ГУ НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН, г. Новосибирск

Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 64-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2005 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.

Скачать сборник целиком (1 мб)

Острый лимфобластный лейкоз является самым частым онкологическим заболеванием детского возраста и составляет приблизительно 25% от всех злокачественных новообразований в педиатрии. Заболеваемость в развитых странах составляет 3-4 случая на 100 тыс. детского населения в год. В большинстве случаев конкретная причина возникновения острого лимфобластного лейкоза неизвестна [1]. Однако повышенная чувствительность к заболеванию может обусловливаться генетическими факторами, в том числе межиндивидуальным различием в биоактивации проканцерогенов и детоксикации канцерогенных веществ. Основными механизмами в метаболизме ксенобиотиков является функционирование ферментов II фазы биотрансформации, а также АТФ - зависимых транспортных белков [2].

Разные полиморфные варианты глутатион-S-трансферазы P1 в 5 экзоне проявляют различную каталитическую активность в отношении полициклических ароматических углеводородов, что, возможно, обусловливает различную чувствительность к онкологическим заболеваниям. Так, для GSTP1 показана ассоциация между генотипом и предрасположенностью к заболеванию раком легкого, простаты, мочевого пузыря и желудочно-кишечного тракта [2].

Ген MDR1 человека кодирует интегральный мембранный белок Р-гликопротеин. Ген MRP1 кодирует белок MRP. Функцией этих белков является АТФ-зависимый транспорт веществ из клетки. Их физиологической ролью является участие в метаболизме стероидов, а также защита клеток от токсических соединений. Возможно, изменение функциональной активности этих белков может влиять на чувствительность к онкологическим заболеваниям. Гены MDR1 и MRP1 являются высоко полиморфными. Пока непонятна значимость различных вариантов полиморфизма MDR1, MRP1 для метаболизма токсических веществ в организме человека, и не определена значимость многих мутаций в генах MDR1, MRP1 для формирования предрасположенности к различным формам рака [3].

Таким образом, исследование полиморфизмов данных генов поможет прояснить значение этих мутаций для функции, кодируемых ими белков и для ассоциаций различных генотипов с риском развития онкологических заболеваний.

Целью настоящей работы является исследование взаимосвязи полиморфных вариантов гена MDR1 (21 и 26 экзоны), MRP1 (13 экзон), GSTP1 (5 и 6 экзон) с предрасположенностью к острому лимфобластному лейкозу у детей, а также роли полиморфизма гена MDR1 для функциональной активности P-гликопротеина.

Анализ полиморфизма гена MDR1, MRP1, GSTP1 был проведен у 30  здоровых детей и у 26 детей больных острым лимфобластным лейкозом методом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов. Об ассоциации полиморфных вариантов гена MDR1, MRP1, GSTP1  у детей с острым лимфобластным лейкозом судили по величине отношения шансов (ОШ), показывающей, во сколько раз выше вероятность оказаться больным для индивида с определенным генотипом, чем остаться здоровым.  Функциональная активность Р-гликопротеина определялась на основе флюоресценции родамина 123 с использованием ингибитора верапамила на проточном цитофлюориметре и расчитывалась как отношение геометрических средних флюоресценции  в присутствии верапамила и без него. Статистический анализ проводили с помощью компьютерных программ EpiInfo 6 и STATISTICA 5.

В таблице представлены  данные о частоте мутантных аллелей у здоровых детей и больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ)

Анализ полиморфных вариантов гена MDR1 показал, что у детей, имеющих мутантный аллель 2677T в 21 экзоне гена MDR1 риск возникновения острого лимфобластного лейкоза выше (ОШ=4.67, p=0.04) по сравнению с гомозиготами дикого типа G2677G. Аналогичная связь наблюдается для гена GSTP1: вероятность заболеть острым лимфобластным лейкозом у детей с наличием мутантного аллеля 313G  в 5 экзоне выше, чем у носителей генотипа A313A. Напротив, мутантный аллель 1684C в 13 экзоне гена MRP1 является фактром устойчивости к данному заболеванию (ОШ=0.22, p=0.04). Для полиморфизмов C3435T в 26 экзоне гена MDR1, A1218+8G в 9 интроне гена MRP1 и C341T в 6 экзоне гена GSTP1 достоверных ассоциаций выявлено не было (ОШ=2.0, p=0.54; ОШ=1.05; р=0.80 и ОШ=1.24, p=0.89 соответственно).

Анализ ассоциаций полиморфизмов гена MDR1 и функциональной активности Р-гликопротеин в лимфоцитах у больных детей с острым лимфобластным лейкозом не выявил достоверных связей.

Список литературы:

1. Клиническая онкогематология / Под ред. М.А. Волковой.-М. : Медицина, 2001.-156 с;

2. Yuille, М. Relationship between glutathione S-transferase M1, T1, and P1 polymorphisms and chronic lymphocytic leukemia / M. Yuille // Blood.-2002.- Vol. 99, № 11.- p. 4216-4218;

3. The human ATP-binding cassette (ABC) transporter superfamily / M. Dean, Y. Hamon, G. Chimini // Journal of lipid research. - 2001. - Vol. 42.- p. 1007-1017.