Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 64-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2005 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.

Скачать сборник целиком (1 мб)

 Проблема неуклонно растущей патологии щитовидной железы (ЩЖ), требует разработки новых патогенетически обоснованных методов лечения тиреоидных заболеваний, направленных на сохранение функции органа [1]. Одним из вариантов коррекции тиреоидной патологии и восстановления функции ЩЖ является ее трансплантация. Проведение антигенспецифической иммуносупрессии, иммунный подбор и аутотрансплантация позволяют снизить иммунные реакции и вероятность отторжения трансплантата ЩЖ и сохранить тиреоидную функцию [2]. Полученные в последнее время данные о свойствах и закономерностях жизнедеятельности стволовых клеток открыли возможность их применения в комплексном лечении тиреоидной патологии [3,4,5].

   Целью исследования явилось изучение возможности восстановления функции ткани щитовидной железы при ее трансплантации в прядь большого сальника с использованием аутологичных адгезирующих кроветворных клеток (ААКК).

150 экспериментальных тиреоидэктомированных животных распределены по следующим группам: I - с трансплантацией участка ткани ЩЖ; II - с трансплантацией тканевого гомогенизата ЩЖ; III - с трансплантацией участка ткани ЩЖ и введением в трансплантат 5 х 105 ААКК; IV - с трансплантацией тканевого гомогенизата ЩЖ и введением в трансплантат 5 х 105 ААКК. Контрольную группу составили 20 интактных животных. ААКК готовили по следующей методике: получали суспензию костномозговых клеток в 1 мл препаровочной среды, содержащей 95% RPMI-1640 и 5% ЭТС. После фильтрации через капроновый фильтр и отмывания клеток путем центрифугирования при 1500 об/мин в течение 10 минут взвесь клеточных элементов в 5 мл препаровочной среды помещали в чашке Петри в СО2-инкубатор с 5% СО2 при 37°С на 90 мин. Адгезирующие элементы отделяли с помощью 0,25% раствора трипсина и 0,02% раствора ЭДТА в соотношении 1:1 в течение 15 минут при тех же условиях. После двукратного отмывания полученные клетки разводили до необходимой концентрации и вводили в трансплантат по 500000 клеток в 0,2 мл препаровочной среды. Оценку функционального состояния трансплантированной ткани ШЖ проводили через 30 суток после операции посредством изучения гормонального (ТТГ, Т4, Т4св., Т3, Т3св) статуса методом иммуноферментного анализа. Морфологического исследования выполняли по стандартной методике (окраска гематоксилин-эозин, увеличение 160х).

   Анализ функциональной состоятельности трансплантата показал значительное снижение, по отношению к контролю, концентрации ТТГ во всех группах, при его минимальных значениях в III-ей и максимальных в IV-й группе (табл.1). Оцененный уровень концентрации Т4св. для I и II групп определен в пределах нормальных значений, а в III и IV значимо превышал таковые, дос­тигая максимальных значений в IV группе. Зафиксировано максимальное от нормы увеличение значения Т3св до 10,34±1,14 пмоль/л в I группе и незначительное увеличение до 7,14±0,38 пмоль/л во II группе. В группах III и IV средние значения данного гормона находились в пределах нормы с минимальными отличиями. Показатели общего Т4 снижены во всех группах, достигая минимума в I группе, наиболее близкий в нижней границе нормы показатель общего Т4 зафиксирован во II группе. Значение общего Т3 соответствует норме во всех группах, с несколько меньшими значениями в группах III и IV.

Таблица 1. Показатели тиреоидного гормонального статуса в экспериментальных группах (среднее±ошибка среднего, X±m)

Данные значения гормонального статуса свидетельствуют об имеющемся тиреотоксикозе во всех группах. Принимая во внимание результат с соответствующим норме Т3св в группах с введением в трансплантат ААКК, можно говорить о развивающемся в данных группах субклиническом тиреотоксикозе, что соответствует высокой степени адаптации трансплантируемой ткани и ее гиперфункции на фоне клеточной стимуляции. Велика вероятность дифференцировки ААКК и их влияния на морфогенез тиреоидной ткани, что подтверждается данными сравнительного морфологического исследования. Сравнивая морфологическую картину в группах I и II с группами III и IV отмечено, что в группах III и IV тиреоидные фолликулы более крупные, стратифицированные, содержат большее количество коллоида, который имеет более яркое окрашивание, менее выражены явления склероза и лимфомакрофагальной инфильтрации, которая носит больше очаговый характер. Активно идет процесс ангиогенеза, что свидетельствует о функциональной состоятельности трансплантата.       

Список литературы:

1. Дедов, И. И., Мельниченко, Г. А., Фадеев В.В. / Эндокринология. – Москва: Медицина, 2000. – 630 с.

2. Попов, О. С., Удут, В. В., Титов, Д. С., Васильченко, Е. Е., Дыгай, А. М., Попова, Н. О., Найденкин, В. И. Способ профилактики послеоперационного гипотиреоза. / Патент на изобретение РФ N2161917 от 20 января 2001 года.

3. Matsumoto, M., Ishiguro, H., Tomita, Y., Inoue, H., Yasuda, Y., Shimizu, T., Shinagawa, T., Hattori, K., Yabe, H., Kubota, C., Yabe, M., Kato, S., Shinohara, O. The changes of thyroid funsion after transplantasion of marrow in young patients. // Pediatr Int. 2004 Jun;46(3):291-5.

4. Curtillet, C., Cuadras, P., Dore, E., Chambost, H., Thuret, I., Michel, G. Impairment thyroid after transplantasion of hemoetic stem precursor-cells in children. // Arch Pediatr. 2004 Nov;11(11):1326-32.

5. Reigh-YiLin, Atsushi., Kubo,Gordon M. Keller,Terry F. Davies. Ability of stem cells to differentiabe into thyrocyte-like cells in vitro. // Endocrinology Vol. 144, No. 6 2644-2649; 2003.