Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 65-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2006 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.

Посмотреть титульный лист сборника

Скачать сборник целиком (1,5 мб)

Муковисцидоз (МВ) – одно из наиболее частых моногенно наследуемых заболеваний с полиорганной манифестацией. Ежегодно в России рождается 650 детей, больных муковисцидозом. В Российском центре МВ на учете стоит 1600 человек, 88 % из них дети и подростки [1]. МВ – это заболевание, имеющее большое медико-социальное значение, так как требует постоянного проведения лечебных мероприятий, дипансерного наблюдения, полимедикаментозной терапии, приводит в ранней инвалидизации и, в конечном счете, к низкой продолжительности жизни. Так, средняя продолжительность жизни больных МВ в развитых странах в 2002 г. составила 32 года, в России в 2001 г. – 24 года [1].

МВ – рассматривается как модель для разработки принципов борьбы с наследственными болезнями. Выделен ген заболевания, доступный для прямой ДНК – диагностики [2]. Это дает возможность эффективно осуществлять первичную профилактику, т. е. предупреждение рождения больного ребенка, путем выявления носителей и ранней пренатальной диагностики и открывает перспективы генной терапии этого заболевания.      

Целью нашего исследования стало определение клинико-генетических особенностей детей г. Томска, больных муковисцидозом. Мы сделали попытку установить ассоциацию интерлейкина 1 (IL1b – +3953 А₁/А₂), антагониста рецептора интерлейкина 1  (IL1Rа – VNTR), интерлейкина 4 (IL4 – 3^¢-UTR G/C), рецептора интерлейкина 4 (IL4 RA – I50V) с муковисцидозом.

Методы:

1.       Клинико-генеалогическое обследование (сбор генеалогического анамнеза, анализ медицинской документации, общеклиническое обследование в соответствии с принятыми стандартами [1]).

2.       Генетические методы: выделение ДНК и определение  полиморфизмов генов кандидатов: интерлейкина 1 (IL1b – +3953 А₁/А₂), антагониста рецептора интерлейкина 1  (IL1Rа – VNTR), интерлейкина 4 (IL4 – 3^¢-UTR G/C), рецептора интерлейкина 4 (IL4 RA – I50V) с помощью полимеразной цепной реакции.

Статистический анализ проводили с применением программ STATISTICA 5.0, Microsoft Excel-97. Сравнение распределения генотипов и частот аллелей – с помощью критерия χ² с поправкой Йетса на непрерывность [3]. Для оценки ассоциаций полиморфных вариантов генов с патологическим фенотипом рассчитывали относительный риск (RR) по формуле: RR=ad/bc, где а – частота анализируемого аллеля у больных; b – частота анализируемого аллеля в контрольной выборке; c и d – суммарная частота остальных аллелей у больных и в контроле соответственно [4]. RR = 1 рассматривали как отсутствие ассоциации, RR > 1 – как положительную ассоциацию («фактор риска») и RR < 1 – как отрицательную ассоциацию аллеля с заболеванием.

Результаты. В Томске на 01.01.2006 г. на диспансерном учете состоят 16 детей, больных МВ, из них 9 мальчиков (56,25 %) и 7 девочек (43,75 %). В возрасте от 1 года до 4 лет были обследованы 2 ребенка, от 4 до 15 лет – 12 детей, от 15 до 18 лет – 2 детей. Среди пациентов преобладала смешанная форма заболевания – 68,75 %, легочная форма составляла  25 %, кишечная – 6,25 %. Легкая степень тяжести отмечалась у 31,25 % детей (из них 1 – кишечная, 4 – легочная), средняя степень тяжести – 50 % детей (смешанная), тяжелая –18,75 % детей (смешанная).

Анализ медицинской документации показал, что имела место поздняя диагностика МВ. Так, на первом году жизни диагноз был выставлен только у 18,75 % (3) детей, проявлениями МВ были: у одного ребенка – мекониальный илеус, у двоих детей – рецидивирующая пневмония. У 68,75 % (11) больных диагноз был установлен в возрасте от 3 до 6 лет,  после 6 лет – у 12,5 % (2) детей. Эти пациенты наблюдались со следующими диагнозами: рецидивирующий бронхит, бронхиальная астма, дисбактериоз, хронический колит.

Хлориды пота при постановке диагноза в 87,5 % случаев не превышали 60–80 мэв/л и только в 12,5 % достигали цифры более 90 мэв/л. В катамнезе значение хлоридов пота у 4 человек достигли нормы, у 12 больных - пограничных значений.           

При анализе микрофлоры мокроты высев St. aureus наблюдался в 100 % случаях, St. viridans – в 19 %, H. Influenzae – в 25 %, P. aeruginosa – в 18,75 % (2 ребенка с тяжелой степенью).

Нами были выявлены следующие осложнения МВ: бронхоэктазы – у 3 больных, дыхательная недостаточность – у 2 больных (с тяжелой степенью тяжести), жировой гепатоз печени – у 3 больных, остеопороз – у 3 детей, задержка физического развития – у 5 детей. Практически в 90 % случаях больные предъявляют жалобы на боли в животе, неустойчивый стул.

Изучение полиморфизмов генов модификаторов воспаления, ответственных за иммунитет, показало наличие статистически значимой ассоциации с заболеванием (RR = 2,04; р=0,033) только для полиморфизма VNTR антагониста рецептора интерлейкина 1  (IL1Rа)(табл.).  
      Таким образом, хронический воспалительный процесс при данной патологии, возможно, связан с VNTR полиморфизмом рецепторного антагониста интерлейкина 1β, выполняющего функцию специфического блокатора биологического действия данного интерлейкина, что обусловливает затяжное течение инфекционно-воспалительного процесса. Определение роли генов цитокинов в поддержании воспалительного процесса при муковисцидозе является перспективным направлением и требует дальнейшего изучения.

Таблица

Сравнительный анализ распределения частот аллелей
полиморфизмов генов в группе контроля и у больных муковисцидозом

Список литературы:

1.     Капранов, Н.И., Каширская, Н.Ю. Муковисцидоз. Современные достижения и актуальные проблемы: методические рекомендации. – М., 2005.

2.     Иващенко, Т.Э., Баранов, В.С. Биохимические и молекулярно-генетические основы патогенеза муковисцидоза.- М.:«Интермедика», 2002. −С.256.

3.     Флейс, Д. Статистические методы для изучения таблиц долей и пропорций. – М., 1989.

4.     Thompson G. A. Handbook of Hyperlipiemia. – 2-nd Ed./ - London, 1994