворотки крови интактных крыс и животных с экспериментальной саркомой Walker -256 показали, что среднее значение общей прооксидантной активности сыворотки крови интактных крыс составило (0,28 ± 0,003) усл. ед. В динамике развития саркомы Walker -256 величина общей прооксидантной активности сыворотки крыс на всех сроках наблюдения достоверно превышала среднее контрольное значение. Так, на 3-и сутки развития саркомы Walker -256 была отмечена максимально высокая величина общей прооксидантной активности сыворотки крови, и в среднем она составляла (0,56 ± 0,01) усл. ед., что в 2,3 раза было выше, чем в контроле (p < 0,01). На последующих сроках наблюдения у крыс с саркомой Walker -256 прооксидантная активность сыворотки крови снижалась: к 7-м и 14-м суткам наблюдения, а ее средние значения превышали контроль соответственно в 1,6 и 1,5 раза и в среднем составили (0,38 ± 0,005) усл. ед. и (0,33± 0,004) усл. ед. (в обоих случаях p < 0,05). В результате определения вторичных, стабильных продуктов ПОЛ в динамике развития саркомы Walker -256 был выявлен примерно одинаковый характер изменений содержания малонового диальдегида (МДА) и диеновых конъюгатов (ДК) в сыворотке крови крыс. Так, уровень малонового диальдегида в сыворотке крови крыс контрольной группы в среднем составил (0,06 ± 0,004) нг/мл. В то же время на 3-и сутки развития саркомы Walker -256 уровень МДА в сыворотке крови крыс достоверно возрастал и достигал (0,077 ± 0,006) нг/мл (p < 0,05). Однако, на 7-е сутки его содержание было ниже контроля, что не являлось статистически достоверным, а к 14-м суткам наблюдения достигало контрольных цифр, а именно (0,039 ± 0,015) нг/мл и (0,056 ± 0,005) нг/мл. Уровень диеновых конъюгатов в сыворотке крови крыс контрольной группы в среднем составлял (0,39 ± 0,028) нг/мл. Так же как и МДА, к 3-м суткам развития саркомы Walker -256 уровень диеновых конъюгатов в сыворотке крови крыс достоверно возрастал и достиг (0,44 ± 0,015) нг/мл (p < 0,05). На следующих сроках исследования уровень диеновых конъюгатов в сыворотке крови постепенно снижался. Содержание диеновых конъюгатов на 7-е сутки развития саркомы Walker -256 в среднем составило (0,41 ± 0,046) нг/мл, а к 14-м суткам наблюдения практически не отличалось от контрольных величин -(0,38 ± 0,025) нг/мл. Исходя из вышесказанного, на ранних сроках развития карцино-саркомы Walker -256 значительно повышается общая прооксидантная активность в сыворотке крови крыс, что свидетельствует об активации свободно-радикальных реакций перекисного окисления липидов, которые подтверждаются данными определения малонового диальдегида и диеновых конъюгатов. Среднее значение общей антиоксидантной активности (АОА) сыворотки крови интактных крыс составило (9,6 ± 0,08) усл.ед. В динамике развития саркомы Walker -256 величина общей ан-тиоксидантной активности сыворотки крыс на всех сроках наблюдения достоверно была ниже, чем у крыс контрольной группы. На 3-и сутки развития саркомы Walker -256 величина общей антиоксидантной активности сыворотки крови была ниже контрольных величин в 1,3 раза и в среднем она составила (7,38 ± 0,06) усл. ед. (p < 0,05). На последующих сроках наблюдения у крыс с карциносаркомой Walker -256 общая анти-оксидантная активность сыворотки крови продолжала снижаться. К 7-м и
14-м суткам наблюдения средние величины общей антиоксидантной активности сыворотки крови крыс с саркомой Walker -256 были ниже контроля соответственно в 2,4 и 1,6 раза и в среднем составили (4,0 ± 0,03) усл. ед. и (6,0 ± 0,05) усл. ед. (в обоих случаях p < 0,01). Таким образом, в динамике развития саркомы Walker -256 было выявлено закономерное снижение общей антиоксидантной активности сыворотки крови. При этом наиболее значимое снижение общей антиоксидантной активности сыворотки крови наблюдалось к 7-м суткам развития карциносаркомы Walker -256. Данные результаты согласуются с известными фактами, свидетельствующими о том, что опухолевая ткань способна к накоплению естественных и природных антиоксидантов, в результате чего в самой опухоли происходит подавление перекисного окисления липидов, а в нормальных тканях снижается антиоксидантная защита и повышается уровень активных метаболитов кислорода (АМК). Для оценки баланса в системе «оксиданты - антиоксиданты» были произведены расчеты коэффициента соотношения (КС) между показателями про- и антиокси-дантной активности сыворотки крови крыс. Расчет данного параметра обусловлен тем, что в научной литературе активно используется термин «окислительный стресс», который отражает дисбаланс в системе «окси-данты - антиоксиданты» в сторону усиления окислительных процессов. Результаты расчета коэффициента соотношения (КС) про- и антиокси-дантной активности сыворотки крови крыс в динамике развития саркомы Walker -256 выглядели следующим образом. В группе интактных крыс коэффициент соотношения прооксидантной и антиоксидантной активности сыворотки крови в среднем составил (2,48 ± 0,03) усл. ед. В динамике развития саркомы Walker -256 величина коэффициента соотношения прооксидантной и антиоксидантной активности сыворотки крови крыс сильно превышала контрольные цифры. Так, на 3-и, 7-е и 14-е сутки развития саркомы Walker-256 средние величины коэффициента соотношения прооксидантной и антиоксидантной активности сыворотки крови крыс соответственно составили (7,42 ± 0,09) усл. ед., (9,53 ± 0,11) усл. ед. и (5,56 ± 0,07) усл. ед. Стоит заметить, что максимальное значение коэффициента соотношения прооксидантной и антиоксидантной активности сыворотки крови крыс наблюдалось к 7-м суткам развития карци-носаркомы Walker -256.
Выводы. На всех сроках развития саркомы Walker-256 наблюдается достоверное повышение коэффициента соотношения про- и антиок-сидантной активности сыворотки крови крыс, свидетельствующее о смещении баланса в системе «оксиданты - антиоксиданты» в сторону оксидантов, что говорит о развитии окислительного стресса.
Список литературы:
1. Ефремов А. В. Изменение активности перекисного окисления липидов у животных с карциносаркомой Walker-256 под влиянием различных методов лечения / А. В. Ефремов, С. В. Мичурина, Ю. В. Начаров [и др.] // Вестн. новых мед.технологий. - 2008. - Т. ХV, № 3. - С. 22 - 24.
2. Окислительный стресс : патологические состояния и заболевания / Е. Б. Меньщикова, Н. К. Зенков, В. З. Ланкин [и др.]. - Новосибирск: АРТА, 2008. - 284 с.
3. Хегай И. И. Влияние экспрессии гена вазопрессина на рост карциносаркомы Walker 256 у крыс / И. И. Хегай, Н.А. Попова, Л. Н. Иванова // Генетика. - 2000. - Т. 42, № 7. - С. 993-995.
|
