Полное название:

ВЛИЯНИЕ ЛИПОПРОТЕИНОВ ВЫСОКОЙ ПЛОТНОСТИ И КОРТИЗОЛА НА БИОСИНТЕЗ БЕЛКА И ДНК В КЛЕТКАХ АСЦИТНОЙ ГЕПАТОМЫ МЫШЕЙ ЛИНИИ А

НИИ биохимии СО РАМН г. Новосибирск

Эта работа опубликована в сборнике "НАУКИ О ЧЕЛОВЕКЕ" – Сборник статей молодых ученых и специалистов /Под ред. Л.М. Огородова, Л.В. Капилевич. – Томск, СГМУ.- 2002.-254 с.

Скачать сборник целиком

Считается, что связующим звеном кооперативного действия глюкокортикоидов и липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) на генетический аппарат клеток, связаного с усилением экспрессии генов и ускорением биосинтеза белка, является макрофаг [1]. Известно, что макрофаг играет важную роль в противоопухолевой защите. Макрофаг участвует в формировании клеточных реакций «организм-опухоль», о чем свидетельствует феномен макрофагальной инфильтрации практически всех необластом [2]. Фенотипические и функциональные характеристики опухолевых макрофагов, модулируются опухолевым микроокружением, при этом клетки приобретают способность поддерживать гомеостаз опухолевой ткани, участвовать в формировании стромы, регуляции роста опухолевых клеток [3].
Целью настоящего исследования явилось изучение влияния ЛПВП и кортизола на биосинтез белка и ДНК в культуре клеток асцитной гепатомы.
Эксперименты проводились на культуре клеток асцитной гепатомы НА-1. Гепатома НА-1-дифференцированная гепатокарцинома, происходящая из печени мыши-самца линии А/Не, индуцированной орто-аминоазотолуолом. Развившиеся асцитные клетки использовали для перевивки подопытным мышам и получения культуры клеток.
Инкубацию проводили в среде RPMI-1640 без добавления сыворотки при 37С0 в СО2-инкубаторе в следующих вариантах: 1. культивирование клеток асцитной гепатомы, конечная плотность 5x103 клеток/мм2, 2. культивирование клеток асцитной гепатомы без прилипающих клеток (макрофагов), конечная плотность 3-3,5x103 клеток/мм2. Для удаления адгезирующих клеток, через 1 час инкубации содержимое лунки, осторожно, не встряхивая, переносили в другой планшет и продолжали культивировать в аналогичной среде. В культуру клеток добавляли кортизол в дозе 10-6М, ЛПВП - 100 мкг/мл. Биосинтез ДНК определяли по включению 3Н-тимидина в ДНК, биосинтез белка по включению 14С-лейцина в белок через 24 часа инкубации.
При определении биосинтеза ДНК обнаружено, что ЛПВП уменьшали включение 3Н-тимидина в культуре клеток на 36% по сравнению с контролем. Кортизол вызывал снижение биосинтеза ДНК на 19%. Одновременное присутствие ЛПВП и кортизола, напротив, приводило к увеличению биосинтеза ДНК на 29% по отношению к контролю. При определении биосинтеза белка оказалось, что в присутствии ЛПВП отмечалось незначительное увеличение биосинтеза последнего. Кортизол увеличивал данный показатель на 145%. Однако, в присутствии ЛПВП и кортизола биосинтез белка увеличивался на 203%. При определении биосинтеза ДНК в культуре клеток гепатомы без макрофагов, ЛПВП незначительно уменьшали данный показатель, а ЛПВП и кортизол незначительно увеличивали его. Присутствие в среде инкубации кортизола снижало биосинтез ДНК на 46%. ЛПВП совместно с кортизолом не оказывали выраженного влияния на биосинтез белка. Присутствие в среде инкубации либо ЛПВП, либо кортизола приводило к незначительному увеличению биосинтеза белка.
Таким образом, увеличение биосинтеза ДНК и белка в культуре клеток асцитной гепатомы обусловленно кооперативным действием ЛПВП и кортизола. Присутствие макрофагов является необходимым условием для реализации этого эффекта. В культуре клеток асцитной гепатомы без макрофагов кооперативного эффекта ЛПВП и кортизола не наблюдалось.

Литература
1.    Панин Л.Е., Маянская Н.Н. Лизосомы: роль в адаптации и восстановлении. - Новосибирск: Наука, 1987. -
198с.
2.    Steele J. et al. //J. Antimicrob. Chemother. - 1985. - V. 16. - P. 463-468.
3.    Giorno R., Ringel S.P. //Pathol. Immunopathol. Res. -1986. - N. 5. - P. 491-499.