Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Актуальность проблемы. Несмотря на значительные успехи современной медицины в борьбе с инфекционными заболеваниями, туберкулез по-прежнему представляет собой серьезную медико-социальную проблему.
Ведущая роль в обеспечении противотуберкулезной защиты макроорганизма, как известно, принадлежит тканевым и циркулирующим фагоцитам – альвеолярным макрофагам и моноцитам, а также индукторам иммунного воспаления – лимфоцитам. При этом одним из наиболее значимых факторов нарушений иммунных процессов при туберкулезе является структурно-функциональная дестабилизация мембран лейкоцитарных клеток крови, в развитии которой немаловажную роль играют процессы свободно-радикального окисления липидов, привлекающих в настоящее время внимание все большего числа исследователей. Формирование свободных радикалов - важный защитный механизм, лежащий в основе, прежде всего, неспецифической резистентности. Однако чрезмерная активация свободно-радикальных реакций может служить фактором повреждения мембран и ферментов клеток [3]. Важным звеном, обеспечивающим устойчивость живых клеток к свободно-радикальному повреждению, является система антиоксидантов. Механизмы антиоксидантной защиты универсальны и одинаковы для всех типов клеток независимо от их структурно-тканевой организации [5].
Дисбаланс между оксидантной и антиоксидантной системами служит патогенетической основой многих расстройств, в том числе туберкулеза легких. Вместе с тем сведения, касающиеся механизмов формирования окислительных нарушений в иммунокомпетентных клетках крови и их роли в развитии иммунного дисбаланса при туберкулезе легких (равно как и в патогенезе туберкулезной инфекции в целом), являются немногочисленными и фрагментарными.
Целью настоящего исследования явилось изучение активности процессов перекисного окисления липидов и состояния антиоксидантной системы лимфоцитов и моноцитов периферической крови при туберкулезе легких.
Материал и методы исследования. В ходе работы было обследовано 13 мужчин в возрасте 20-55 лет, страдающих туберкулезом легких (ТЛ). Диагноз ТЛ устанавливали на основании данных микроскопии мокроты и рентгенологического исследования легких (общепринятые методы). Контрольную группу составили 12 здоровых мужчин в возрасте 22-55 лет. Материалом исследования служили мононуклеарные лейкоциты периферической крови, взятой утром натощак из локтевой вены. Выделение лимфоцитов и моноцитов из крови осуществляли на градиентах плотности фиколл-урографина 1,077 г/см3 и 1,083 г/см3 соответственно.
Содержание малонового диальдегида (МДА) определяли методом, основанным на способности МДА при высокой температуре и кислом рН взаимодействовать с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) с образованием окрашенного комплекса, имеющего максимум поглощения при длине волны 532 нм. Результаты выражали в мкмоль/мг белка [2].
Концентрацию диеновых коньюгатов (ДК) определяли путем добавления к 0,2 мл лизата мононуклеарных лейкоцитов 4 мл смеси гептан-изопропанол в соотношении 1:1, встряхиванием в течение 15 мин и добавлением 0,5 мл раствора HCl (рН=2,5), чем вызывали расслоение фаз. Спектрофотометрировали верхнюю (гептановую) фазу при длине волны 233 нм против гептана. Результаты выражали в мкмоль/мг белка.
Активность супероксиддисмутазы (СОД) оценивали спектрофотометрически по способности СОД тормозить реакцию автоокисления адреналина [1]. Результаты выражали в у.е./мг белка.
Определение активности каталазы проводили путем добавления к 2 мл 0,03% раствора перекиси водорода 0,1 мл лизата клеток. Пробы инкубировали в течение 10 мин при температуре 370С, добавляли 1 мл 4% раствора молибдата аммония и центрифугировали при 4000 об/мин в течение 10 мин. Оптическую плотность надосадка измеряли при длине волны 410 нм. Активность каталазы выражали в мкат/мг белка.
Результаты исследования. В результате проведенного исследования в моноцитах крови у больных лекарственно-чувствительным туберкулезом легких было выявлено снижение содержания МДА и ДК по сравнению с таковыми у здоровых доноров. Однако уровень МДА и ДК в лимфоцитарных клетках у пациентов с ТЛ не претерпевал существенных изменений относительно нормальных величин. Активность СОД и каталазы у больных ТЛ как в лимфоцитах, так и в моноцитах также практически не отличалась от контрольных значений, хотя прослеживалась тенденция к ее увеличению.
Таким образом, в моноцитах у больных лекарственно-чувствительным ТЛ отмечается снижение интенсивности процессов ПОЛ. Данный факт, по-видимому, объясняется способностью микобактерий туберкулеза ингибировать окислительные процессы в клетках макрофагального ряда, что является своего рода способом защиты возбудителя от действия факторов иммунной системы [4]. При этом активность системы антиоксидантной защиты в мононуклеарных клетках (моноцитах и лимфоцитах) и интенсивность процессов ПОЛ в лимфоцитах у больных ТЛ сохраняется в пределах контрольного уровня.