Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Этиопатогенез кистозных овариальных образований изучен не достаточно [1, 2, 3, 4].
Цель данного исследования – изучить морфогенез и функциональное состояние яичников в условиях формирования кистозных образований, индуцированных хорионическим гонадотропином (ХГ) и инсулином.
Эксперимент выполнен на 60 половозрелых крысах-самках массой 180?200 г., находящихся в фазах покоя эстрального цикла, который контролировался кольпоцитологически. Животным основной группы (n=48) при помощи инсулинового шприца внутримышечно в ягодичную область в течение 7 дней вводили суперовуляторную дозу ХГ. Аналогичным образом вводили инсулин в дозе, формирующей умеренную гиперинсулинемию. Контролем служили интактные животные (n=12). После 7-дневного введения ХГ и инсулина у всех крыс наступал непрерывный эструс. Крыс выводили из эксперимента под эфирным наркозом в различные сроки после окончания введения гормонов. Тотчас после взятия яичники фиксировали в жидкости Карнуа и нейтральном формалине. Депарафинированные серийные, толщиной 5?6 мкм, срезы окрашивали гематоксилином и эозином, по Ван-Гизону. Подсчет фолликулярных и лютеиновых кист, примордиальных и растущих фолликулов, атретических фолликулов и тел, желтых тел проводили на серийных срезах через каждые 150?200 мкм ткани яичника. Материалы морфоколичественного анализа обрабатывались по правилам параметрической статистики (t-критерий Стьюдента). Различия считали достоверными при p<0,05. В сыворотке крови крыс определяли уровень эстрадиола, тестостерона, ДГА-S-методом иммуноферментного анализа в различные сроки опыта.
К 3-м суткам после окончания введения ХГ и инсулина формировались различные по величине кисты, как правило, на стадии граафова пузырька, при этом неотъемлемой частью формирования кист являлись полная дегенерация и цитолиз овоцитов. Обращали на себя внимание выраженная гипертрофия клеток внутренней теки и железистый метаморфоз в отдельных кистах. Просветы кист, заполненные агглютинированными и лизированными эритроцитами, свидетельствовали о кровоизлияниях, осложнённом течении кист. Выявлялось достаточно много растущих фолликулов, большая часть которых характеризовалась различного рода дегенеративными изменениями. Примордиальные фолликулы имели обычное строение. В фолликулярном эпителии встречались апоптотические тельца. Кровеносные сосуды коркового и мозгового веществ, как правило, были расширены и гиперемированы. К 5?10-м суткам эксперимента морфология яичников крыс в целом мало чем отличалась от описанной на 3-и сутки опыта. Сохранялось большое количество кистозно-атрезированных фолликулов с различного рода дегенеративными изменениями. При этом отмечалась выраженная пролиферация гормонопродуцирующей ткани. Обнаруживались растущие фолликулы, примордиальные фолликулы, имеющие обычное строение. Встречались желтые тела, кисты с лютеинизированной стенкой. К 15-м и 30-м суткам морфологическая картина яичников была сходной с описанной в предыдущие сроки, несколько уменьшалось количество кистозно-атрезированных фолликулов, сохранялись кисты с кровоизлияниями в просвет. Процессы дегенерации растущих фолликулов были менее выражены. К 60-м суткам эксперимента сохранялась гиперемия сосудов мозгового вещества. Больших кистозных полостей не было, но сохранялись мелкие кистозно-атрезирующиеся фолликулы. Процессы образования новых кист шли на убыль. В небольшом количестве встречались жёлтые тела. Содержание интерстициальной железистой ткани, гормонопродуцирующих клеток атретических тел снижалось.
Морфоколичественный анализ показал, что 7-дневное введение ХГ и инсулина вызывает резкую стимуляцию развития всех форм растущих фолликулов и граафовых пузырьков, о чем свидетельствовало достоверное увеличение среднего содержания в срезах первичных, вторичных и третичных фолликулов на 3-и сутки, достигая максимума к 15-м суткам наблюдения (14,60±0,58 по сравнению с 7,11±0,48 у интактных крыс, p<0,05). Однако с 30-х суток содержание растущих фолликулов уменьшалось, а к 60-м было достоверно не отличимым от такового у интактных животных – 8,10±0,22 (контроль – 6,97±0,23). К 3-м суткам наблюдения параллельно с ростом фолликулов достоверно увеличивалось количество фолликулярных и лютеиновых кист до 3,00±0,22 и 2,65±0,15 соответственно при 0,46±0,14 и 0,07±0,00 в контроле (p<0,05). В дальнейшем на протяжении эксперимента количество фолликулярных кист уменьшалось и достигало к 60-м суткам эксперимента 1,35±0,12, что достоверно не отличалось от такового в контроле – 0,11±0,04. При этом лютеиновые кисты не выявлены к концу 60-х суток. Количество атретических фолликулов и тел в течение всего опыта было достоверно ниже такового у интактных крыс и составляло к 60-м суткам эксперимента 1,95±0,13 по сравнению с 5,28±0,13 в группе интактных животных. Содержание примордиальных фолликулов на протяжении всего эксперимента достоверно не отличалось от такового в контрольной группе. Однако к 15-м суткам имелось некоторое увеличение (9,1±0,45 при 6,88±0,21 в контроле). Вероятнее всего, это связано с уменьшением числа больших кистозных образований к 15?30-м суткам, затрудняющих визуализацию и подсчёт примордиальных фолликулов. Стимуляция роста фолликулов после введения ХГ и инсулина вела к резкому увеличению содержания желтых тел, что проявлялось их максимальным увеличением на 5-е сутки наблюдения (13,30±0,47 при 3,94±0,32 в контроле, p<0,05). Количество жёлтых тел оставалось повышенным вплоть до 60-х суток эксперимента.
Исследование уровня половых гормонов в сыворотке крови крыс выявили достоверное увеличение средней концентрации эстрадиола к 10-м суткам эксперимента ? 235±13,3 пкмоль/л, при этом на 3-и сутки концентрация эстрадиола достоверно не отличалась (72,5±1,3 пкмоль/л) от исходной ? 71,4±0,9 пкмоль/л (группа контроля) (p<0,05). Кроме того, к 3-м суткам опыта отмечалось достоверное увеличение средней концентрации тестостерона – 4,12±0,2 нмоль/л, уровень которого оставался повышенным и на 10-е сутки эксперимента – 3,53±0,4 нмоль/л, при 2,45±0,23 нмоль/л в контрольной группе (p<0,05). Интересным остаётся тот факт, что предшественник тестостерона – дегидроэпиандростерона сульфат практически не определялся в сыворотке крови крыс, что, по-видимому, обусловлено видовыми особенностями экспериментальных животных. В проанализированной литературе подобных данных не обнаружено.
Таким образом, 7-дневное введение ХГ в суперовуляторной дозе и гиперинсулинемия формирует у крыс-самок кистозные овариальные образования с преобладанием фолликулярных кист. По-видимому, ХГ и инсулин однонаправленно действуют на овариальный стероидогенез, стимулируют продукцию андрогенов, эстрогенов гранулёзными и текальными клетками, о чём свидетельствуют данные гормонального исследования. Функциональный характер кист подтверждается данными морфоколичественного анализа (достоверно не отличимое от контроля количество кистозных образований на 60-е сутки эксперимента).

Список литературы:
1. Дубровина, С. О. Концентрация стероидных гормонов в пунктате первичных и рецидивирующих кист яичников. / С. О. Дубровина // VI Российский форум “Мать и Дитя”: Тез. докл. – М. : Москва, 2004. – С. 343?344.
2. Дубровина, С. О. Апоптоз в патогенезе кист яичников. / С. О. Дубровина // VI Российский форум “Мать и Дитя”: Тез. докл. – М. : Москва, 2004. – С. 344?345.
3. Poretsky, L. Hyperinsulinemia and human chorionic gonadotropin synergistically promote the growth of ovarian follicular cysts in rats / L. Poretsky, J. lemons, K. Bogovich // Metab, 1992. – Vol. 41, № 8. – P. 903?910.
4. Bogovich K, Clemons J, Poretsky L. Insulin has a biphasic effect on the ability of human chorionic gonadotropin to induce ovarian cysts in the rat. / K. Bogovich, J Clemons, L Poretsky. // Metab, 1999. – Vol. 48, № 8. – P. 995?1002.