|
Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
Известно, что способность макрофагов к фагоцитозу относится к их важнейшим свойствам [1; 2; 4]. Существенный интерес представляет изучение фагоцитоза у многоядерных макрофагов, в том числе и по сравнению с таковым у мононуклеарных клеток [1]. Так как процессы функционирования (в том числе и реализация фагоцитарной активности) и образования полинуклеаров являются взаимосвязанными, то целесообразно проведение исследований взаимной обусловленности этих реакций. Поскольку показано, что многоядерные клетки макрофагального происхождения формируются при воздействии мурамилдипептида [3], то его использование в качестве модификатора ряда реакций (в частности фагоцитоза) у полинуклеаров не должно быть оставлено без внимания. Оценка генотипической детерминированности динамики изменения ряда показателей фагоцитарной активности у многоядерных макрофагов по сравнению с этими параметрами у мононуклеарных клеток, а также модификация фагоцитарной функции в результате влияния индукторов формирования полинуклеаров, требуют дальнейшего уточнения.
Цель исследования состояла в изучении динамики реализации фагоцитарной функции у генотипически различных полинуклеарных макрофагов, а также в определении особенностей осуществления фагоцитоза у этих клеток при воздействии индукторов формирования многоядерных производных. Эксперимент проводили на культурах перитонеальных клеток, выделенных от мышей линии CBF и C57BL/6. Клетки инкубировали в течение 24 часов. В культуры экспериментальных групп одновременно с посадкой клеток вносили мурамилдипептид. Контролем служили интактные клеточные культуры. Все изменения были описаны относительно контроля. Оценивали такие показатели фагоцитарной активности моно- и полинуклеарных макрофагов, как: фагоцитарный индекс, фагоцитарное число и общая поглотительная активность клеточных субпопуляций. Данные параметры определяли через 20, 40 и 60 минут после внесения гранул зимозана в культуры клеток.
В интактных культурах группы CBF отмечали, что фагоцитарный индекс у многоядерных макрофагов превышал аналогичный параметр у мононуклеарных в 2,4 и в 1,2 раза соответственно через 20 и 40 минут после внесения гранул зимозана в клеточные культуры, и достоверно не отличался от уровня этого показателя у одноядерных клеток через 60 минут после начала экспозиции с гранулами зимозана. Фагоцитарное число у полинуклеаров в культурах данной группы было в 1, 4, в 1,8 и в 1,7 раза выше, чем у одноядерных макрофагов соответственно через 20, 40 и 60 минут экспозиции с гранулами зимозана. Общая поглотительная активность у многоядерных макрофагов превышала указанный параметр у одноядерных клеток в 3,5, в 2,1 и в 1,9 раза соответственно через 20, 40 и 60 минут после внесения гранул зимозана в культуры.
В интактных культурах группы C57BL/6 достоверные различия по некоторым показателям фагоцитарной активности между субпопуляциями моно- и полинуклеарных макрофагов определялись только через 60 минут от начала экспозиции с гранулами зимозана. На этот срок экспозиции фагоцитарный индекс и общая поглотительная активность у многоядерных макрофагов были в 2, 0 раза выше, чем у мононуклеарных, при отсутствии достоверных отличий по показателю фагоцитарного числа между данными клеточными субпопуляциями.
В культурах экспериментальной группы CBF не отмечали достоверного изменения уровня всех учитываемых показателей фагоцитарной активности у многоядерных макрофагов по сравнению с контролем через 60 минут экспозиции клеточных культур с гранулами зимозана. На этот же срок экспозиции у многоядерных макрофагов в культурах экспериментальной группы C57BL/6 наблюдали снижение уровня фагоцитарного числа в 1, 4 раза и уменьшение общей поглотительной активности в 1,8 раза по сравнению с контролем.
На основании вышеизложенного можно заключить, что в культурах всех используемых групп полинуклеарные макрофаги обладали более выраженной фагоцитарной способностью по сравнению с мононуклеарными. Динамика самого процесса фагоцитоза свидетельствует о прогрессивном уменьшении существующих различий между поли- и мононуклеарными макрофагами по уровням показателей фагоцитарного индекса и общей поглотительной активности, что указывает на постепенное увеличение численности одноядерных клеток, фагоцитировавших гранулы зимозана. Однако данные различия остаются все-таки весьма значительными ввиду изначально более высокого уровня фагоцитарной активности у полинуклеаров, что, вероятно, обусловливает продолжающееся возрастание количества поглощенных гранул зимозана. Межлинейные различия касаются более высокого уровня фагоцитарной активности у полинуклеаров, входящих в состав культур перитонеальных клеток, выделенных от животных линии CBF, по сравнению с культурами клеток, полученными от животных линии C57BL/6.
Влияние мурамилдипептида на изменение фагоцитарной активности макрофагов выражалось в подавлении таковой у полинуклеаров в культурах группы C57BL/6. Присутствие данного агента практически не модифицировало фагоцитарную активность у полинуклеаров в составе культур клеток, выделенных от животных линии CBF. Отмеченные факты свидетельствуют о генотипической обусловленности процесса фагоцитоза у многоядерных макрофагов. Следует предположить, что подавление фагоцитарной активности у полинуклеаров в культурах группы C57BL/6 могло быть связано с переключением внутриклеточных процессов у многоядерных макрофагов преимущественно на реализацию синтетической функции вследствие индуцирующего влияния мурамилдипептида на активизацию продукции ряда цитокинов.
Дальнейшее изучение аспектов реализации фагоцитарной функции у полинуклеарных макрофагов, представляющей собой одно из основных проявлений функциональной активности этих клеток, должно способствовать пониманию особенностей поведения многоядерных производных в различных патологических условиях.
Список литературы:
1. Felipe I., Oliveira-Castro G.M. Reception-mediated phagocytosis of yeast by macrophage polykarions // Braz. J. Med. Biol. Res. - 1987. - V. 20. - № 1. - P. 79-91.
2. Leichtle A., Hernandez M., Ebmeyer J., Yamasaki K., Lai Y., Radek K., Choung Y.H, Euteneuer S., Pak K., Gallo R., Wasserman S.I., Ryan A.F. CC chemokine ligand 3 overcomes the bacteriocidal and phagocytic defect of macrophages and hastens recovery from experimental otitis media in TNF-/- Mice // J. Immunol. - 2010. - V. 184. - № 6. - P. 3087-3097.
3. Mizuno K., Okamoto H., Horio T. Muramyl dipeptide and mononuclear cell supernatant induce Langhans-type cells from human monocytes // J. Leukoc. Biol. - 2001. - V. 70. - № 3. - P. 386-394.
4. Wiersinga W.J., Kager L.M., Hovius J.W., van der Windt G.J., de Vos A.F., Meijers J.C., Roelofs J.J., Dondorp A., Levi M., Day N.P., Peacock S.J., van der Poll T. Urokinase receptor is necessary for bacterial defense against Pneumonia-derived septic melioidosis by facilitating phagocytosis // J. Immunol. - 2010. - V. 184. - № 6. - P. 3079-3086.
|
