|
ПГФА, Пермь
Эта работа опубликована в сборнике "НАУКИ О ЧЕЛОВЕКЕ" – Сборник статей молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск. - СГМУ. – 2003. – 268 с.
Скачать сборник целиком
В практике судебно-химических экспертиз нередки случаи исследования биообъектов с выраженными гнилостными изменениями. Анализ таких объектов представляет сложную задачу. Продукты бактериального распада и энзиматических процессов увеличивают количество и состав балластных веществ, требующих отделения, делают анализ невозможным без дополнительной очистки.
Нами проведено исследование по выяснению влияния продуктов биодеградации на определение кетотифена в биосубстратах (печень трупа человека, погибшего от травмы), которые после добавления определенных количеств кетотифена хранили в течение 1 и 3 месяцев при комнатной температуре с доступом воздуха. Контрольные пробы (без добавления кетотифена) хранили в тех же условиях. Выделение экстрактивных веществ из контрольных проб и изолирование кетотифена проводили водой, подкисленной щавелевой кислотой (по методике А. А. Васильевой). При отсутствии в методике стадии очистки, в схему изолирования ввели этап осаждения белков за счет их коагуляции при насыщении водного извлечения кристаллическим аммония сульфатом, что может быть достаточным для спектрофотометрического определения кетотифена в свежих объектах, но после хранения биосубстратов 1 и 3 месяца обязательно применяли дополнительно хроматографическую очистку в тонком слое сорбента на стандартных пластинах ВЭТСХ в системе хлороформ-25% раствор аммиака 25:15. (раствор аммиака ставится отдельно в бюксе). Элюирование кетотифена с пластинки проводили 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной и элюаты исследовали УФ-спектрофотометрически. Оптическая плотность элюатов, полученных из контрольных проб (1 и 3 месяца) при сочетанной очистке не превышала 0,007-0,009.
Результаты количественного определения кетотифена при различных сроках хранения биосубстрата представлены в таблице.
|
Таблица
Данные статистической обработки результатов количественного определения кетотифена в биосубстрате при различных сроках хранения
|
|
Время
исследования
|
Добавлено
мг
к 50 г печени
|
n |
Х |
S |
Sx |
ΔХ |
εα
|
| 1-3 дня |
2 |
5 |
55,08 |
2,01 |
0,90 |
1,90 |
3,46 |
| |
10 |
5 |
58,38 |
1,64 |
0,73 |
1,56 |
2,67 |
| 1 месяц |
2 |
5 |
45,77 |
2,44 |
1,09 |
3,03 |
6,06 |
| |
10 |
5 |
44,94 |
3,04 |
1,50 |
2,89 |
6,70 |
| 3 месяца |
2 |
5 |
22,74 |
0,63 |
0,28 |
0,60 |
2,64 |
| |
10 |
5 |
21,22 |
1,59 |
0,71 |
1,51 |
7,10 |
Как видно из данных таблицы кетотифен сохраняется в незаконсервированных биообъектах более 3 месяцев. Однако по мере хранения под влиянием процессов биодеградации субстрата содержание определяемого вещества снижается.
|
