Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам пятого конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича.- Томск, СибГМУ.- 2004.- 413 с.
Скачать сборник целиком
Введение: Достижения современной биологии и медицины позволяют целый ряд патологических состояний трактовать с т. з. патологии мембран. В частности показано, чю эндогенная интоксикация различного генеза вызывает повреждение эритроцитов, стимулируя в них процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) при одновременном снижении антиоксидантной защиты (АОЗ) [3].
Изменение свойств мембран гепатоцитов, синхронное с поражением эритроцитар-пых мембран, показано в работе Блюгера А.Ф. и соавт.[1].
Целью исследования явилась оценка системы ПОЛ - антиоксидант эритроцитов и функционального состояния печени при экспериментальном бластоцистозе.
Материалы и методы; Исследования проводились на самцах беспородных белых крыс массой 180-200 г. Животных заражали лабораторным штаммом Blastocystis hominis, который получали путем культивирования простейших в среде Suresh, при температуре 37° С в течение 3 суток. Ежедневно в течение 3 дней животным вводили per os no 1 мл взвеси простейших в концентрации 106 - 107 мл [4]. Анализ крови проводили на 1, 3, 7 и 14 сутки после завершения инфицирования. Контролем служили здоровые животные.
Для оценки функционального состояния печени при экспериментальном бластоцистозе определялся уровень активности гепатоспецифичных ферментов: трансаминаз (AJIT, ACT), лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и щелочной фосфатазы (ЩФ) на автоматическом биохимическом анализаторе Hitachi 911 (Австрия). Состояние процесса своднорадикаль-ного окисления в эритроцитах оценивали по активности в них ферментов-антиоксидантов:
каталазы и глутатионредуктазы (ГР) и содержанию МДА [2].
Результаты и обсуждение. Показатели крови, отражающие функциональное состояние печени представлены в таблице 1. Известно, что спектр ферментов в крови отражает степень клеточной патологии определенного органа. Повышение в крови активности мембраносвязанного (ЩФ), цитоплазматических (АлТ, ЛДГ) и митохондриально-цигоплазматического (ACT) ферментов, которое наблюдается на всех сроках эксперимента, свидетельствует о поражении гепатоцитов по цитолитическому типу вследствие усиления ПОЛ их мембран.
В результате оценки системы ПОЛ - АОЗ эритроцитов получены следующие данные. На 1 сутки после завершения инфицирования увеличился уровень активности фермента-антиоксиданта - каталазы до 66,10±0,94 ммоль/л*с против контрольного значения - 63,29±2,64 ммоль/л*с, что можно рассматривать как приспособительную реакцию организма в ответ на усиление процессов ПОЛ. К 3 и 7 суткам активность каталазы достоверно снизилась и составила 61,58±0,94 и 51,75±2,25 ммоль/л*с соответственно. На 14 сутки уровень активности данного фермента приблизился к контрольному показателю и составил 54,97±2,33 ммоль/л*с.
Таблица 1
Гепатоспецифичые ферменты крови при экспериментальном бластоцистозе
|
Показатели
(сд.акт/л) |
Контроль (n=8) |
1 сутки (n=8) |
3 сутки (n=8) |
7 сутки (n=8) |
14сутки (n=8) |
АСТ |
168 ±9 |
166 ±18 |
182±35 |
237±18* |
190± 15* |
АЛТ |
56 ±7 |
78 ±9* |
75 ± 15* |
95 ±5* |
83 ± 10* |
ЩФ |
371 ± 17 |
483 ± 81 * |
449 ± 32* |
745 ± 76* |
496±28* |
ЛДГ |
2060 ± 69 |
2260 ±378 |
2162±518 |
3896± 225* |
2585±111* |
Примечание: здесь и далее * - достоверность различий с контролем р< 0,05; n=8
Уровень активности ГР достоверно и существенно снижался на всех исследованных сроках после окончания инфицирования. К 1 суткам он составил 4,74±2,20 мкмоль/л*с против 39,58± 7,50 мкмоль/л*с в контроле, к третьим -8,46±2,52, к седьмым - 12,63±2,60 и четырнадцатым - 22,09±4,74 мкмоль/л*с. В результате недостаточной эффективности системы АОЗ образовавшиеся активные формы кислорода полностью не инактивируются, в связи с чем наблюдается повышенная пероксидация эритроцитарных мембран. Об этом свидетельствует имеющаяся тенденция к увеличению уровня МДА в эритроцитах к 1 суткам экспериментального бластоцистоза (232,36±8,33 мкмоль/л против 201,39±60,93 в кон-гроле) и наблюдаемое достоверное повышение данного показателя к третьим (377,67±34,95), седьмым (603,56±56,12) и четырнадцатым (489,89±24,17) суткам эксперимента.
С целью обнаружения прямолинейной (г) связи между гепатоспецифичными фемен-тами, отражающими функциональное состояние печени и состоянием системы ПОЛ - АОЗ эритроцитов при экспериментальном бластоцистозе был проведен корреляционный ана-лиз (n=32). Установлено, что существует достоверная, положительная, корреляционная (ависимость между активностью АЛТ (r=0,523), ACT (r=0,703), ЛДГ (r=0,559), ЩФ (r=0,678) в сыворотке крови и содержанием продукта расщепления гидроперекисей липи-дов - МДА в эритроцитах. Также обнаружена достоверная, положительная, умеренная по силе корреляционная зависимость между уровнем активности ГР эритроцитов и ЛДГ в сыворотке крови (г=0,343). Корреляционный анализ выявил факт наличия достоверной обратной зависимости между уровнем активности АЛТ (r=-0,440), ACT (r=-0,714), ЛДГ (r= -0,460), ЩФ (r=-0,783) в сыворотке крови и активностью антиоксиданта - каталазы в эритроцитах.
Таким образом, в условиях экспериментального бластоцистоза наблюдается усиление ПОЛ в эритроцитах при одновременном снижении в них активности ферментов антиоксидантной защиты, прямолинейная корреляционная связь между функциональным состоянием эритроцитов и гепатоцитов.