ГУ НИИ психического здоровья  ТНЦ СО РАМН, г. Томск

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 68-й научной итоговой студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 20-22 апреля, 2009 год); под реакцией академика РАМН В.В. Новицкого, член. корр. РАМН Л.М. Огородовой

Посмотреть титульный лист сборника

Скачать сборник целиком (1,5 мб)

 

Шизофрения - заболевание неустановленной этиологии, склонное к хроническому течению. Она проявляется  типичными изменениями личности больного, различными по степени выраженности другими психическими расстройствами, часто приводящими к стойким нарушениям социальной адаптации и трудоспособности.  Не смотря  на длительное изучение  заболевания, до сих пор не удавалось обнаружить сколько-нибудь достоверных признаков, свидетельствующих о наличии биохимического дефекта, строго специфичного для шизофренического процесса или какой-то его клинической формы.
  Одна из теорий  шизофрении, аутоинтоксикационная,   связана с обнаружением в организме больных разнообразных белковых, низкомолекулярных физиологически активных субстанций, дающих нейротропные эффекты. Кроме того, для любой патологии известно, что Заболевание может быть инициировано любыми внешними факторами, но его подлинная причина связана с неправильным функционированием белка. И хотя ошибка закодирована в геноме, ее последствия проявляются на уровне белка, а не на уровне самого гена.  Но поиски ключевого регуляторного белка шизофрении, либо белка являющегося маркёром этой болезни пока не привели к результатам. Поэтому для шизофрении актуален поиск специфических для  этого заболевания изменений в протеоме. Первым этапом этой трудоёмкой работы явилось выявление различий в спектре белков плазмы крови больных шизофренией и психически и соматически здоровых лиц с помощью электрофореза.
В работе проанализирован белковый спектр плазмы крови 29 человек.  20 человек из обследованных, находились на лечении в отделении эндогенных расстройств НИИ психического здоровья СО РАМН г. Томска, 9 человек представляли контрольную группу лиц, психически и соматически здоровых. Работа была проведена на базе Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН Г. Новосибирск, в лаборатории исследования модификации биополимеров. Руководитель лаборатории д.х.н., профессор Фёдорова О.С.
Исследуемая сыворотка крови, после 5-кратного разведения буфером ПБС, центрифугирования и фильтрованием через стандартный фильтр диаметром 22 микрона была подвергнута аффинной хроматографии на хроматографе фирмы Agilent Technologies c целью отделения 6 мажорных белков. С помощью аффинной хроматографии из исследуемой плазмы были удалены альбумин, иммуноглобулин G, иммуноглобулин А, антитрипсин, трансферин и гаптоглобин. В ходе хроматографии каждый образец делился на 4-7 фракций втечении 1 - 2,5 часов, после чего очищенные белки концентрировали с помощью центрифужных ультрафильтров  Амикон-ультра на 5 кДа.  В последующем образцы были подвергнуты вертикальному электрофорезу в полиакриламидном геле с начальным напряжением 150 V.
По результатам электрофоретического разделения белков плазмы крови пациентов с диагнозом шизофрения и здоровых людей выявлены различия в распределении белков, представленные в Таблице.

Таблица

область	шизофрения	контроль
155-195 кДа	широкая интенсивная полоса  шириной 30-40 кДа	полоса отсутствует,  либо узкая 5кДа
75 - 155 кДа	4-6 полос разной интенсивности	1-2 полосы 90-98 кДа
37 – 47 кДа	широкая интенсивная полоса или две узких	одна менее интенсивная полоса
25 кДа	одна или две узких	широкая интенсивная полоса
> 25 кДа	одна слабая полоса	3-6 полос разной интенсивности

  Таким образом, выявлены существенные различия в электрофоретическом распределении белков у больных шизофренией, в отличии от группы здоровых лиц. Выявленные изменения в  спектре распределения белков, могут носить как качественный, так и количественный характер и могут быть обусловлены различными причинами – от изменения конформационной структуры белков и появления белков свойственных данному патологическому процессу, до изменения белкового спектра под действием  проводимой терапии. Это явление может иметь патогенетическое значение, поскольку белки участвующие в основных пластических и энергетических процессах мозга,  в окислительных реакциях, сопрягают различные метаболические процессы, участвующие в патогенезе психических расстройств. Электрофоретический анализ распределения белков – лишь одно звено в комплексном исследовании патологически изменённых белков при шизофрении. Данная работа при её завершении будет способствовать повышению эффективности диагностики этого заболевания и подбора адекватного терапевтического воздействия.