СГМУ, г. Томск

Целью настоящего исследования явилось проведение морфоколичественного анализа генеративных элементов яичников белых крыс в различные сроки после монополярной коагуляции.
Материал и методы исследования: эксперимент проведен на 75-и беспородных половозрелых крысах-самках. Выбор в качестве экспериментального материала крыс обусловлен тем, что регуляция овариально-менструального цикла у них наиболее близка таковым у женщин, и, в отличие от других животных, происходит спонтанная овуляция [1]. Оперативное вмешательство проводили в асептических условиях под масочным наркозом парами эфира. Животных фиксировали в положении на спине на нейтральном электроде, равномерно обернутом марлей; материал обильно смачивали физиологическим раствором. Операционное поле широко и тщательно выбривали, кожу животных обрабатывали спиртом и 5% йодной настойкой. Производили срединную минилапаротомию (длина разреза не превышала 10-12 мм). Маточные рога и яичники бережно, с помощью инструментов для производства микрохирургических операций, выводили в рану и обкладывали стерильными марлевыми салфетками, увлажненными физиологическим раствором. Животным основной группы (n=60) проводилась монополярная коагуляция яичников игольчатым электродом диаметром 1 мм (аппарат электрохирургический высокочастотный С-350 РЧ «ЭЛЕКТРОПУЛЬС», мощность коагуляции 60 Вт, г. Томск) симметрично в 4-х точках на глубину не более 2-3мм по ограничителю (время экспозиции - 1 секунда), исключая область ворот яичника. Операционную рану ушивали послойно (брюшину и мышцы вместе с использованием современного шовного материала - ПДС, на кожу отдельные шелковые швы), обрабатывали раствором йодинола. Оперативное вмешательство проводили в соответствии с принципами безопасности в электрохирургии [2]. Длительность операции составляла не более 8-10 минут. Контрольную группу составили интактные животные (n=15). Крыс выводили из эксперимента декапитацией под эфирным наркозом в стадию диэструса на 3-й, 5-е, 10-е, 15-еи 30-е сутки эксперимента с соблюдением правил работы с экспериментальными животными. Всем крысам проводили кольпоцитологическое исследование для определения стадии эстрального цикла. Влагалищные мазки брали ежедневно путем смыва содержимого влагалища дистиллированной водой из пипетки.
Тотчас после взятия яичники фиксировали к жидкости Карнуа. Депарафинированные срезы толщиной 5-6 мкм окрашивали гематоксилином-эозином и по Ван-Гизону. Морфоколичественный анализ структурной перестройки тканевых компонентов яичников проводили с помощью окулярной измерительной сетки, состоящей из большого квадрата, содержащего 25 точек. [3]. Подсчет примордиальных и растущих (первичных, вторичных, третичных) фолликулов, атретических фолликулов и тел, желтых тел проводили на серийных срезах через каждые 150-200 мкм ткани яичника.
Полученные цифровые данные морфоколичественного анализа обработаны статистически параметрическим (критерий Стьюдента). Различия сравниваемых результатов считались достоверными при р<0,05.
Результаты и выводы. Показательной и функционально значимой для выявления эффектов электрохирургии представляется динамика фолликулярного аппарата яичников, результаты морфоколичественного изучения которой представлены на таблице 1.


Таблица 1.

Содержание генеративных элементов в срезах яичников белых крыс при монополярной коагуляции в различные

Вилы воздействия и сроки опыта	ср Примордиальные фолликулы	оки опыта. Растущие фолликулы	Атретические фолликулы и тела	Желтые тела
Интактные животные: 3-15 сутки 30 сутки	6,877+0,299 6,265+0,201	7,109+0,477 7,023+0,244	4,081+0,041 4,889+0,123	3,935+0,325 3,214+0,213
Основная группа: 3 сутки 5 сутки 10 сутки 15 сутки 30 сутки	4,272+0,281* 4,871+0,196* 3,384+0,185* 3,491+0,315* 3,011+0,261*	9,187+0,381* 10,909+0,235* 6,013+0,169* 7,039+0,547 3,762+0,278*	11,857+0,258* 10,923+0,285* 9,915+0,273* 11,556+0,467* 6,686+0,352*	7,941+0,391* 4,883+0,263 3,652+0,242 2,583+0,454* 3,748+0,273
Примечание. p<0,05 по сравнению с интактными животными.

 

 
При анализе цифровых данных выраженной возрастной динамики генеративных элементов в группе интактных животных за 30 суток наблюдения не выявлено. Имеется только тенденция к снижению содержания примордиальных фолликулов и повышению содержания атретических фолликулов и тел. Количество растущих фолликулов и желтых тел в возрастных рамках эксперимента остается относительно стабильным.
Монополярная коагуляция вызывает усиленный рост фолликулов в ранние сроки после операции, о чем свидетельствует достоверное увеличение содержания вторичных и третичных фолликулов на 3-й сутки, достигая максимума к 5-м суткам наблюдения. Поэтому можно говорить о кратковременном стимулирующем эффекте монополярной коагуляции в ранние сроки после операции. Однако с 10-х суток содержание фолликулов аналогично таковым у интактных животных, ак 30-м резко снижается ниже исходного уровня (p<0,05). С 3-х суток наблюдения параллельно с ростом фолликулов усиливаются процессы атрезии. Этот процесс выражен на всем протяжении эксперимента и превалирует над процессами роста и созревания генеративных элементов. С одной стороны, это может быть обусловлено непосредственным повреждающим действием электрического тока. С другой стороны, гемодинамическая, гемореологическая и воспалительная реакции в перифокальной области вызывают изменения в соматическом окружении фолликулов, что создает предпосылки для патологической атрезии. Содержание примордиальных фолликулов с 3-х суток после операции достоверно снижается (p<0,05). Очевидно, часть из них непосредственно повреждена в зоне коагуляции, часть подвергается патологической атрезии по причине гемодинамических, гемореологических и воспалительных изменений в перифокальной области, остальные вступают в стадию роста. Стимуляция роста фолликулов в ранние сроки после операции ведет к кратковременному увеличению содержания желтых тел на 3-5-е сутки наблюдения, затем их количество снижается ниже исходного уровня.
Таким образом, изменения генеративного аппарата яичников при монополярной коагуляции проявляются деструкцией части растущих фолликулов, усилением атретических процессов. Примордиальные фолликулы устойчивы к воздействию повреждающего фактора.
 
Список литературы.
1.  Лазарев Н.И., Ирд Е.А., Смирнова И.О. Экспериментальные модели эндокринных гинекологических заболеваний. - М: Медицина, 1967.
2.  Кулаков В.И., Адамян Л.В., Мынбаев О.А. Оперативная гинекология - хирургические энергии. - М.: Медицина, 2000. - 860 с. 3.   Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. - М.: Медицина, 1990. - 384 с.